發(fā)布時間：2020-05-22 12:36

【摘要】：糖尿病腎病(Diabetic nephropathy,DN)是與糖代謝相關(guān)的慢性微血管并發(fā)癥,其發(fā)病率高且后果嚴(yán)重。傳統(tǒng)中醫(yī)藥以整體調(diào)節(jié)、辨證論治的方法治療DN具有獨特的優(yōu)勢,可有效延緩DN進程。但是目前具有良好療效的中藥成方制劑品種仍然較少,因此研制開發(fā)具有DN治療作用的中藥制劑有重要意義。固腎解毒膠囊(Gushen Jiedu Capsule,GSJD)是根據(jù)醫(yī)療機構(gòu)協(xié)定處方固腎解毒方研制而成的醫(yī)院制劑,此方源于南宋洪遵《洪氏集驗方》“水陸二仙丹”,由芡實、金櫻子、黃連、大黃、黃芪、當(dāng)歸六味中藥組成。方中芡實、金櫻子補腎固澀為君,黃連、大黃清熱解毒、降濁祛血瘀為臣,佐以黃芪、當(dāng)歸補氣養(yǎng)血活血,諸藥合用具有補腎降濁、解毒祛瘀之功效,適用于腎陽虛的DN患者。多年臨床研究表明,固腎解毒方對DN療效確切,可有效阻止早期DN發(fā)展到中晚期DN。而研制GSJD首要及關(guān)鍵步驟是其質(zhì)量控制,藥物具有良好的療效也與質(zhì)量控制的穩(wěn)定、可靠緊密相關(guān)。本研究對其進行質(zhì)量控制研究,以鹽酸小檗堿的含量為考察指標(biāo),同時采用DN大鼠模型進一步評價質(zhì)量控制穩(wěn)定的可行性,旨在從質(zhì)量控制和腎功能兩方面綜合評價。1.GSJD的質(zhì)量控制研究采用薄層色譜法(Thin Layer Chromatography,TLC)及高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)對GSJD進行定性和定量研究,TLC鑒定GSJD中分別含有芡實、金櫻子、黃芪、黃連、大黃、當(dāng)歸六味藥材;HPLC定量測定其GSJD中鹽酸小檗堿的含量,并進行方法學(xué)考察。薄層色譜結(jié)果顯示,在相應(yīng)的化合物的位置,顯示相同顏色的斑點,分離效果均較好,結(jié)果穩(wěn)定可靠;HPLC結(jié)果顯示,GSJD的專屬性結(jié)果良好,鹽酸小檗堿在濃度為18.18~181.8μg/ml(r~2=0.9999)的范圍內(nèi)與峰面積呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系,精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性的RSD均小于2%,平均加樣回收率(n=6)為99.5%,RSD為1.4%,三批樣品中鹽酸小檗堿含量測定結(jié)果范圍為8.87~9.63mg/粒,暫定每粒含鹽酸小檗堿不得少于8.00 mg。2.GSJD改善DN大鼠腎功能研究本論文以GSJD對DN大鼠腎功能改善作用的研究,將大鼠隨機分組為正常組和造模組,分別給予高脂飼料合并腹腔注射鏈脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)以建立DN大鼠模型,正常組大鼠以3 ml/kg的劑量腹腔注射0.1 moL/L檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液;造模組則按30 mg/kg腹腔注射1%的STZ溶液(pH=4.2),72小時后尾尖采血檢測空腹血糖,以血糖值高于11.1 mmoL/L做為糖尿病模型成功的標(biāo)準(zhǔn),造模成功后的動物隨機分為模型組、福辛普利組(陽性對照組)、GSJD低、中、高劑量組,分別給藥8周,測定體重、血糖,24 h尿蛋白及相關(guān)血清生化指標(biāo)并對腎臟病理組織結(jié)構(gòu)進行檢查、觀察腎臟組織凋亡情況。結(jié)果顯示GSJD對DN大鼠的體重及空腹血糖并未有明顯的改善,但對其24小時尿中蛋白排泄量有明顯的抑制作用,具有顯著的統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05或P0.001),且有明顯的量效關(guān)系;對血清尿肌酐(Serum Creatinine,Scr)及血清尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)均有改善作用(P0.05或P0.001),且有明顯的量效關(guān)系;病理結(jié)果顯示GSJD對DN大鼠腎組織病理結(jié)構(gòu)具有顯著改善作用(P0.05或P0.001);腎臟組織凋亡情況觀察結(jié)果顯示GSJD對DN大鼠腎臟組織凋亡有改善作用。本研究通過TLC和HPLC法分別對GSJD進行定性、定量研究,質(zhì)量控制結(jié)果穩(wěn)定、可靠,為GSJD改善腎功能作用研究提供了安全性、有效性依據(jù);研究GSJD對DN大鼠腎功能作用研究,從相關(guān)指標(biāo)和腎臟病理結(jié)構(gòu)檢查、及腎臟組織細胞凋亡情況三方面結(jié)果表明對DN大鼠腎功能有改善作用。
【圖文】：

鹽酸小檗堿

圖 2-2 GSJD 工藝流程圖Fig.2-2 Flow chart of extraction technology of GSJD薄層色譜方法與結(jié)果
【學(xué)位授予單位】：河南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R285.5;R284;R-332

【參考文獻】

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本文編號：2676008