發(fā)布時間：2020-05-20 13:21

【摘要】：目的:探討制黃精水煎劑對化療后造血功能抑制致“血虛、虛勞”機體造血系統(tǒng)的影響及作用機制,明確黃精“補諸虛,填精髓”作用的生物學(xué)實質(zhì)及傳統(tǒng)滋補腎精中藥在臨床治療腫瘤、血液疾病中的潛在應(yīng)用價值。方法:本研究采用腹腔注射環(huán)磷酰胺導(dǎo)致小鼠造血功能抑制,并用不同濃度的制黃精水煎劑灌胃,采用血細胞計數(shù)測量外周血細胞數(shù)量;采用臟器稱重方法測量胸腺、脾臟指數(shù);采用MTT法、細胞培養(yǎng)、祖細胞集落分析方法檢測骨髓細胞增殖能力、基質(zhì)細胞對正常骨髓細胞的粘附能力、不同祖細胞集落的產(chǎn)率;采用實時熒光定量PCR,檢測實驗小鼠腎臟的紅細胞生成素及脾臟紅細胞生成素受體的m RNA表達量。結(jié)果:本研究發(fā)現(xiàn)1、制黃精水煎劑低、中、高劑量組均可升高環(huán)磷酰胺致造血功能抑制小鼠的紅細胞、血紅蛋白、血小板和白細胞的值,且呈劑量依賴關(guān)系;其中紅細胞、血紅蛋白、血小板在用藥第7天就開始升高,而白細胞在用藥第14天開始升高。2、制黃精水煎劑各劑量組在用藥第7天,小鼠胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)均呈上升趨勢,同時中、高劑量組脾臟指數(shù)還顯著高于低劑量組;在10、14天時,高劑量組臟器指數(shù)仍然高于生理鹽水組,14天時高劑量組的臟器指數(shù)仍然高于低劑量組,中劑量組脾臟指數(shù)也高于生理鹽水組。3、第7、10、14天時,制黃精水煎劑各劑量組的骨髓細胞增殖能力(吸光度)均顯著高于生理鹽水組,且呈劑量依賴性,高劑量組的吸光度從第7天到第14天的變化為由0.142±0.007上升到0.174±0.005,生理鹽水組的相應(yīng)值0.121±0.007上升到0.126±0.004。4、第10天時,制黃精水煎劑高劑量組將模型組小鼠骨髓基質(zhì)細胞的粘附力由19.45%提高到27.55%。5、灌胃高劑量制黃精水煎劑第10天,小鼠骨髓早期紅系祖細胞、晚期紅系祖細胞、粒-巨噬系祖細胞、巨核系祖細胞集落數(shù)均明顯上升,與灌胃生理鹽水組有顯著差異。6、第10天時,制黃精水煎劑高劑量組腎臟紅細胞生成素基因的表達是灌胃生理鹽水組的近三倍;脾臟紅細胞生成素受體基因的表達也上升,與生理鹽水組有顯著差異。7、灌胃生理鹽水組各時間點、各檢測指標(biāo)值均低于模型組,尤其是各時間點的血紅蛋白含量、14天時的紅細胞含量及10天時的晚期紅系祖細胞集落數(shù),均顯著低于模型組。結(jié)論:本研究證實:1、制黃精水煎劑可通過提高骨髓細胞的增殖能力、促使造血干細胞向不同系別的造血祖細胞分化,促進祖細胞增殖,改善環(huán)磷酰胺致造血功能抑制小鼠的外周血象,但對不同系別的細胞起效時間可能不同。其中對紅細胞的恢復(fù)作用還可以通過促進腎臟分泌紅細胞生成素和提高脾臟紅細胞生成素受體的表達來實現(xiàn)。2、制黃精水煎劑可以提高造血功能抑制小鼠的骨髓基質(zhì)細胞粘附能力,改善造血誘導(dǎo)微環(huán)境的功能,促進造血恢復(fù)。3、制黃精水煎劑可提高造血功能抑制小鼠的脾臟、胸腺指數(shù),提高其機體免疫力。4、長期灌胃可能會對實驗動物造成一定的損傷,必須在實驗中設(shè)置灌胃生理鹽水對照組,以規(guī)避系統(tǒng)誤差。
【圖文】：

4 討論在胚胎發(fā)育第 3 周，人的原始血細胞在卵黃囊壁的血島內(nèi)發(fā)生，第 6 周血內(nèi)的造血干細胞隨血流入肝內(nèi)開始造血，第 12 周逐漸遷至脾內(nèi)造血，胚胎周，也可最早在 12-15 周，骨髓開始造血，成為主要的造血器官，維持終生造能力。骨髓位于骨髓腔，分為紅骨髓和黃骨髓兩種，紅骨髓因含有大量的紅細和不同成熟程度的紅系前體細胞而呈紅色，黃骨髓主要由脂肪細胞組成。胎兒嬰幼兒時期的骨髓均為紅骨髓，，造血活躍，大約從 5 歲開始長骨的髓腔內(nèi)出現(xiàn)肪細胞，逐漸由紅骨髓變?yōu)辄S骨髓，18 歲時幾乎所有的肢體骨的骨髓腔中都黃骨髓，其造血功能也隨之消失。但黃骨髓中仍含少量的造血干細胞，有一定高劑量組 正常組圖 2-1 各組小鼠骨髓基質(zhì)培養(yǎng)第 7 天時的貼壁情況（未染色，200×）

成都中醫(yī)藥大學(xué) 2017 屆碩士學(xué)位論文表 3.1 CFU-E、BFU-E、CFU-GM、CFU-Meg 培養(yǎng)體系的組成CFU-GM CFU-E BFU-E CFU-Meg2-Me(10-4mol/L) 0.2ml 0.2ml 0.2ml 0.2mlL-Glu(3%) 0.03ml 0.03ml 0.03ml 0.03ml胎牛血清 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5mlrhEPO(100IU/ml) - 0.02ml 0.02ml 0.02mlIL-3(40ng/ml) - - 0.05ml -RmGM-CSF(50ng/ml) 0.05ml - -rmTPO(50ng/ml) - - - 0.1mlBMNCs 1×105/ml 1×105/ml 1×105/ml 1×105/mlIMDM To1.9ml To1.9ml To1.9ml To1.9ml3%Agar 0.1ml 0.1ml 0.1ml 0.1ml
【學(xué)位授予單位】：成都中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5

【參考文獻】

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本文編號：2672681