【摘要】：對氧磷酶(PON)是一種人體內(nèi)重要的水解酶,其活性與心腦血管疾病、動脈粥樣硬化、癌癥、Ⅱ型糖尿病等多種疾病相關(guān)。生姜具有抗氧化、抗動脈粥樣硬化、降低膽固醇、增強(qiáng)免疫功能、止吐等多種藥理作用,常用于治療心血管疾病,增加冠脈血流量的作用。因而從生姜中篩選出PON1激動劑組分對于上述一些疾病預(yù)防及治療有著非常重要的研究和實(shí)際意義。采用以9-(4-甲基苯氧羰基)-10-甲基吖啶三氟甲基磺酸鹽作為底物的化學(xué)發(fā)光法評價(jià)中,在粗提液濃度為5.00×10~(-6) g/L時(shí)血清空白組及生姜粗提液實(shí)驗(yàn)組的反應(yīng)動力學(xué)速率常數(shù)K分別為0.0064 min~(-1)、0.0119 min~(-1),激動倍數(shù)為1.86。采用以乙酰苯酚為底物的紫外分光光度法評價(jià)時(shí)發(fā)現(xiàn)生姜粗提液激動活性在濃度為4.00×10~(-5) g/L時(shí)達(dá)到最大。生姜粗提液能激動血清PON1催化吖啶酯水解兩種評價(jià)方法的結(jié)論一致。從生姜粗提液中依次萃取得到石油醚萃取液(PEE)、乙酸乙酯萃取液(EAE)、正丁醇萃取液(n-BE),化學(xué)發(fā)光法評價(jià)時(shí)發(fā)現(xiàn)三種萃取液濃度為8.00×10~(-5) g/L時(shí)都對血清PON1有激動作用,其速率常數(shù)分別為0.0099 min~(-1)、0.0081 min~(-1)、0.0068min~(-1),激動作用的大小為:PEEEAEn-BE。采用紫外分光光度法評價(jià)時(shí)發(fā)現(xiàn)三種萃取液都對血清PON1有激動作用,且激動作用隨著濃度的增大先增大后降低。在萃取液濃度為8.00×10~(-5) g/L時(shí),激動作用的大小為:PEEEAEn-BE,該結(jié)果與化學(xué)發(fā)光法測定相符合。采用柱層析和薄層層析從乙酸乙酯萃取液中首次分離得到2個(gè)混合物(樣品1#、樣品2#)和純組分C(6-姜烯酚)、D、E(對香豆酸)、F(6-姜酚)。采用化學(xué)發(fā)光法評價(jià)時(shí)發(fā)現(xiàn)樣品1#對血清PON1呈抑制作用,抑制作用隨著濃度的增大而增強(qiáng)。樣品2#對血清PON1有激動作用,激動作用隨著濃度的增加先增加后減弱,在濃度為1.00×10~(-4) g/L時(shí),激動作用最大,K=0.01519 min~(-1),激動倍數(shù)為2.44。因此對樣品2#進(jìn)一步分離得到組分A和B(3-羥基-7-甲氧基黃酮)。由于組分A、D的量少,對其無法進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。組分A、B、C對血清PON1有激動,激動作用都隨著濃度的增大先增大后減弱,在各組分濃度為1.00×10~(-4) g/L、2.00×10~(-6) g/L、1.00×10~(-5) g/L時(shí)激動作用達(dá)到最大,K值分別為0.0131min~(-1)、0.0104 min~(-1)、0.0205min~(-1),激動倍數(shù)分別為2.05、1.63、3.20,激動作用的大小為:組分C組分A組分B。組分D、E、F對血清PON1呈抑制作用,抑制作用隨著濃度的增大而增強(qiáng)。采用紫外分光光度法時(shí)發(fā)現(xiàn)組分A、B、C對血清PON1呈激動作用,三種組分的激動作用都隨著濃度增大先增大后降低。在最佳的實(shí)驗(yàn)濃度下,激動活性的大小為:組分A(0.80×10~(-5) g/L,70.60 U/L)組分C(6.00×10~(-5) g/L,64.79 U/L)≈組分B(6.00×10~(-5) g/L,64.59 U/L)。組分E、F對PON1呈抑制作用,在濃度小于4.00×10~(-4) g/L時(shí),組分E的抑制作用大于組分F;在濃度大于4.00×10~(-4) g/L時(shí),組分F對血清的抑制作用大于組分E。采用雙倒數(shù)圖判斷組分E、F的抑制類型,發(fā)現(xiàn)組分E和F為競爭性抑制,平均抑制常數(shù)分別為8.98 mmol/L、9.13 mmol/L,抑制作用強(qiáng)度為:組分F組分E。采用化學(xué)發(fā)光法評價(jià)從石油醚萃取液中得到的組分M及組分N,發(fā)現(xiàn)組分M對血清PON1有激動作用,隨著組分濃度的增大激動作用增大,在濃度為1.0×10~(-4)g/L時(shí),激動作用基本保持不變,K=0.0207 min~(-1),激動倍數(shù)為3.23。而組分N則對血清PON1呈現(xiàn)抑制作用,抑制作用也隨著濃度的增大而增大。但由于后期保存不當(dāng),導(dǎo)致樣品分解,因此對上述組分結(jié)構(gòu)無法鑒定。
【圖文】：

慶大學(xué)碩士學(xué)位論文 1 緒 氯反應(yīng)，生成的草酸酯與過氧化氫及熒光劑反應(yīng)形成有效的發(fā)光體系。除了上述幾種常見的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)體系之外，還有洛粉堿衍生物、二氧雜烷類、羅丹明族化合物化學(xué)發(fā)光體系以及高錳酸鉀、酸性硫酸鈰、稀土配合無機(jī)物化學(xué)發(fā)光體系。1.3.3 吖啶酯類化學(xué)發(fā)光體系吖啶酯類化合物在發(fā)光體系中應(yīng)用最為廣泛。吖啶衍生物包括吖啶酯、光和吖啶酰胺等，其中光澤精是一種應(yīng)用較早且較為廣泛的吖啶酯類化學(xué)發(fā)光，其自身在堿性環(huán)境下就可以產(chǎn)生微弱的化學(xué)發(fā)光，最早的關(guān)于光澤精的研道始于 1935 年[67]。吖啶酯及其衍生物具有相同的吖啶雜環(huán)，因此發(fā)光機(jī)理基是一樣的。由于吖啶酯的發(fā)光效率高，條件溫和，化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)生在 H2O2堿性性溶液的條件下，因此本節(jié)主要針對吖啶酯化學(xué)發(fā)光體系進(jìn)行介紹，發(fā)理如圖 1.1 所示。

基苯氧羰基）-10-甲基吖啶三氟甲基磺酸鹽of 9-(4-methylphenyloxycarbonyl)-10-methylPON1 的水解底物，通過使用合理的的及內(nèi)容、抗動脈粥樣硬化等藥理學(xué)作用與PO 被氧化的生理作用有著密切的聯(lián)系。響，以確定生姜中的有效化學(xué)成分是否發(fā)光試劑，，采用化學(xué)發(fā)光法和紫外分 的激動作用。提法提取生姜中的有效成分，對所得醇萃取，然后分別采用柱層析和薄層得到純的激動組分。測定生姜粗提物
【學(xué)位授予單位】：重慶大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R284;O652

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本文編號：2672559