【摘要】：目的:研究新疆芹菜(Apium graveolens L.)根提取物及其主要成分對L02細胞和HepG2細胞體外脂肪堆積模型脂質(zhì)代謝的影響及作用機制。方法:1、采用游離脂肪酸(free fatty acids,FFA)誘導L02和HepG2細胞建立體外脂肪堆積模型;通過用油紅O染色及測定生化參數(shù)驗證模型是否成功;采用CCK-8試劑盒測定藥物對細胞的毒性,并篩選藥物安全范圍內(nèi)的高、中、低濃度。2、本實驗設定空白(Con)組、模型(FFA)組、菲諾貝特(FF)組,芹菜素(AGN)組、芹菜苷(AIN)組、芹菜根提取物(AGRE)組。通過酶聯(lián)免疫吸附法(Elisa)測定脂肪因子和炎癥因子的含量;qRT-PCR技術檢測ADPN mRNA、AMPK mRNA及SREBP-1c mRNA基因的表達;Western-blot技術檢測P-AMPKα、P-ACC、ACC和SREBP-1_C蛋白的表達。結(jié)果:1、成功建立L02細胞和HepG2細胞體外脂肪堆積模型。AGN,AIN,3?-甲氧基芹菜苷(3?-MI)及AGRE對L02細胞影響的IC_(50)依次是49.90、541.94、224.36、896.00μg/mL;HepG2細胞的IC_(50)依次是64.52、430.23、302.68、961.00μg/mL。AGN,AIN和AGRE能有效降低細胞內(nèi)TG、TC的含量(P0.05)。2、與模型組相比,AGRE、FF、AGN及AIN均明顯降低IL-6和TNF-α的含量(P0.05),FF組中脂聯(lián)素(adiponectin,ADPN)分泌蛋白的表達明顯增加。AGN組、AIN組及AGRE組呈劑量依賴性的增加ADPN mRNA和AMPK mRNA的表達,降低SREBP-1c mRNA的表達。此外,也明顯增加P-AMPKα及P-ACC蛋白的表達,減少SREBP-1_C和ACC蛋白的表達。結(jié)論:新疆芹菜根提取物具有可靠的調(diào)脂作用,可能通過調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝中AMPK/SREBP-1c信號通路。本研究可為開發(fā)防治非酒精性脂肪肝病(non-alcohol fatty liver disease,NAFLD)等脂質(zhì)代謝紊亂相關疾病的藥物提供實驗依據(jù)。
【學位授予單位】：新疆醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R285

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本文編號：2672062