發(fā)布時(shí)間：2020-05-18 14:30

【摘要】：背景:益智仁是姜科(Zingiberaceae)山姜屬(Alpinia)植物益智(A.Oxyphylla Miq.)的干燥成熟果實(shí),主要分布于廣東、廣西、海南、福建等地。益智仁為海南道地藥材,與檳榔、砂仁、巴戟天合稱為我國的四大南藥,其具有溫脾止瀉攝涎,暖腎固精縮尿的功效。為了更深入地了解益智的藥效物質(zhì)基礎(chǔ),本論文首先對(duì)益智仁95%乙醇提取物乙酸乙酯部位的化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)的研究,其次對(duì)益智仁的不同極性部位浸膏及單體化合物進(jìn)行了抗腫瘤和抑菌活性的探究。目的:本研究旨在研究益智仁乙酸乙酯部位的化學(xué)成分,明確其所含的化合物成分,并對(duì)分離鑒定得到的新穎化合物進(jìn)行藥理活性探究,為進(jìn)一步研究開發(fā)該植物的藥用價(jià)值做好鋪墊。方法:本文利用正相硅膠柱、反相MCI柱、Sephadex LH-20凝膠柱以及半制備液相等方法對(duì)益智仁進(jìn)行提取、分離、純化,并結(jié)合理化常數(shù)測(cè)定和現(xiàn)代波譜技術(shù)對(duì)分離得到的化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。采用CCK-8法對(duì)益智仁的不同極性部位浸膏及分離得到的單體化合物進(jìn)行抗腫瘤活性研究,采用抑制菌絲生長(zhǎng)速率法進(jìn)行抑菌活性研究。結(jié)論:(1)從益智仁的乙酸乙酯部位分離出18個(gè)化合物,鑒定出17個(gè)化合物,其中有9個(gè)化合物為首次從該植物中分離得到,8個(gè)化合物為首次從該屬植物中分離得到。分離到的17個(gè)化合物中有7個(gè)二苯基庚烷類,2個(gè)黃酮類,4個(gè)萜類,4個(gè)其它類,分別是鄰苯二甲酸-雙(2′-乙基庚基)酯(化合物1)、1-(4′-羥基苯基)-7-(3″-甲氧基-4″-羥基苯基)-4-烯-3-庚酮(化合物2)、益智酮甲(化合物3)、(E)-1-(4-hydroxy-3-methoxy-phenyl)-7-(4-hydroxy-phenyl)-hept-4en-3-one(化合物4)、5-dehydroxy-hexahydrodemethoxycurcumin-B(化合物5)、5-hydro xy-7-(4"-hydroxy-3"-methoxyphenyl)-1-phenyl-3-heptanone(化合物6)、dihydrogi ngerenone B(化合物7)、楊芽黃素(化合物8)、白楊素(化合物9)、oxyphyl lenone B(化合物10)、(1R,4R,10R)-1β,4α-dihydroxy-11,12,13-trinor-5,6-eudesme n-7-one(化合物11)、1β,4β,7β-trihydroxyeudesmane(化合物12)、bullatantriol(化合物13)、1,5-epoxy-3-hydroxy-1-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)-7-(4-hydr oxy-3-methoxyphenyl)heptanes(化合物14)、十五甲基四十烷(化合物15)、1-tetratriacontanol(化合物16)、胡蘿卜苷(化合物17)。(2)以A549、MCF-7、SW620、SMMC-7721、4T1細(xì)胞為受體細(xì)胞,采用CCK-8法對(duì)益智仁不同極性部位浸膏(石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、水部位)及分離得到的單體化合物進(jìn)行抗腫瘤活性的研究。研究結(jié)果表明益智仁石油醚部位及乙酸乙酯部位浸膏具有較好抑制細(xì)胞增殖的作用;乙酸乙酯部位對(duì)五種腫瘤細(xì)胞均有抑制作用,且藥物濃度在25-800μg/m L間存在一定的劑量依賴性;單體化合物初篩的結(jié)果表明除了化合物11、化合物15、化合物18沒有抑制細(xì)胞增殖的作用,其它均有一定抑制細(xì)胞增殖的作用。其中就化合物類型而言,二苯基庚烷類化合物抑制細(xì)胞增殖的作用均較強(qiáng)。(3)以小麥赤霉病菌、煙草赤星病菌、馬鈴薯干腐病菌和馬鈴薯枯萎病菌為受試菌株,采用抑制菌絲生長(zhǎng)速率法對(duì)益智仁不同極性部位浸膏(石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、水部位)及分離得到的單體化合物進(jìn)行抑菌活性的研究。結(jié)果表明益智仁石油醚部位及乙酸乙酯部位抑菌作用較強(qiáng);乙酸乙酯部位浸膏對(duì)4種病原真菌均有抑制作用,在受試范圍內(nèi)(0.0625-1.0 mg/m L),隨著藥物濃度的增加,抑菌作用逐漸增強(qiáng),其中對(duì)小麥赤霉菌的抑制作用最明顯;單體化合物初篩的結(jié)果表明除了化合物15沒有抑菌作用,其它化合物均有強(qiáng)弱不同的抑菌作用,但化合物5的抑菌作用最明顯,抑菌率達(dá)到了61.6%。
【圖文】：

第一章 山姜屬藥用植物的研究進(jìn)展katsumadai Hayata）、紅豆蔻（Alpinia galangal Willd.）及一些民間草藥和民族藥均來自于該屬。此外，山姜、高良姜、大高良姜、益智、艷山姜等植物在《中華本草》中也有收載。該屬植物的入藥部位大多為植物的根莖或果實(shí)，具有抗菌消炎、暖胃止吐、消食鎮(zhèn)痛的功效[5]。山姜屬植物耐光耐陰，也是我國重要的林下經(jīng)濟(jì)作物。砂仁、生姜等在林下大規(guī)模的種植，既合理利用了資源，也增加了農(nóng)民的經(jīng)濟(jì)收入。此外，山姜屬植物花鮮艷奪目，，苞片奇異美麗，葉色彩斑駁，具有很高的觀賞價(jià)值，可用作庭院觀賞。山姜屬植物資源豐富，應(yīng)用價(jià)值非常高，經(jīng)過查閱和分析近十年有關(guān)山姜屬植物的文獻(xiàn)，相關(guān)研究主要集中在化學(xué)成分和藥理作用等方面，其次在指紋圖譜、提取工藝優(yōu)化、含量測(cè)定和遺傳多樣性等方面亦有較多報(bào)道。近 10 年有關(guān)山姜屬的研究統(tǒng)計(jì)如圖 1.1 所示。

均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差的方式表示。借助軟件 origin 7.5 把測(cè)定結(jié)果繪制成增殖抑制曲線圖，求出 IC50值。細(xì)胞抑制率的計(jì)算公式如下：抑制率（%）=正常對(duì)照組 OD 值－藥物組 OD 值×100%正常對(duì)照組OD值－空白對(duì)照組OD值驗(yàn)結(jié)果與分析四種浸膏對(duì) 5 種腫瘤細(xì)胞增殖的影響。鼠乳腺癌細(xì)胞株（4T1）、人乳腺癌細(xì)胞株（MCF-7）、人肺癌細(xì)胞株（細(xì)胞株（SMMC-7721）、人結(jié)腸腺癌細(xì)胞株（SW620）這 5 種腫膏作用下的增殖情況如圖 3.1 所示。從圖中我們可以明顯看出樣品mL 時(shí)，5 種腫瘤細(xì)胞在益智仁石油醚部位（PE）、乙酸乙酯部位（部位（n-BU）和水部位（WF）四種浸膏的作用下，石油醚部位抑制率均在 50%以上。相對(duì)于正丁醇部位和水部位而言，石油醚部部位具有較強(qiáng)的抗增殖作用。
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R284;R285

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本文編號(hào)：2669866