【摘要】：探討在體外環(huán)境下槐杞黃清膏(Huaiqihuang cream,HQH)對(duì)小鼠腎臟系膜細(xì)胞(Mouse mesangial cells,MMC)增殖、細(xì)胞周期分布及細(xì)胞周期相關(guān)蛋白p21、Cyclin A的影響。方法:1.在體外環(huán)境下培養(yǎng)小鼠腎臟系膜細(xì)胞(MMC),實(shí)驗(yàn)共分為4組:正常對(duì)照組、槐杞黃清膏處理組(濃度分別為8mg/ml、16mg/ml、24mg/ml)。2.使用CCK-8實(shí)驗(yàn)方法檢測槐杞黃清膏處理24h、48h、72h后小鼠系膜細(xì)胞的增殖情況,計(jì)算各組的抑制率,分別與正常對(duì)照組比較。3.使用流式細(xì)胞儀檢測各濃度槐杞黃清膏處理48h后小鼠系膜細(xì)胞的細(xì)胞周期分布情況,并與對(duì)照組對(duì)比。4.槐杞黃清膏處理48h后,采用Western Blotting方法檢測各組細(xì)胞周期相關(guān)蛋白Cyclin A及p21蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果:1.通過倒置顯微鏡可觀察槐杞黃清膏處理后細(xì)胞形態(tài)與正常對(duì)照組不同。2.不同濃度(8mg/ml-24mg/ml)的槐杞黃清膏處理24、48、72h后,各HQH處理組的吸光度均顯著低于對(duì)照組(P0.01),提示上述濃度的槐杞黃清膏均對(duì)小鼠腎臟系膜細(xì)胞的增殖有阻滯作用。3.各HQH處理組作用48h后,流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示:S期細(xì)胞比例明顯增高(P0.05),說明槐杞黃清膏阻滯小鼠系膜細(xì)胞增殖可能是通過將細(xì)胞周期阻滯于S期來實(shí)現(xiàn)的。4.槐杞黃清膏處理48h后,檢測細(xì)胞周期相關(guān)蛋白CyclinA、p21的表達(dá),結(jié)果顯示:CyclinA的表達(dá)明顯下調(diào),而p21的表達(dá)明顯上調(diào)(P0.01)。結(jié)論:一定濃度的槐杞黃清膏對(duì)小鼠腎臟系膜細(xì)胞的增殖具有抑制作用,而這種抑制增殖的作用可能與其影響細(xì)胞周期相關(guān)蛋白的表達(dá),進(jìn)而將細(xì)胞周期阻滯于S期有關(guān)。
【圖文】：

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文2 結(jié) 果與加藥處理后的小鼠系膜細(xì)胞形態(tài)的小鼠系膜細(xì)胞復(fù)蘇后呈圓形，透亮度較高，貼壁后逐漸伸展開胞體周圍伸出多條觸角，繁殖速度很快，大約 24-36 小時(shí)即可長滿，，隨后生長速度減慢，呈現(xiàn)接觸抑制。入槐杞黃清膏處理的小鼠系膜細(xì)胞，可以觀察到細(xì)胞從貼壁到完全，培養(yǎng)相同時(shí)間，細(xì)胞密度明顯少于正常組，且細(xì)胞形態(tài)較正常組。形態(tài)見圖 2-1。

制率也在逐漸增加，呈現(xiàn)出一定的劑量依賴性，并且隨著時(shí)間的延長，抑制率也定的增加，呈現(xiàn)一定的時(shí)間依賴性。（見表 2-1 及圖 2-2）表 2-1 不同培養(yǎng)條件下各組吸光度值的比較（ x±s）（n=3）組別吸光度 抑制率（%）24h48h 72h 24h 48h 7對(duì)照組 0.75±0.081.38±0.14 1.53±0.118mg/ml 組 0.38±0.03*0.37±0.05*0.40±0.04*49.33 73.19 736mg/ml 組 0.28±0.01*0.32±0.01*0.33±0.02*62.67 76.81 784mg/ml 組 0.21±0.01* 0.27±0.01*0.29±0.02*62.67 80.43 81注：與對(duì)照組相比，P*<0.01
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R285.5

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2668399