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小兒開(kāi)胃增食合劑對(duì)幼齡厭食癥模型大鼠Ghrelin、VIP及其受體表達(dá)影響的研究

發(fā)布時(shí)間:2020-05-16 12:22
【摘要】:目的:探討小兒開(kāi)胃增食合劑對(duì)厭食癥幼齡大鼠胃竇及空腸組織中Ghrelin、VIP及其受體表達(dá)的影響。方法:SPF級(jí)幼齡SD大鼠60只,雌雄各半,其中空白對(duì)照組12只,常規(guī)飼料喂養(yǎng);造模組48只,按病因模擬法予特制飼料喂養(yǎng),建立厭食癥模型。造模成功后,將造模組隨機(jī)分為4組,即模型對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組(江中健胃消食片組)、小兒開(kāi)胃增食合劑低劑量組(簡(jiǎn)稱(chēng)低劑量組)、小兒開(kāi)胃增食合劑高劑量組(簡(jiǎn)稱(chēng)高劑量組),每組12只。予以小兒開(kāi)胃增食合劑治療6周后,以10%水合氯醛麻醉并脫臼處死,采集樣本。每只大鼠取胃竇及空腸部組織,部分組織甲醛常規(guī)固定,HE染色后鏡下觀察組織病理改變并對(duì)其評(píng)分;部分組織置于液氮中,-80℃保存,以熒光定量PCR法和WesternBlot法分別檢測(cè)大鼠胃竇及空腸組織Ghrelin、VIP及其受體mRNA的表達(dá)變化和蛋白的表達(dá)變化。結(jié)果:1.病理切片顯示,對(duì)于胃竇組織,與空白對(duì)照組比較,模型對(duì)照組黏膜層損傷嚴(yán)重,大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),平滑肌細(xì)胞排列紊亂。經(jīng)治療后,陽(yáng)性藥物組與小兒開(kāi)胃增食合劑高劑量組可見(jiàn)炎性細(xì)胞減少,黏膜結(jié)構(gòu)逐漸趨于完整。對(duì)于空腸組織,與空白對(duì)照組相比較,模型對(duì)照組絨毛變短變寬,較稀疏,有明顯的炎性細(xì)胞浸潤(rùn),黏膜肌層有大量的炎癥細(xì)胞。經(jīng)治療后,陽(yáng)性藥物組和小兒開(kāi)胃增食合劑高劑量組腸絨毛明顯增長(zhǎng)、增寬,隱窩深度增加,且炎細(xì)胞大量減少。2.與空白對(duì)照組比較,模型對(duì)照組大鼠胃竇及空腸組織中Ghrelin及其受體GHSR、VIP及其受體VPAC2的mRNA表達(dá)均顯著下調(diào)(P0.05)、其蛋白表達(dá)均明顯降低(P0.05);經(jīng)小兒開(kāi)胃增食合劑治療后,與模型對(duì)照組比較,陽(yáng)性對(duì)照組、高劑量組胃竇及空腸組織中Ghrelin及其受體GHSR、VIP及其受體VPAC2的mRNA表達(dá)均顯著上調(diào)(P0.05)、其蛋白表達(dá)均明顯升高(P0.05)。結(jié)論:1.小兒開(kāi)胃增食合劑能減輕幼齡厭食癥模型大鼠胃竇組織黏膜層炎癥反應(yīng)程度,改善黏膜層損傷。2.小兒開(kāi)胃增食合劑能改善幼齡厭食癥模型大鼠空腸組織黏膜層絨毛長(zhǎng)度,寬度,及隱窩深度,促進(jìn)其絨毛的修復(fù)。3.小兒開(kāi)胃增食合劑可以上調(diào)胃竇及空腸組織中Ghrelin及其受體GHSR、VIP及其受體VPAC2的mRNA及蛋白的表達(dá)。其對(duì)Ghrelin及其受體GHSR、VIP及其受體VPAC2的mRNA及蛋白表達(dá)的上調(diào)作用,可能是小兒開(kāi)胃增食合劑治療小兒厭食癥的作用機(jī)制之一。
【圖文】:

細(xì)胞分布,大鼠胃,HE染色,黏膜層


陽(yáng)性對(duì)照組 低劑量組 高劑量組圖 1 各組大鼠胃竇黏膜組織切片 HE 染色鏡下表現(xiàn)(×200)Fig. 1 HE staining microscopic appearance of gastric antrum mucosa sections of rats in each group(×200)空白對(duì)照組:胃黏膜 HE 染色呈粉紅色。細(xì)胞分布均勻,,形態(tài)正常,平滑肌細(xì)胞排列正常。模型對(duì)照組:與空白對(duì)照組相比較,黏膜層出現(xiàn)大量炎癥,粘膜層損傷嚴(yán)重,有大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),平滑肌細(xì)胞紊亂。藥物組:與模型對(duì)照組相比較,藥物組炎性細(xì)胞大量減少,黏膜結(jié)構(gòu)逐漸趨于完整,高劑量組和陽(yáng)性對(duì)照組治療效果最為明顯,趨近正常組。胃竇炎癥程度評(píng)分標(biāo)準(zhǔn):根據(jù)黏膜層慢性炎性細(xì)胞的密集程度和浸潤(rùn)深度分級(jí)。0:每個(gè)高倍鏡視野下不超過(guò) 5 個(gè)細(xì)胞(包括光鏡下無(wú)法區(qū)分的淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞等),如數(shù)量略超過(guò)正常,病理可診斷為基本正常;+:慢性炎性細(xì)胞較少并局限于黏

空腸,HE染色,大鼠,統(tǒng)計(jì)學(xué)意義


高劑量組 12 1.67±0.52*&注:與空白對(duì)照組比較#P<0.05;與模型對(duì)照組比較*P<0.05;與陽(yáng)性對(duì)照組比較&P<0.05。由表 2-1 結(jié)果顯示,與空白對(duì)照組比較,模型對(duì)照組炎細(xì)胞密集程度與浸潤(rùn)深度評(píng)分明顯增高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),而經(jīng)過(guò)藥物干預(yù)后,各藥物組與模型對(duì)照組比較,其炎癥程度評(píng)分顯著下降,其中以陽(yáng)性對(duì)照組和高劑量組最為明顯,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。2.2 空腸組織 HE 染色病理切片觀察與評(píng)分空白對(duì)照組 模型對(duì)照組
【學(xué)位授予單位】:甘肅中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類(lèi)號(hào)】:R285.5;R-332

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