【摘要】：目的:探討苦參素能否通過調(diào)控三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員2(ATP-binding cassette superfamily G member 2,ABCG2)表達(dá)影響阿霉素抗人肝癌耐藥裸鼠移植瘤的作用。方法:裸鼠腋下接種人肝癌細(xì)胞HepG2/阿霉素耐藥細(xì)胞(HepG2/ADM),構(gòu)建移植瘤模型。將20只雌性裸鼠隨機分成對照組、阿霉素組、苦參素組、聯(lián)合組(阿霉素聯(lián)合苦參素)。干預(yù)14d后,取出瘤體,HE染色法觀察移植瘤組織細(xì)胞的形態(tài),RT-qPCR檢測ABCG2的mRNA水平,免疫組化及ELISA法檢測ABCG2蛋白水平,并對組間數(shù)據(jù)進行對比。結(jié)果:(1)我們觀察發(fā)現(xiàn)藥物干預(yù)以后對照組裸鼠剛開始精神狀態(tài)及生活習(xí)性無明顯改變,到后期隨瘤體增大而表現(xiàn)為精神及睡眠不佳,進食減少;阿霉素組裸鼠表現(xiàn)為精神差、活動量下降、進食及大小便減少,而苦參組及聯(lián)合組裸鼠一般情況良好,精神狀態(tài)、睡眠、飲食及大小便均未見明顯改變。(2)HE染色法結(jié)果顯示:與對照組相比,阿霉素組抗移植瘤壞死作用不明顯,其他兩組有促移植瘤壞死作用;與單獨苦參素組相比,聯(lián)合組促移植瘤壞死效果更好。(3)RT-qPCR檢測結(jié)果顯示:與對照組相比,阿霉素組ABCG2 mRNA表達(dá)上升,苦參素組和聯(lián)合組ABCG2 mRNA表達(dá)下降(P0.05)。(4)免疫組化結(jié)果顯示ABCG2陽性染色呈棕色,大多分布在胞漿內(nèi),部分在胞膜;與對照組相比,阿霉素組ABCG2蛋白表達(dá)較高,苦參素組和聯(lián)合組中ABCG2蛋白水平明顯下降(P0.05)。(5)ELISA結(jié)果顯示:與對照組相比,阿霉素組ABCG2蛋白表達(dá)上調(diào),苦參素組和聯(lián)合組中ABCG2蛋白表達(dá)均降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1、苦參素可減輕阿霉素的藥物不良反應(yīng),改善實驗裸鼠生存質(zhì)量;2、苦參素可提高阿霉素抗人肝癌耐藥裸鼠移植瘤的抑瘤作用及促進肝癌對阿霉素的敏感性,其機制可能與下調(diào)ABCG2 mRNA與蛋白表達(dá)有關(guān)。
【圖文】：

果瘤情況及裸鼠一般情況實驗發(fā)現(xiàn)接種人肝癌 HepG2/ADM 細(xì)胞后約 7 天左右可見腫瘤生長，大約 1瘤直徑約 0.6cm，未見裸鼠死亡現(xiàn)象，成瘤率 100%，造模成功。我們觀察預(yù)以后對照組裸鼠剛開始精神狀態(tài)及生活習(xí)性無明顯改變，到后期隨瘤體增精神及睡眠不佳，進食減少；阿霉素組裸鼠表現(xiàn)為精神差、活動量下降、進減少，而苦參組及聯(lián)合組裸鼠一般情況良好，，精神狀態(tài)、睡眠、飲食及大小顯改變。

圖 2-2 干預(yù) 14 天后各組移植瘤大小Figure2-2 xenograft sizes in four groups after intervention for 14 days注：A：對照組；B：阿霉素組；C：苦參素組；D：聯(lián)合組E 染色結(jié)果對比 200 倍數(shù)光學(xué)顯微鏡下觀察 HE 染色（參見圖 2-3）。鏡下觀察移植瘤的形態(tài)的形態(tài)相似，體現(xiàn)為肝癌實體：細(xì)胞質(zhì)為嗜堿性，核漿比例增多，核分裂較胞有脂肪變性的現(xiàn)象，有些呈現(xiàn)小片或大量細(xì)胞壞死。對照組（圖 2-3A）與（圖 2-3B）鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)大致相仿，僅見少許細(xì)胞出現(xiàn)核固縮，未見核碎解，提示細(xì)胞壞死較少。在苦參素組（圖 2-3C）中可見大部分細(xì)胞出現(xiàn)核固生核碎裂，未見核溶解現(xiàn)象。在聯(lián)合組（圖 2-3D）中可見大量細(xì)胞壞死，表分細(xì)胞發(fā)生核碎裂，甚至發(fā)生核溶解現(xiàn)象。
【學(xué)位授予單位】：右江民族醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R285.5

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 高志強;汪俊峰;陳德華;馬雪松;唐哲;;乳腺癌耐藥蛋白基因在肝癌組織的表達(dá)的臨床意義及抑制其表達(dá)對肝癌細(xì)胞增殖凋亡的影響[J];中華實驗外科雜志;2018年04期

2 沈曉紅;徐象威;楊周亮;;ABCG2表達(dá)水平與乳腺癌術(shù)后蒽環(huán)類藥物化療療效和耐藥性的關(guān)系[J];中國生化藥物雜志;2017年01期

3 馬鵬;孟存英;劉鵬飛;郝婷婷;馮義朝;;氧化苦參堿對晚期肝癌患者AFP、CEA和CA125影響研究[J];陜西中醫(yī);2015年11期

4 張紅梅;劉學(xué)杰;王婧雅;張小茜;;HIF-2α、ABCG2、OCT-4與胃癌化療耐藥的關(guān)系研究[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2015年10期

5 楊先照;江鋒;葉永安;;抗纖抑癌方調(diào)控HGF/c-Met mRNA干預(yù)肝癌前病變的實驗研究[J];世界中醫(yī)藥;2015年09期

6 宋藝君;楊史軍;王湘;張東星;馮麗莉;孫燕;蔡大勇;王sョ

本文編號：2665932