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等離子體誘變靈芝及其藥用成分的紅外光譜分析

發(fā)布時間:2020-05-16 00:30
【摘要】:靈芝(Ganoderma lingzhi)是靈芝科靈芝屬真菌,自古以來就受到亞洲國家傳統(tǒng)醫(yī)藥學(xué)的重視。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明,靈芝具有抗腫瘤,降血脂,降血糖,保肝、治療腎炎、治療高血壓等多方面效果。因而無論是中國還是美國,都已將靈芝列入國家藥典范圍之內(nèi)。靈芝中最主要的藥用成分是靈芝多糖和靈芝三萜。為擴(kuò)大靈芝種質(zhì)資源,篩選獲得藥用價值更高的靈芝菌株,我們以靈芝多糖和三萜含量較高的菌株為出發(fā)株,進(jìn)行以介質(zhì)阻擋(DBD)方式的低溫等離子體放電處理,并進(jìn)行誘變育種。通過對處理的菌株進(jìn)行RAPD檢測確認(rèn),共獲得了 10株DBD誘變菌株。這些菌株在液體發(fā)酵過程中菌絲體生長狀態(tài),包括菌絲球大小、形態(tài)、顏色、生物量、生長速度差異明顯。部分誘變菌株靈芝多糖含量與出發(fā)株相比發(fā)生了顯著改變。為了對靈芝藥用成分進(jìn)行分析,我們應(yīng)用和發(fā)展了靈芝有效藥用成分的紅外光譜的分析方法。靈芝菌絲中含有豐富的靈芝多糖,我們應(yīng)用紅外光譜對靈芝多糖進(jìn)行檢測和分析。通過對靈芝發(fā)酵菌絲體中紅外光譜((Mid-infrared,mid-IR))和近紅外光譜(near infrared,NIR)光譜檢測,研究發(fā)現(xiàn),靈芝多糖的mid-IR光譜特征性峰位是1425和1078 cm-1 NIR光譜的特征性位置是4307和4405cm-1。上述位置可以用于靈芝多糖的mid-IR和NIR光譜定性分析。同時,根據(jù)靈芝多糖化學(xué)測定結(jié)果,結(jié)合NIR光譜,構(gòu)建了基于NIR的靈芝多糖定量模型,該定量分析模型選擇的光譜范圍為(5268.8~4000 cm-1),預(yù)處理方式為一階導(dǎo)數(shù),校正集的維數(shù)=6,R2=0.9779,RMSECV=0.467,RPD=6.73,預(yù)測集的RMSEP=0.603,RPD=3.13,相關(guān)系數(shù)=0.9554。進(jìn)一步,通過對誘變靈芝光譜的檢測,確定上述NIR模型同樣適合于誘變靈芝發(fā)酵菌絲體多糖的定量分析,其RMSEP=0.445,Bias=0.132,RPD=2.75,相關(guān)系數(shù)=0.9684。通過近紅外光譜分析,證實(shí)了高產(chǎn)菌株RWY-1較出發(fā)株多糖含量提高25.6%。另外,靈芝三萜作為靈芝中另一種重要的藥用活性成分,我們也應(yīng)用紅外光譜技術(shù)對發(fā)酵靈芝菌絲體的三萜成分進(jìn)行檢測分析。結(jié)合其它常規(guī)化學(xué)測定方法,我們發(fā)展了靈芝三萜的紅外光譜定性和定量分析方法。通過對不同來源靈芝子實(shí)體和菌絲體進(jìn)行mid-IR和NIR光譜檢測,我們確定了靈芝三萜的特征性峰位。在中紅外光譜中,其特征性峰位分別位于1736、1377和1248cm-1。在近紅外光譜中,其特征性位置分別為5902、4415和4350cm-1。上述mid-IR和NIR特征性位置可用于靈芝三萜的定性分析。以此為基礎(chǔ),構(gòu)建了靈芝三萜基于NIR的定量分析模型。其選取光譜譜段為(5963.1~5662.3 cm-1)+(4412.56~4350.85 cm-1),預(yù)處理方式為一階導(dǎo)數(shù)。校正集模型維數(shù)=4,R2=0.8857,RMSECV=0.267,RPD=2.97,Bias=-0.0195,具有較好的定量分析效果。
【學(xué)位授予單位】:中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)
【學(xué)位級別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:S567.31;R284

【參考文獻(xiàn)】

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1 王純陽;萬良m,

本文編號:2665862


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