發(fā)布時間：2020-05-12 16:16

【摘要】：目的1探討坤泰膠囊對卵巢早衰大鼠卵巢組織脂肪酸合成酶(Fas)及凋亡相關(guān)因子配體(FasL)的作用機(jī)制;2探討坤泰膠囊對卵巢早衰大鼠卵巢功能病理性損傷的修復(fù)作用及生殖功能的影響。方法將84只12周齡SD雌性大鼠隨機(jī)分卵巢功能組和生殖功能組兩個大組,分別觀察卵巢功能和生殖功能,每個大組分為空白組、模型組、坤泰膠囊高、中、低劑量組及結(jié)合雌激素片組,每組各7只。除空白組正常(自由食水)喂養(yǎng)外,其余各組大鼠均用雷公藤多苷片灌胃法(75mg/kg,給藥14天)建立大鼠卵巢早衰模型。造模結(jié)束后,模型組給予2mL/kg生理鹽水灌胃;坤泰膠囊組及結(jié)合雌激素片組分別予坤泰膠囊高、中、低劑量(1.2g、0.6g、0.3g/kg,給藥36天)及結(jié)合雌激素片(0.075mg/kg,給藥36天)灌胃治療。卵巢功能組觀察所有大鼠的行為學(xué)改變、動情周期變化、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法檢測大鼠血清性激素卵泡刺激素(FSH)、黃體生成素(LH)、雌二醇(E_2)、抗苗勒管激素(AMH)水平變化、光鏡下觀察大鼠卵巢組織形態(tài)學(xué)變化、免疫組化法及實(shí)時熒光定量PCR法檢測大鼠卵巢脂肪酸合成酶(Fas)、凋亡相關(guān)因子配體(FasL)蛋白及基因含量。生殖功能組所有雌性大鼠與12只SD雄性大鼠進(jìn)行合籠試驗(yàn),觀察記錄孕鼠及子鼠的一般情況,觀察各組雌性大鼠的產(chǎn)仔數(shù)、受孕率、妊娠率及子代小鼠畸形率。結(jié)果1對大鼠行為學(xué)的影響:空白組所有大鼠在整個實(shí)驗(yàn)過程中并未出現(xiàn)行為學(xué)異常表現(xiàn);模型組大鼠造模期間可出現(xiàn)精神不振,活動減少,喜蜷縮,脫毛,弓背等表現(xiàn);所有治療組大鼠在造模期間均出現(xiàn)模型組大鼠的行為學(xué)表現(xiàn),但經(jīng)藥物治療后,坤泰膠囊高、中劑量組及結(jié)合雌激素片組大鼠行為學(xué)改變逐漸趨于正常;坤泰膠囊低劑量組大鼠治療效果欠佳,表現(xiàn)為精神欠佳,脫毛及弓背稍有好轉(zhuǎn)等。2空白組大鼠在整個實(shí)驗(yàn)過程中均可出現(xiàn)規(guī)律的動情周期,約為4~5天;模型組大鼠的動情周期延長,為6~8天;與空白組結(jié)合雌激素片組相比,模型組和坤泰膠囊低劑量組大鼠動情周期出現(xiàn)延長或紊亂,紊亂率分別為100%和85.71%,動情周期差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3對大鼠血清激素水平的影響:與空白組和結(jié)合雌激素片組相比,坤泰膠囊低劑量組大鼠血清FSH、LH、E_2、AMH濃度差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與模型組相比,其余各組大鼠血清FSH、LH、E_2、AMH濃度差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4對大鼠卵巢組織形態(tài)學(xué)的影響:空白組大鼠鏡下可見各級卵泡均比較活躍、豐富,卵泡發(fā)育良好,卵泡結(jié)構(gòu)清晰,還可見到豐富的血管;模型組大鼠卵泡發(fā)育較差,卵泡結(jié)構(gòu)紊亂,可見閉鎖卵泡及病理性纖維化增生;與空白組和結(jié)合雌激素片組相比,坤泰膠囊低劑量組大鼠卵泡發(fā)育欠佳,卵泡結(jié)構(gòu)欠清晰;與模型組相比,其余各組大鼠可見卵泡發(fā)育較好,卵泡結(jié)構(gòu)較清晰,閉鎖卵泡數(shù)量較少。5對大鼠卵巢Fas、FasL蛋白及基因表達(dá)影響:與空白組和結(jié)合雌激素片相比,坤泰膠囊低劑量組大鼠卵巢Fas蛋白及基因表達(dá)均明顯降低,FasL蛋白及基因表達(dá)均明顯升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與模型組相比,其余各組大鼠卵巢Fas蛋白及基因表達(dá)均明顯升高,FasL蛋白及基因表達(dá)均明顯降低(P0.05)。6對孕鼠及子鼠的一般情況的影響:本試驗(yàn)除模型組大鼠未受孕外,其余各組大鼠均為受孕鼠�？瞻捉M孕鼠各方面機(jī)能良好;坤泰膠囊低劑量組孕鼠精神欠佳,活動稍顯遲緩,攝食量增長稍慢,于孕0天顯著低于空白組和結(jié)合雌激素片組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),體質(zhì)量增長稍慢,于孕6天起顯著低于空白組和結(jié)合雌激素片組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),子鼠體膚紅潤有光澤,生長快,發(fā)育正常。7對雌鼠生殖功能情況的影響:本試驗(yàn)除模型組大鼠未受孕外,其余各組大鼠均為受孕鼠。與空白組和結(jié)合雌激素片組比較,坤泰膠囊低劑量組大鼠產(chǎn)仔總數(shù)、受孕率、妊娠率均較低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與模型組比較,除坤泰膠囊低劑量組大鼠外,其余各組大鼠的產(chǎn)仔總數(shù)均較多,受孕率及妊娠率均較高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論1用雷公藤多苷片(75mg/kg,14天)灌胃雌性大鼠,能使大鼠出現(xiàn)異常的行為學(xué)改變,動情周期延長或紊亂,血清性激素水平嚴(yán)重紊亂,卵巢組織形態(tài)學(xué)異常,提示卵巢早衰大鼠造模成功。實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)雷公藤多苷片可抑制雌性大鼠的卵巢功能和生殖功能,使大鼠卵巢功能和生殖功能均受到不同程度損傷。2坤泰膠囊可修復(fù)育齡期大鼠卵巢功能病理性損傷,保護(hù)和改善卵巢功能,機(jī)制可能與坤泰膠囊調(diào)節(jié)大鼠血清性激素水平,對激素水平有雙向調(diào)節(jié)作用,下調(diào)FSH、LH水平,上調(diào)E_2、AMH水平,使Fas蛋白及基因表達(dá)升高,FasL蛋白及基因表達(dá)降低有關(guān)。此外坤泰膠囊亦可改善大鼠的生殖功能,提高卵巢早衰大鼠的受孕率及妊娠率,對子代小鼠無明顯致畸性。3坤泰膠囊高、中劑量組與結(jié)合雌激素片組治療效果相似,具有等效性,坤泰膠囊低劑量組治療效果欠佳,可能與低劑量組坤泰膠囊用藥劑量少,濃度低有關(guān)。圖28幅;表10個;參84篇。
【圖文】：

動情后期 動情間期圖 1 大鼠動情周期陰道涂片 HE 染色（HE 染色×100）Fig.1 HE staining in the vaginal smear of female rats（HE staining×100）表 3 所示，空白組大鼠在整個實(shí)驗(yàn)過程中均可出現(xiàn)規(guī)律的動情周期，；模型組大鼠的動情周期延長，為 6~8 天，所有大鼠動情周期均出現(xiàn)紊組大鼠動情周期稍有延長，坤泰膠囊低劑量組的大鼠動情周期為 6~7囊中劑量組的大鼠動情周期為 5~7 天；坤泰膠囊高劑量組大鼠動情周；結(jié)合雌激素片組大鼠動情周期為 4~5 天�？瞻捉M相比，模型組和坤泰膠囊低劑量組大鼠動情周期出現(xiàn)延長或紊亂別為 100%和 85.71%，動情周期差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；泰膠囊高、中劑量組和結(jié)合雌激素片組大鼠的紊亂率分別為 28.5和 14.29%，與空白組相比，動情周期差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；結(jié)合雌激素片組相比，模型組和坤泰膠囊低劑量組大鼠動情周期差異均意義(P<0.05)，坤泰膠囊高、中劑量組大鼠動情周期差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)

體積較小并稍有萎縮，卵泡結(jié)構(gòu)欠清晰；坤泰膠囊高、中劑量組和結(jié)合雌激素片組大鼠卵泡發(fā)育、卵泡結(jié)構(gòu)等無顯著性差異；與模型組相比，其余各組大鼠可見卵泡發(fā)育較好，卵泡數(shù)量較多，體積稍大，卵泡結(jié)構(gòu)較清晰，閉鎖卵泡數(shù)量較少；與結(jié)合雌激素片組相比，，坤泰膠囊低劑量組大鼠卵泡發(fā)育欠佳，卵泡結(jié)構(gòu)欠清晰；坤泰膠囊高、中劑量組大鼠卵巢發(fā)育、卵泡結(jié)構(gòu)等未見明顯差異�？瞻捉M 模型組 坤泰膠囊高劑量組坤泰膠囊中劑量組 坤泰膠囊低劑量組 結(jié)合雌激素片組
【學(xué)位授予單位】：華北理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R285.5

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2660495