【摘要】：目的:(1)以葛根炭為前驅(qū)體,制備出安全、綠色、經(jīng)濟的葛根炭納米粒子。(2)研究葛根炭納米粒子對黃芩苷溶解度和體內(nèi)藥動學的影響。(3)通過藥效學實驗研究葛根炭納米粒子對黃芩苷抗炎、鎮(zhèn)痛作用的影響。(4)初步探究葛根炭納米粒子提高黃芩苷溶解度的機制。方法:(1)通過馬弗爐高溫悶煅法制備出葛根炭,并提取分離純化出葛根炭納米粒子。利用HPLC比較葛根溶液和純化后的葛根炭溶液兩者之間的成分差異,再運用透射電鏡、紫外光譜、熒光光譜、X-射線衍射、X-射線光電子能譜、紅外光譜、能量色散X射線光譜對葛根炭透析液進行形態(tài)結(jié)構(gòu)、光學特征、分子結(jié)構(gòu)以及表面元素組成等進行表征鑒定。(2)通過CCK-8法,檢測不同濃度的葛根炭納米粒子對RAW264.7細胞活性的影響。(3)葛根炭納米粒子溶液中加入黃芩苷,混勻,離心,取上清液,再利用HPLC方法檢測上清液中黃芩苷含量,并采用透射電鏡、紅外光譜、差示掃描量熱、X-射線衍射和紫外光譜等方法對其進行表征鑒定;同時采用HPLC方法研究溫度和pH值葛根炭納米粒子和黃芩苷復(fù)合物的影響。(4)采用間接酶聯(lián)免疫分析法檢測葛根炭納米粒子對黃芩苷在體內(nèi)藥代動力學的影響(5)利用二甲苯致小鼠耳腫脹和醋酸致小鼠扭體兩種模型,研究葛根炭納米粒子對黃芩苷抗炎鎮(zhèn)痛作用的影響。(6)通過HPLC法分別測定溶解在葛根炭納米粒子溶液中漢黃芩苷、野黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素和野黃芩素的含量;再采用透射電鏡、紅外光譜、差示掃描量熱、X-射線衍射和紫外光譜分析方法對漢黃芩苷和野黃芩苷分別和葛根炭納米粒子形成的復(fù)合物進行表征鑒定,考察葛根炭納米粒子對不同黃酮類化合物溶解度的影響。結(jié)果:(1)HPLC分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)葛根中的小分子成分并沒有在純化的葛根炭溶液液中檢測到,說明小分子化合物已經(jīng)去除干凈;從表征結(jié)果得知,從葛根炭水提液中純化出了粒徑平均直徑為3.95±1.29nm、晶格間距為0.263nm、量子產(chǎn)率為7.0%的與碳點類似的一種新型納米顆粒,將其命名為“葛根炭納米粒子”。這種成分是近似球形,均勻分散且無定形的;主要由碳和氧元素組成且表面具有豐富的活性功能基團;在最大激發(fā)波長380nm處得到的最大發(fā)射波長為475nm的納米顆粒。(2)CCK-8法測定葛根炭納米粒子的安全劑量約265.00μg/mL。(3)黃芩苷在葛根炭納米粒子溶液中,其濃度隨著葛根炭納米粒子濃度的增加而增加。表征結(jié)果發(fā)現(xiàn)納米粒子與黃芩苷相互作用,形成復(fù)合物。此外,溫度和pH值可以影響納米粒子對黃芩苷溶解度的作用強弱。(4)建立icELISA方法測定小鼠血液中的黃芩苷含量,結(jié)果顯示黃芩苷-葛根炭納米粒子組的最大血藥濃度(C_(max))是黃芩苷組的2倍,前者的藥時曲線面積(AUC_(0-t))是后者的1.7倍。兩組的平均滯留時間(MRT)相比較,黃芩苷+葛根炭納米粒子組比黃芩苷組大。葛根炭納米粒子不僅可以增加黃芩苷在體內(nèi)的吸收率,也可以提高其在小鼠體內(nèi)的生物利用度。(5)抗炎鎮(zhèn)痛作用結(jié)果顯示,與黃芩苷組相比,黃芩苷+葛根炭納米粒子組具有顯著性抗炎鎮(zhèn)痛作用(P0.01),可以顯著降低小鼠耳腫脹度,減少小鼠扭體次數(shù)。與模型組相比較,葛根炭納米粒子存在抗炎鎮(zhèn)痛作用(P0.05)。葛根炭納米粒子可以顯著提高黃芩苷的抗炎、鎮(zhèn)痛作用。(6)葛根炭納米粒子葛根炭納米類粒子可以顯著的增加黃酮苷類化合物黃芩苷、漢黃芩苷和野黃芩苷的溶解度,尤其是黃芩苷。但是,對黃酮苷元類化合物黃芩素、漢黃芩素和野黃芩苷溶解度的作用較差。葛根炭納米粒子葛根炭納米類粒子增加黃芩苷溶解度的機制,主要與黃芩苷上的葡萄糖醛酸結(jié)構(gòu)有關(guān),兩者之間可以通過分子非共價相互作用連接,形成復(fù)合物,氫鍵是兩者發(fā)生作用的主要作用力,從而改善藥物的溶解性。結(jié)論:黃芩苷在水中極差的溶解性,導致其藥物開發(fā)和臨床應(yīng)用受到諸多限制。本實驗采用一種新型的納米材料以及簡單而有效的方法來增加黃芩苷的溶解度。通過高溫悶煅法制備出綠色、經(jīng)濟的葛根炭納米粒子,其低毒性,生物安全性高。利用體內(nèi)體外實驗證明,葛根炭納米粒子可以顯著增加黃芩苷溶解度和生物利用度,且還可以提高其抗炎鎮(zhèn)痛作用。在此基礎(chǔ)上,通過研究葛根炭對其他黃酮苷及苷元類化合物的溶解度的作用,初步的探討了其增加黃芩苷溶解的機制主要是通過氫鍵作用,這就為黃芩苷的進一步開發(fā)提供了依據(jù)。
【圖文】：

當RPC-NPs溶液濃度為530.00μg/mL、265.00μg/mL、132.50μg/mL時,黃芩素的濃度分別為27.6±0.79、26.1±0.09、20.80±0.41(μg/mL)。如圖24B,24A所示,漢黃芩素和野黃芩素在RPC-NPs溶液中幾乎不溶。從圖24可以看出,苷類化合物BA、漢黃芩苷和野黃芩苷的溶解度隨著在RPC-NPs濃度的增加而增加,尤其是黃芩苷。然而,苷元類化合物黃芩素、漢黃芩素和野黃芩素在RPC-NPs溶液中的溶解度較差。圖2 3 野黃芩苷色譜圖

圖2 2 漢黃芩苷色譜圖圖2 4 六種不同化合物在RPC-NPs溶液中的濃度分布:(A)黃芩苷和黃芩素;(B)漢黃芩苷和漢黃芩素;(C)野黃芩苷和野黃芩素
【學位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R284

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6 馬玉芳;劉蕊;俞道進;李健;黃一帆;;葛根超微粉中葛根素在家兔體內(nèi)的動力學研究[A];2010年福建省畜牧獸醫(yī)學術(shù)年會論文集[C];2010年

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本文編號：2653197