【摘要】：目的:探討山楂葉總黃酮對(duì)高脂血癥大鼠血脂代謝以及油酸誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞脂質(zhì)蓄積的影響。方法:1、取48只SD雄性大鼠,隨機(jī)分為6組,每組8只,依次為空白組、模型組、陽(yáng)性對(duì)照組(辛伐他汀對(duì)照組)、山楂葉總黃酮低、中、高劑量組�？瞻捉M給予基礎(chǔ)飼料,其余各組均給予高脂飼料喂養(yǎng)8周建立高脂血癥大鼠模型。造模同時(shí)給予藥物干預(yù),陽(yáng)性對(duì)照組以辛伐他汀灌胃給藥,劑量為4 mg/kg,山楂葉總黃酮低、中、高劑量組以山楂葉總黃酮灌胃給藥,劑量分別為100 mg/kg、200mg/kg、400 mg/kg,空白組和模型組以等量生理鹽水灌胃,每天1次,連續(xù)給藥8周,每周稱取大鼠體重。給藥8周后,腹主動(dòng)脈取血,采用ELISA試劑盒檢測(cè)血漿中TG、TC、HDL-C、LDL-C的含量;分離肝臟組織,稱量肝臟濕質(zhì)量,計(jì)算肝臟指數(shù);HE染色觀察肝臟組織病理學(xué)變化,油紅O染色觀察肝臟組織脂質(zhì)聚集情況;Western blot法檢測(cè)肝臟組織相關(guān)蛋白表達(dá)情況。2、以油酸誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞株HepG2細(xì)胞24 h建立細(xì)胞脂肪變性模型,觀察不同濃度的山楂葉總黃酮對(duì)油酸誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積的影響,實(shí)驗(yàn)分為空白組、模型組、山楂葉總黃酮低(25 mg/L)、中(50 mg/L)、高(100 mg/L)劑量組。藥物作用24 h后,ELISA試劑盒測(cè)定細(xì)胞內(nèi)甘油三酯(TG)含量,油紅O染色觀察細(xì)胞內(nèi)脂滴沉積情況,Western blot法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)相關(guān)蛋白表達(dá)情況。結(jié)果:1、所有的大鼠體重均有增長(zhǎng),模型組大鼠體重增長(zhǎng)幅度最大,給藥組體重增長(zhǎng)幅度較模型組緩慢,但均比空白組增長(zhǎng)幅度大。2、與空白組比較,模型組大鼠肝臟指數(shù)、血漿中TG、TC、LDL-C含量明顯升高(p0.01),肝細(xì)胞脂滴增加,脂質(zhì)沉積明顯,肝臟脂肪變性程度較為嚴(yán)重,肝臟組織LKB1、p-LKB1、AMPK、p-AMPK表達(dá)減少(p0.05或p0.01),ACC、p-ACC、HMGCR表達(dá)增加(p0.05或p0.01),結(jié)果提示成功建立高脂血癥大鼠模型。3、與模型組比較,辛伐他汀對(duì)照組和HLF給藥各組大鼠肝臟指數(shù)、血漿中TG、TC及LDL-C含量降低(p0.05或p0.01),肝細(xì)胞脂滴減少,肝細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積和肝臟脂肪變性程度明顯減輕,給藥各組LKB1、AMPK、ACC蛋白表達(dá)無(wú)明顯差異,p-ACC、HMGCR蛋白表達(dá)明顯降低(p0.05或p0.01),p-LKB1、p-AMPK蛋白表達(dá)明顯升高(p0.05或p0.01)。4、與空白組比較,模型組細(xì)胞內(nèi)可見(jiàn)大量紅色脂滴,細(xì)胞內(nèi)的TG含量顯著增加(p0.01),AMPK、p-AMPK、LKB1、p-LKB1蛋白表達(dá)顯著性下調(diào)(p0.01),ACC、p-ACC、HMGCR蛋白表達(dá)顯著性上調(diào)(p0.01),提示HepG2細(xì)胞脂肪變性模型建立成功。5、與模型組比較,山楂葉總黃酮各組細(xì)胞內(nèi)紅色脂滴明顯減少,HLF給藥各組均可以降低HepG2細(xì)胞內(nèi)TG含量,并呈現(xiàn)一定的濃度依賴性,其中HLF中、高劑量組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05或p0.01),HLF給藥各組細(xì)胞AMPK、ACC、LKB1蛋白表達(dá)無(wú)顯著性差異;p-AMPK蛋白表達(dá)顯著性上調(diào)(p0.05或p0.01),p-ACC蛋白表達(dá)均顯著性下調(diào)(p0.05或p0.01),HLF中、高劑量組p-LKB1蛋白表達(dá)顯著性上調(diào)(p0.01),HLF高劑量組HMGCR蛋白表達(dá)顯著性下調(diào)(p0.05)。結(jié)論:山楂葉總黃酮可降低高脂飼料引起的高脂血癥大鼠血脂代謝,也可影響油酸誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞脂質(zhì)蓄積,其機(jī)制可能與誘導(dǎo)體內(nèi)p-LKB1、p-AMPK和抑制p-ACC、HMGCR的蛋白表達(dá)有關(guān)。
【圖文】：

20圖 1 HLF 對(duì)各組大鼠體重的影響Fig. 1 Effects of HLF on body weight of rats in each group圖 1 結(jié)果顯示，所有的大鼠體重均有所增加，對(duì)灌胃給藥方式有較好的耐受性。正常組增長(zhǎng)幅度最小，模型組隨時(shí)間推移體重增長(zhǎng)幅度最大，，與模型組相比，給藥組體重增長(zhǎng)幅度較緩。2 山楂葉總黃酮對(duì)高脂血癥大鼠血漿血脂的影響表 4 HLF 對(duì)高脂血癥大鼠血漿血脂的影響（ ±S，n=8，mmol/gprot）Tab.4 Effects of HLF on Plasma Lipid in Hyperlipidemia Rats（ ±S，n=8，mmol/gprot）組別 劑量/mg kg-1TG TC HDL-C LDL

湖北科技學(xué)院碩士學(xué)位論文0.01)，說(shuō)明高脂血癥大鼠模型建立成功，HDL-C 含量低于空白組，但差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與模型組比較，第 8 周 HLF 低劑量組和辛伐他汀對(duì)照組均可顯著降低大鼠血漿中 TG、TC 以及 LDL-C 含量，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p < 0.05)，HLF中、高劑量組可極顯著降低大鼠血漿中 TG、TC 以及 LDL-C 含量，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p < 0.01)。3 山楂葉總黃酮對(duì)高脂血癥大鼠肝臟外觀形態(tài)學(xué)的影響
【學(xué)位授予單位】：湖北科技學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R285.5

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本文編號(hào)：2652893