【摘要】：目的:研究石菖蒲-益智仁精油的提取方法,省睡方水提液和精油的抗AD活性及機(jī)制。方法:(1)采用水蒸氣蒸餾提取法和超臨界CO_2萃取法進(jìn)行石菖蒲-益智仁精油的提取,用GC-MS法對(duì)提取的精油進(jìn)行成分分析,并運(yùn)用基于計(jì)算機(jī)系統(tǒng)的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法,構(gòu)建精油成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)、成分-靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)及蛋白作用通路網(wǎng)絡(luò)圖,對(duì)不同提取方法所得精油關(guān)鍵成分活性進(jìn)行預(yù)測(cè)比較,指導(dǎo)精油提取方法的選擇。(2)采用Aβ_(1-42)復(fù)制的AD小鼠模型及APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因AD小鼠模型,以行為學(xué)、組織形態(tài)學(xué)、相關(guān)遞質(zhì)含量水平的改變,對(duì)省睡方水提液灌胃及精油吸嗅抗AD活性進(jìn)行研究。(3)采用免疫組化法,分析省睡方水提液及精油干預(yù)后小鼠腦內(nèi)能量相關(guān)生化指標(biāo)的變化,選取葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體1(GLUT-1)及胰島素通路關(guān)鍵分子1(IRS-1)為指標(biāo),觀察省睡方防治AD的可能機(jī)制。結(jié)果:(1)通過(guò)GC-MS對(duì)兩種不同提取方法所得精油進(jìn)行分析,水蒸氣蒸餾法共鑒定出揮發(fā)性成分35種,以醚類(54.70%)、烯類(25.82%)、酮類(2.88%)、醇類(1.68%)為主,超臨界CO_2萃取法共鑒定出49種,以醚類(37.97%)、烯類(20.26%)、酮類(16.81%)、烷類(7.40%)、醇類(0.92%)為主。(2)通過(guò)C-T-D網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建,依據(jù)degree(度值)分析發(fā)現(xiàn),水蒸氣蒸餾提取中度值在8以上的成分有14種,主要為醚、醇、烯類化合物(合計(jì)相對(duì)百分含量64.12%);超臨界萃取中度值8以上的成分有10種,主要為醚、醇、烯類化合物(合計(jì)相對(duì)百分含量45.35%),而超臨界中占比較大的烷類(7.40%)、酮類(16.81%)化合物僅發(fā)現(xiàn)茉莉酮(0.22%)具有抗AD的靶點(diǎn)。提示在抗AD活性預(yù)測(cè)中,醚、醇、烯類化合物起著重要的作用,且水蒸氣蒸餾法相關(guān)成分的含量多于超臨界,超臨界提取雖能提取出更多種類的化合物,但與抗AD活性不呈正相關(guān)。(3)藥效驗(yàn)證中,與正常組比較,模型組跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)潛伏期顯著收縮,錯(cuò)誤次數(shù)顯著增長(zhǎng)(P0.01),Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)定位航行逃避潛伏期明顯延長(zhǎng)(P0.05,P0.01),海馬CA1區(qū)神經(jīng)元出現(xiàn)缺失,DG區(qū)出現(xiàn)明顯的老年斑沉積(P0.05),ACH含量均顯著下降,GABA,GLU水平均顯著升高(P0.01);與模型組比較,各給藥組均可顯著延長(zhǎng)小鼠跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)潛伏期、減少跳臺(tái)錯(cuò)誤次數(shù)(P0.01),明顯降低定位航行小鼠逃避潛伏期(P0.01,P0.05),可以一定程度保護(hù)小鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元,減少DG區(qū)老年斑沉積(P0.05,P0.01),明顯增加小鼠腦組織中ACH表達(dá)(P0.05,P0.01),減少GABA,GLU水平(P0.01)。(4)免疫組化實(shí)驗(yàn)中,與正常組比較,模型組GLUT1含量均顯著下降(P0.01),IRS-1的表達(dá)均顯著升高(P0.01);與模型組比較,各給藥組明顯增加小鼠腦組織中GLUT1表達(dá)(P0.05,P0.01),減少I(mǎi)RS-1的表達(dá)(P0.01)。結(jié)論:水蒸氣蒸餾法、超臨界CO_2萃取法所獲得的石菖蒲-益智仁精油均具有豐富的活性成分,均具有潛在的防治AD的活性,通過(guò)吸嗅給藥能在動(dòng)物模型中得到相應(yīng)的驗(yàn)證,調(diào)控神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)、淀粉樣蛋白水平及能量代謝是石菖蒲-益智仁精油防治AD的機(jī)制之一。
【圖文】：

1) 表示劑量單位 μg·mL-1 AD 小鼠海馬 CA1 區(qū)神經(jīng)元的影響從尼氏染色結(jié)果看，正常對(duì)照組小鼠海馬 CA1 區(qū)神經(jīng)元排列有序，無(wú)明顯核固縮術(shù)組小鼠海馬 CA1 區(qū)神經(jīng)元排列有序，無(wú)核固縮。模型組小鼠海馬 CA1 區(qū)神經(jīng)組排列混亂，并具有神經(jīng)元缺失、核固縮現(xiàn)象。各給藥組小鼠海馬 CA1 區(qū)神經(jīng)元組排列有序，無(wú)明顯神經(jīng)元缺失，但也存在疏松、核固縮。見(jiàn)圖 1。模型組 - 20.88±4.20精油低劑量組 12.131)22.91±4.99精油高劑量組 48.501)22.44±3.58原方對(duì)照組 0.46 21.93±3.16

E圖 2 對(duì)小鼠海馬 CA1 區(qū)神經(jīng)元的影響(尼氏染色，×400)常組；B. 模型組；C. 精油低劑量組(12.13 μg·mL-1)；D. 精油高劑量組(48.50 μg·mL-1)；E. 原照組(0.46 g·kg-1)；n=3/組（圖 2 同）1 Effects on morphology in hippocampal CA1 region in AD mice（Nissl’s staining, × AD 小鼠海馬 DG區(qū)老年斑的影響硫磺素染色結(jié)果顯示，與正常組小鼠海馬比較，模型組海馬 DG 區(qū)的老年斑沉積升高（P<0.01）。與模型組比較，各給藥組小鼠海馬 DG 區(qū)老年斑沉積水平明顯<0.05，P<0.01）。見(jiàn)圖 2，表 4。A B C D
【學(xué)位授予單位】：江西中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：TQ461;R285.5

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 易美華,肖紅,梁振益;益智仁、葉、莖揮發(fā)油化學(xué)成分的對(duì)比研究[J];中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué);2004年03期

2 蔣家華;黃風(fēng)和;李月華;;益智仁氯仿抽提物對(duì)兔主動(dòng)脈螺旋條收縮反應(yīng)的影響[J];廣東醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報(bào);1989年02期

3 黃鳳和;林明世;鐘然;吳偉平;馮冰虹;李月華;;益智仁藥理作用的初步研究[J];廣東醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報(bào);1989年02期

4 趙士凱，，黃有云;益智仁的傳統(tǒng)炮制及其工藝選擇[J];中成藥;1994年03期

5 德晟;;暖腎固精益智仁[J];開(kāi)卷有益-求醫(yī)問(wèn)藥;2018年11期

6 ;益智仁栽培技術(shù)[J];農(nóng)村實(shí)用技術(shù);2008年10期

7 姬霞;砂仁與益智仁的鑒別[J];陜西中醫(yī);2002年04期

8 田紀(jì)祥;鐘俊武;;益智仁對(duì)小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用的研究[J];世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘;2018年90期

9 王魯;梁支明;舒暢;代方貴;;益智仁提取液抗應(yīng)激作用試驗(yàn)[J];中國(guó)獸醫(yī)雜志;2009年05期

10 李貞漢，蔡月英;益智仁炮制新法[J];福建中醫(yī)藥;1995年04期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 張俊清;王勇;陳峰;李海龍;譚銀豐;李永輝;;益智的化學(xué)成分與藥理作用研究進(jìn)展[A];海峽兩岸暨CSNR全國(guó)第十屆中藥及天然藥物資源學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2012年

2 李文兵;胡昌江;黃勤挽;謝秀瓊;;鹽炙益智仁中5-羥甲基糠醛的分離鑒定[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)中藥炮制分會(huì)2009年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2009年

3 胡昌江;黃勤挽;李興華;謝秀瓊;余凌英;;益智仁鹽炙對(duì)豚鼠離體膀胱平滑肌活動(dòng)影響的研究[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)中藥炮制分會(huì)2008年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

4 金傳山;吳德玲;周燕;;益智不同藥用部位間成分的比較研究[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)第六屆中藥炮制學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

5 胡昌江;帥小翠;王虎;徐志毅;王智鵬;張然;;益智仁鹽炙前后對(duì)縮泉丸縮尿作用的研究[A];2010全國(guó)知名中醫(yī)院院長(zhǎng)暨道家文化與中醫(yī)藥養(yǎng)生論壇論文集[C];2010年

6 華俏麗;鄒川;吳禹池;許苑;劉旭生;;黃春林教授談尿失禁的中醫(yī)治療對(duì)策[A];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)腎臟疾病專業(yè)委員會(huì)2018年學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要匯編[C];2018年

7 胡昌江;帥小翠;王虎;徐志毅;王智鵬;張然;;益智仁鹽炙前后對(duì)縮泉丸縮尿作用的研究[A];2010中藥炮制技術(shù)、學(xué)術(shù)交流暨產(chǎn)業(yè)發(fā)展高峰論壇論文集[C];2010年

8 李文兵;胡昌江;吳珊珊;高源;龍?zhí)m艷;;益智仁鹽炙溫腎縮尿作用初步研究[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)中藥炮制分會(huì)2011年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2011年

9 董友軍;;機(jī)械搗藥效果好[A];2004年全國(guó)中藥研究暨中藥房管理學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2004年

10 嵇志紅;于新宇;;益智仁水提取物對(duì)腦缺血大鼠記憶障礙的改善作用[A];“基因、進(jìn)化與生理功能多樣性”海內(nèi)外學(xué)術(shù)研討會(huì)暨中國(guó)生理學(xué)會(huì)第七屆比較生理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2009年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 查渠;前列腺炎常用的中藥方[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2017年

2 石橋;藥材需求 左右價(jià)格[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2001年

3 尚學(xué)瑞;鼻嗅識(shí)中藥[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2003年

4 陸善旦;益智仁價(jià)格堅(jiān)挺原因分析[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2000年

5 丁鄉(xiāng);四種中藥材貨少價(jià)揚(yáng)[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2000年

6 雪立;大黃價(jià)堅(jiān)走暢 枸杞命運(yùn)難改[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2001年

7 農(nóng)訓(xùn)學(xué);益智仁銷勢(shì)旺盛[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2001年

8 羅賢圣;亳州藥市 大茴 桔梗 佛手 益智仁價(jià)格反彈[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2001年

9 尚學(xué)瑞;鼻嗅識(shí)藥--淺談中藥材的鑒別[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2003年

10 宋盼來(lái);益智仁價(jià)格在振蕩中前行[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2007年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前2條

1 關(guān)水;益智仁中原兒茶酸對(duì)PC12細(xì)胞保護(hù)作用研究[D];大連理工大學(xué);2006年

2 黃勤挽;益智仁鹽炙“縮尿”作用的研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2008年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 倪雅麗;基于腸道菌群與代謝組學(xué)分析益智仁治療糖尿病腎病的作用機(jī)制[D];海南醫(yī)學(xué)院;2019年

2 羅俊;石菖蒲—益智仁精油提取工藝及精油吸嗅給藥對(duì)AD的作用研究[D];江西中醫(yī)藥大學(xué);2019年

3 牛晴;藥食同源植物益智Alpinia oxyphylla Miq.不同部位綜合利用價(jià)值研究[D];海南大學(xué);2019年

4 王亞玲;益智仁乙酸乙酯部位化學(xué)成分及生物活性的研究[D];鄭州大學(xué);2019年

5 馮惠敏;益智仁改善記憶和縮尿功效的活性成分研究[D];江南大學(xué);2019年

6 龔曉猛;益智仁鹽炙后石油醚部位藥效成分分離與藥效驗(yàn)證[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2017年

7 景昊;中醫(yī)學(xué)對(duì)健忘的認(rèn)識(shí)及田七、天麻、益智仁藥組對(duì)小鼠記憶力減退干預(yù)作用研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2014年

8 趙騫;益智仁健腦的神經(jīng)保護(hù)作用藥效物質(zhì)篩選[D];西南交通大學(xué);2017年

9 李倩;中藥益智仁的化學(xué)成分研究[D];云南中醫(yī)學(xué)院;2014年

10 王治元;干姜和益智仁化學(xué)成分研究[D];安徽大學(xué);2010年

本文編號(hào)：2650398