【摘要】：重樓屬(Paris)植物是一種多年生草本植物,現(xiàn)有一部分專家認(rèn)為該屬植物屬于延齡草科(Trilliaceae),但多數(shù)人認(rèn)為應(yīng)歸為百合科(Liliaceae)。重樓屬植物共有26種14余變種和若干變型,我國約有20種10余變種,主要分布于歐洲和亞洲,在我國西南地區(qū)含有豐富的野生資源。現(xiàn)已有研究表明重樓屬植物具有較高的藥用價值如抗腫瘤、抗菌、止血等。本課題選取南重樓(Paris vietnamensis)與毛重樓(Paris mairei)為研究對象,對兩種植物的成分進(jìn)行系統(tǒng)研究。通過正相硅膠層析柱、Sephadex LH-20分子篩凝膠柱、ODS反相柱層析及半制備HPLC等方法分離純化,借助現(xiàn)代波譜分析技術(shù)對分離得到的天然產(chǎn)物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定,最終得到61個化合物,包括17個新化合物,且有4個苷元結(jié)構(gòu)是首次發(fā)現(xiàn)。選取三個神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系(U251,U87MG和SHG44),采用MTT對分離得到的化合物進(jìn)行初步生物活性篩選。研究成果展示如下:1.南重樓的化學(xué)成分研究:對2 kg南重樓根莖依次用70%乙醇提取、水飽和正丁醇萃取后分離純化并鑒定34個單體化合物,其中有9個新化合物�；衔锝Y(jié)構(gòu)依次為:benzyl alcohol glucoside(N-1),(2S)-3-O-Octadeca-9Z,12Z,15Z-trienoylglyceryl-O-β-D-galactopyranoside(N-2),(2β,3β,5β,22R)-2,3,5,14,20,22,25-hephydroxycholest-7-en-6-one(N-3),(2β,3β,5β,22R)-2,3,14,20,22,25-hexahydroxycholest-7-en-6-one(N-4),threo-guaiacylglycerol 3-O-[6-O-(E)-p-coumaroyl]-β-D-glucopyranoside(N-5),7,11-dimethyl-3-methylene-1,6-dodecadien[α-L-rhamnopyranosyl-(1→3)]-β-D-glucopyranoside(N-26),25(R)-spirost-6-one-7-en-yl-(1→4)-[α-L-rhamnopyranosyl-(1→3)]-a-L-arabinopyranoside(N-34)。其中包括6個非甾體類化合物,2個甾酮類化合物,26個甾體皂苷類化合物�；衔颪-9,N-10,N-18,N-27~N-29,N-32~N-34為新化合物,且化合物N-10,N-27,N-29的苷元是首次發(fā)現(xiàn),化合物N-6,N-24,N-26,N-30,N-31均是首次從重樓屬植物中分離得到。2.毛重樓的化學(xué)成分研究:對1 kg南重樓根莖依次用70%乙醇提取、水飽和正丁醇萃取后分離純化并鑒定27個單體化合物,其中有8個新化合物�；衔锝Y(jié)構(gòu)依次為:25(R)-spirost-5-en-1β,3β--25(R)-spirost-5,13-diene-1β,3β,21,23α,24β-pentol-1-O-β-D-apiofuranosyl-(1→3)-α-L-rh amnopyranosyl-(1→2)-[β-D-xylopyranosyl-(1→3)]-a-L-arabinopyranoside(M-5),15-oxo-18-nor-25(R)-spirost-5,13-diene-24-acetyl-1β,3β,23β,24β-tetrol-1-O-β-D-apiofuranos yl-(1→3)-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-[β-D-xylopyranosyl-(1→3)]-a-L-arabinopyranosi mnopyranosyl-(1→4)-β-D-glucopyranosyl]-oleanolate(M-17),3β-O-[α-L-rhamnopyran osyl-(1→4)-α-L-arabinopyranosyl-(1→2)-β-D-xylopyranosyl]-28-O-[β-D-glucopyranosyl]-oleanolate(M-18),3β-[(O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranosyl)oxy]-xylopyranosyl-(1→3)]-a-L-arabinopyranoside(M-27)。其中包括14個螺甾烷型皂苷類化合物(其中M-23~M-27分別與南重樓中化合物N-10,14,15,23,31結(jié)構(gòu)相同),7個呋甾烷型皂苷類化合物,6個五環(huán)三萜皂苷類化合物。經(jīng)Scifinder數(shù)據(jù)檢索,化合物M-2,M-4,M-6,M-9,M-10,M-15,M-17,M-18為新化合物,化合物M-10的苷元是首次發(fā)現(xiàn)�；衔颩-1,M-7,M-8,M-14均是首次從重樓屬植物中分離得到。3.抗腫瘤活性測試選取三種神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞株U87MG、U251MG和SHG44對分離得到的48個皂苷類化合物進(jìn)行細(xì)胞毒性實驗,篩選出一批有活性的化合物,其中化合物N-14,15,16,17,22,24~26,M-1對神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞具有顯著活性,并對其構(gòu)效關(guān)系進(jìn)行了初步討論。課題創(chuàng)新性及研究意義:1.對重樓屬兩種植物南重樓和毛重樓的化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)研究,共分離鑒定61個化合物,其中包括47個甾體皂苷成分,6個五環(huán)三萜類成分和8個非甾類化合物;2.發(fā)現(xiàn)了17個新化合物,其中有4個化合物的苷元是首次發(fā)現(xiàn),9個化合物首次從重樓屬中分離;3.通過體外抗神經(jīng)膠質(zhì)瘤活性篩選,在多樣化結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上總結(jié)出有意義的重樓甾體皂苷結(jié)構(gòu)與效應(yīng)的規(guī)律,為甾體皂苷的抗膠質(zhì)瘤研究及結(jié)構(gòu)修飾優(yōu)化提供理論依據(jù),為解決重樓甾體皂苷的應(yīng)用前途提供借鑒;4.本課題為尋找替代重樓屬植物基源植物的化學(xué)成分提供了資源,為發(fā)掘作用確切的新型膠質(zhì)瘤化療先導(dǎo)化合物提供依據(jù),形成自主知識產(chǎn)權(quán),具有潛在的社會效益和經(jīng)濟(jì)效益;
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R284.1
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本文編號：2649729