【摘要】：目的:在前期臨床工作的研究上,遵照中藥6類新藥和《中藥、天然藥物技術(shù)研究指導(dǎo)原則》有關(guān)技術(shù)要求,開展三黃益腎顆粒的制備工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及初步穩(wěn)定性,并進(jìn)行制劑的初步藥效學(xué)研究,為最終開發(fā)成安全有效、服用攜帶方便的一種治療慢性腎臟病的中藥新制劑奠定基礎(chǔ)。方法:1.制備工藝研究(1)工藝路線篩選:采用慢性腎衰竭(CFR)大鼠模型,結(jié)合文獻(xiàn)研究的結(jié)果,篩選三黃益腎顆粒提取物的制備工藝路線。(2)提取工藝研究:采用單因素比較法,以揮發(fā)油得率為指標(biāo),優(yōu)化肉桂揮發(fā)油提取工藝;單因素比較結(jié)合正交試驗(yàn)法,以固形物得率、結(jié)合蒽醌、丹參酮ⅡA的提取率為考察指標(biāo),優(yōu)化大黃、丹參藥材的乙醇提取工藝;以固形物總質(zhì)量、黃芪甲苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷的提取率為考察指標(biāo),優(yōu)化大黃、丹參藥渣與黃芪等其余藥材的水提取工藝。(3)濃縮、干燥工藝研究:以結(jié)合蒽醌、丹參酮ⅡA的保留率為指標(biāo),優(yōu)選乙醇提取液的回收乙醇(濃縮)方法及其浸膏的真空干燥工藝;以黃芪甲苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷的保留率為指標(biāo),優(yōu)選水提取液的濃縮方法及其浸膏的噴霧干燥工藝。(4)制劑成型工藝研究:測(cè)定提取物的吸濕速率、臨界相對(duì)濕度和通過粉體學(xué)性質(zhì);以物料吸濕增重百分率、溶化率和成型率為指標(biāo),優(yōu)選填充劑種類;以顆粒得率為指標(biāo),優(yōu)選干式制粒工藝條件;以顆粒的臨界相對(duì)濕度為指標(biāo),確定制劑成型時(shí)的環(huán)境濕度要求;以顆粒吸濕增重百分率為指標(biāo),優(yōu)選直接接觸藥品的包裝材料的種類。(4)依據(jù)小試優(yōu)選的工藝參數(shù),開展三批中試驗(yàn)證試驗(yàn)。2.初步藥效學(xué)研究以CFR大鼠模型血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)值為評(píng)價(jià)指標(biāo),初步評(píng)價(jià)所研制劑有效性。3.質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究采用薄層鑒別法(TLC),建立制劑中黃芪、大黃、丹參、熟地黃等的鑒別方法;采用高效液相法(HPLC),建立制劑中黃芪甲苷和丹參酮ⅡA含量測(cè)定方法;依照《中國藥典》2015年版四部通則0104項(xiàng)下規(guī)定,建立制劑的性狀、水分、粒度、溶化性等標(biāo)準(zhǔn)。開展制劑的常溫穩(wěn)定性和加速穩(wěn)定性試驗(yàn),初步評(píng)價(jià)所研制劑在上市包裝條件下的穩(wěn)定性,初步確定其有效期。結(jié)果:1.制備工藝研究(1)優(yōu)選的制備工藝路線為:肉桂提取揮發(fā)油,大黃、丹參采用乙醇回流提取、濃縮、干燥制成提取物;肉桂、大黃、丹參藥渣與黃芪等其余藥材煎煮、濃縮、干燥制成提取物,合并提取物,加輔料制成顆粒劑。(2)肉桂提取揮發(fā)油的優(yōu)化工藝為:無需浸泡,藥材加8倍水,蒸餾提取6 h,其發(fā)油提取率為0.92%。(3)大黃、丹參優(yōu)選的提取工藝為:藥材回流提取2次,每次加8倍體積80%乙醇,回流提取2 h,其丹參酮ⅡA與結(jié)合蒽醌的提取率分別為47.65%和54.63%,醇溶性固形物得率為18.48%;優(yōu)選的濃縮方式為減壓濃縮(濃縮條件為:-0.08 Mpa;55～65℃),其丹參酮ⅡA和結(jié)合蒽醌的保留率分別為86.30%和84.30%;優(yōu)化的浸膏干燥方式為真空干燥(-0.08MPa,50～80℃),鋪盤厚度不大于0.7cm;其丹參酮ⅡA和結(jié)合蒽醌的保留率分別為72.08%和69.12%。(4)肉桂、大黃、丹參藥渣與黃芪等其余4味藥材優(yōu)選的水提取工藝為:煎煮2次,每次加10倍量水,煮沸提取2 h,其黃芪甲苷和毛蕊異黃酮葡萄糖苷的提取率分別為56.03%和68.18%,水溶性固形物得率為30.34%;優(yōu)化的濃縮方式為減壓濃縮(-0.08MPa,55～75℃),其黃芪甲苷和毛蕊異黃酮葡萄糖苷的保留率分別為85.92%和78.40%;優(yōu)化的浸膏干燥方式為噴霧干燥(進(jìn)風(fēng)溫度為175±5℃,出風(fēng)溫度為85±5℃,濃縮液的相對(duì)密度為1.06～1.10(60℃),其黃芪甲苷和毛蕊異黃酮葡萄糖苷保留率分別為83.91%和77.64%。(5)藥材提取物的吸濕率為22.61%,臨界相對(duì)濕度為58%,松密度為0.68 g·mL-1,振實(shí)密度為0.73 g·mL-1,成型工藝優(yōu)選的填充劑為麥芽糊精,采用干式制粒法,物料水分控制在3.0～5.0%之間,所得顆粒的休止角為36.2°,吸濕率為13.81%,臨界相對(duì)濕度為61%,松密度為0.78g·mL-1,振實(shí)密度為0.85 g·mL-1;選用PET/AL/PE結(jié)構(gòu)的純鋁藥用復(fù)合膜進(jìn)行封裝;經(jīng)三批中試驗(yàn)證試驗(yàn)證明,該制備工藝合理可行,黃芪甲苷的轉(zhuǎn)移率為66.12%～66.64%,丹參酮ⅡA轉(zhuǎn)移率為32.02%～32.23%。2.初步藥效學(xué)研究本工藝方法制備的三黃益腎顆粒對(duì)CFR大鼠模型的BUN值和Cr值有明顯的降低效果。2.質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及穩(wěn)定性研究3.所建立的制劑中丹參、黃芪、大黃、肉桂的TLC鑒別方法,經(jīng)方法學(xué)考察表明,其方法穩(wěn)定無干擾;所建立的制劑中黃芪甲苷與丹參酮ⅡA的含量測(cè)定方法,方法學(xué)考察表明,其方法穩(wěn)定無干擾,同時(shí)規(guī)定了產(chǎn)品含量的最低限量。依據(jù)制劑通則(《中國藥典》2015年版四部通則0104)項(xiàng)下的要求,進(jìn)行了制劑的性狀、裝量差異、粒度、溶化性、水分、微生學(xué)檢驗(yàn),均符合顆粒劑的相關(guān)要求。經(jīng)6個(gè)月常溫穩(wěn)定性試驗(yàn)和加速穩(wěn)定性試驗(yàn)考察結(jié)果顯示,本品在上市包裝條件下穩(wěn)定,其有效期初步確定為2年。結(jié)論:三黃益腎顆粒的制備工藝有效、合理、穩(wěn)定、質(zhì)量可控,能達(dá)到預(yù)期的研究目標(biāo),為進(jìn)一步開展臨床試驗(yàn)研究和大工業(yè)生產(chǎn)提供了有效的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
【圖文】：

邐三黃益腎顆粒的藥學(xué)研究邐逡逑工藝一組邐８．９１ｇ邐生藥／ｋｇ邐１４５．０１±２０．８０邐１１．４８士３．１０＃＃逡逑工藝二組邐８．９１ｇ邐生藥／ｋｇ邐９８．６３±４０．２１＃邐１２．３２±４．０３＃逡逑工藝三組邐８．９１ｇ邐生藥／ｋｇ邐１２７．７７±４２．５７邐１２．５２±２．１４＃逡逑注：與模型對(duì)照組比較r潰跡埃埃擔(dān)澹潰跡埃埃庇�；正常对照组比较＊＾［E埃埃擔(dān)校跡埃埃保垮義獻(xiàn)凵鮮笛榻峁�，确定工艺聫U呷縵攏跡玻保哄義，

本文編號(hào)：2649428