【摘要】：艾葉作為一種中草藥既有藥用也有食用價值,也是一種廣譜抗菌抗病毒的藥物,對很多病毒和細菌都有抑制和殺傷作用,對呼吸系統(tǒng)疾病有一定的防治作用。盡管艾草的價值已經被大家所熟知,也開發(fā)出了很多關于艾葉的產品,但是對于艾葉提取物是否能夠可以用來作為保健品和殺滅微生物中藥劑還沒有系統(tǒng)和相關的報道。為了詳細的研究艾葉提取物是否可以用于日常健康護理和腳氣治療,我們開展了本課題研究。首先,采集所要處理的微生物對象。攜帶密封好的培養(yǎng)細菌和真菌生長的固體培養(yǎng)基的平板到南陽市區(qū)不同的采集地點(南陽師范學院、南陽姜營機場、南陽體育場以及南陽市新華城市廣場),利用空氣沉降法收集空氣中所含的細菌和真菌,然后帶回實驗室培養(yǎng)和分離相關菌株。用滅菌雙蒸水浸泡法篩選腳氣相關細菌和真菌并進行分離培養(yǎng)。從大約60盤培養(yǎng)基上挑選出28株菌株進行微生物類別鑒定,得到的菌株包含細菌18株,真菌10株,通過對這些菌株的16S和ITS保守序列進行PCR擴增并測序,以及通過BLAST比對分析發(fā)現這28株菌株細菌包括桿菌、單胞菌等,其中桿菌占90%。而真菌則包含草酸青霉、棘孢曲霉、鏈格孢菌等,其中F-HZJ1、F-HZJ2和F-ZBJ2都為草酸青霉。根據各種菌株的特性和出現的頻度,從這些分子鑒定完成的菌株中選取10種菌株作為研究的菌株對象,其中細菌6種,分別為B-JQ(鮑曼不動桿菌)、B-SY(巨大芽孢桿菌)、B-SY7(嗜根寡養(yǎng)單胞菌)、B-JC1(枯草芽胞桿菌)、B-XH1(解淀粉芽孢桿菌)和B-SYS2(大腸桿菌);真菌4種,分別為F-HZJ2(草酸青霉)、F-SY1(細極鏈格孢)、F-SYS1(擴展青霉菌)、F-JC3(枝孢樣枝孢霉)。其次,通過去離子水浸提法得到的艾葉提取物BEA、索式提取法獲得SEA艾葉提取物以及購買的商業(yè)化CEA艾葉提取物對10種供試菌株進行抑菌率的測定,經過水煮浸提取液對菌的抑制效果表型觀察確認艾葉提取物對這些微生物的生長有抑制影響。最后,通過詳細的生理測定和數據統(tǒng)計對艾葉提取物對分離的幾種微生物生長抑制效應進行作用分析。研究發(fā)現不同的提取方法和處理方法對菌有不同的抑制效果,三種提取物產生了不同的抑菌效果,BEA對細菌有明顯的抑制作用,而對真菌的作用不太明顯。SEA和CEA兩種提取物對本實驗10種供試菌都有一定的抑制作用,SEA和CEA對4種真菌的抑制效果要強于6種細菌。不同濃度的SEA和CEA對不同的菌種有不同的抑制效果,但是總體上SEA提取物對菌的抑制效果要比CEA的抑制效果好,SEA和CEA提取物對鮑曼不動桿菌、草酸青霉有更好的抑制效果;基本上SEA和CEA提取物濃度在25 mg/ml對供試細菌都產生了抑制作用,濃度在15mg/ml開始對真菌有抑制效果;SEA對草酸青霉的抑制效果要強于其他三種,其MIC為30 mg/ml,而對細極鏈格孢、擴展青霉菌、枝孢樣枝孢霉的MIC都是40 mg/ml;從SEA對CSA提取物對6種細菌生長抑菌圈直徑的百分比21.3%、16.9%、15.4%、9.2%、9.5%、10.5%來看,也表明SEA的抑菌效果要比CEA的抑菌效果要強些;在對真菌的抑菌率測定中,SEA對四種真菌的抑菌率在60%左右,CEA對四種真菌的抑菌率在50%左右。
【圖文】：

技術路線圖

圖 2-1 購買的兩年陳艾草葉和艾葉提取物Fig 2-1 Two years old leaves of Artemisia argyi and extract of Artemisia argyiA、放置了兩年的艾葉 B、網上購買的艾葉提取物用實驗試劑NA Marker 2000 bp 北京索萊寶科技有限公司×Taq plus Mix 南京諾唯贊生物科技有限公司oldview 北京索萊寶科技有限公司oading Buffer 北京索萊寶科技有限公司菌 DNA 提取試劑盒 生工生物工程有限公司收膠試劑盒 賽默飛世爾科技（中國）有限公司酸凝膠配制[54]：配制濃度為 1%的核酸凝膠，量取 100 ml 的 1 TAE 加入稱 的瓊脂糖，在微波爐加熱使其融化變?yōu)榍辶镣该饕后w即可。輕輕搖勻后待溫℃左右加入 2 μl Goldview，，輕輕搖勻倒入插上梳子的膠板待膠凝固后備用。
【學位授予單位】：南陽師范學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R285

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本文編號：2645118