【摘要】：目的:研究石上柏顆粒對肝癌模型裸鼠移植瘤生長的抑制作用,并且通過研究石上柏顆粒對細(xì)胞周期相關(guān)蛋白以及腫瘤細(xì)胞侵襲和遷移相關(guān)蛋白的作用來研究其抗肝癌的作用機(jī)制。方法:采用給Nu/Nu裸小鼠皮下注射HepG2細(xì)胞懸液制備肝癌移植瘤模型。選取48只造模成功的Nu/Nu裸小鼠隨機(jī)分為4組,分別為模型對照組、氟尿嘧啶組、石上柏顆粒組、聯(lián)合給藥組,每組12只荷瘤裸鼠。氟尿嘧啶組裸鼠灌胃給藥氟尿嘧啶20mg/kg,石上柏顆粒組裸鼠灌胃給藥石上柏顆粒120mg/kg,聯(lián)合給藥組裸鼠同時(shí)灌胃給藥氟尿嘧啶20mg/kg和石上柏顆粒120mg/kg,模型對照組裸鼠給藥同體積純凈水,各組裸鼠連續(xù)藥物灌胃給藥干預(yù)4周。給藥2、3、4周時(shí)測量各組裸鼠腫瘤體積,計(jì)算腫瘤生長抑制率。末次給藥1h處死動(dòng)物,仔細(xì)剝離腫瘤組織,稱瘤重并計(jì)算腫瘤生長抑制率。取各組裸鼠瘤組織采用Trizol法提取RNA,采用RT-PCR測定各組裸鼠瘤組織中Cyclin D1、CKS1、FAK、Ezrin和MMP-9 mRNA的表達(dá),取各組裸鼠瘤組織采用West-blot測定瘤組織中Cyclin D1、CKS1、FAK、Ezrin和MMP-9蛋白的表達(dá)。結(jié)果:(1)給藥前4組裸鼠移植瘤體積差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),給藥1、2、3和4周時(shí)氟尿嘧啶組裸鼠移植瘤體積均較模型對照組裸鼠顯著降低(P0.01),給藥2、3、4周時(shí)石上柏顆粒組裸鼠移植瘤體積均較模型對照組裸鼠顯著降低(P0.01),給藥3周和4周時(shí)聯(lián)合給藥組移植瘤體積均較氟尿嘧啶組裸鼠顯著降低(P0.01);(2)給藥1、2、3和4周時(shí)聯(lián)合給藥組裸鼠移植瘤抑制率均較石上柏顆粒組裸鼠顯著升高(P0.01);給藥3周和4周時(shí)聯(lián)合給藥組移植瘤抑制率均較氟尿嘧啶組裸鼠顯著升高(P0.01);(3)給藥4周時(shí)氟尿嘧啶組、石上柏顆粒組和聯(lián)合給藥組裸鼠瘤組織Cyclin D1和CKS1mRNA均較模型對照組顯著降低(P0.01),而聯(lián)合給藥組裸鼠瘤組織Cyclin D1和CKS1mRNA較氟尿嘧啶組顯著降低(P0.01);(4)給藥四周時(shí)氟尿嘧啶組、石上柏顆粒組和聯(lián)合給藥組裸鼠瘤組織Cyclin D1和CKS蛋白均較模型對照組降低(P0.05或P0.01),而聯(lián)合給藥組裸鼠瘤組織Cyclin D1和CKS1蛋白較氟尿嘧啶組降低(P0.05或P0.01);(5)給藥4周時(shí)氟尿嘧啶組、石上柏顆粒組和聯(lián)合給藥組裸鼠瘤組織FAK、Ezrin和MMP-9 mRNA均較模型對照組顯著降低(P0.01),而聯(lián)合給藥組裸鼠瘤組織FAK、Ezrin和MMP-9 mRNA較氟尿嘧啶組裸鼠和石上柏顆粒組裸鼠顯著降低(P0.01);(6)給藥4周時(shí)氟尿嘧啶組、石上柏顆粒組和聯(lián)合給藥組裸鼠瘤組織FAK、Ezrin和MMP-9蛋白均較模型對照組降低(P0.05),而聯(lián)合給藥組裸鼠瘤組織FAK、Ezrin和MMP-9蛋白較氟尿嘧啶組裸鼠和石上柏顆粒組裸鼠降低(P0.05或P0.01)。結(jié)論:石上柏顆粒具有抗肝癌作用,并且可以增強(qiáng)氟尿嘧啶的療效,其抗肝癌作用可能與其抑制周期細(xì)胞蛋白Cyclin D1和CKS1表達(dá),以及作用于腫瘤細(xì)胞侵襲和遷移相關(guān)的FAK、Ezrin和MMP-9蛋白有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5

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本文編號：2643390