【摘要】：目的:觀察哮喘模型大鼠肺及內(nèi)臟感覺(jué)傳入神經(jīng)中NGF的表達(dá),探討Sema4D與NGF的關(guān)系及咳喘寧調(diào)節(jié)Sema4D對(duì)NGF的影響,為進(jìn)一步闡明咳喘寧整體調(diào)節(jié)作用機(jī)理提供依據(jù)。方法:幼齡Wistar大鼠72只,按隨機(jī)數(shù)字表法選取12只作為正常組,其余組作為模型組,模型組按照幼齡大鼠RSV復(fù)合OVA哮喘模型方法造模,于致敏14天后,從正常組中及模型組中分別隨機(jī)選取6只觀察大鼠精神狀態(tài)及心率、呼吸并檢測(cè)氣道高反應(yīng)性判斷模型是否成功。待哮喘模型造模完成后,將造模成功后的大鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為9組,每組6只,即哮喘大鼠組(模型組)、哮喘大鼠Sema4D干預(yù)組(Sema4D組)、哮喘大鼠Sema4D抗體干預(yù)組(Sema4D抗體組)、哮喘大鼠低、中、高劑量咳喘寧干預(yù)組(咳喘寧Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組)、哮喘大鼠Sema4D+不同劑量咳喘寧干預(yù)組(聯(lián)合Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組)。除正常組6只外,其余9組大鼠按分組情況分別予以藥物干預(yù):Sema4D組予以Sema4D腹腔注射,Sema4D抗體組予以Sema4D抗體腹腔注射,咳喘寧Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組分別給予咳喘寧低、中、高劑量灌胃,Sema4D+不同劑量咳喘寧干預(yù)組分別予以Sema4D腹腔注射及咳喘寧低、中、高劑量灌胃(按臨床量效關(guān)系觀察結(jié)果擬定咳喘寧口服液高劑量1ml/100g,中劑量0.3ml/100g,低劑量0.033ml/100g),每天1次,治療2周。上述處理連續(xù)2周后,取出各組大鼠動(dòng)物模型肺組織與脊髓組織,分別采用Real-time PCR技術(shù)、免疫組織化學(xué)方法及Western blotting技術(shù)檢測(cè)NGF含量的表達(dá)變化。結(jié)果:1.哮喘發(fā)病時(shí)Sema4D對(duì)NGF的影響:與模型組相比,Sema4D組中NGF表達(dá)明顯增高,P0.01,差異有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Sema4D抗體組與模型組相比,NGF的表達(dá)明顯減低,p0.01,差異有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2.哮喘發(fā)病時(shí)咳喘寧調(diào)節(jié)Sema4D對(duì)NGF的影響:(1)空白組NGF表達(dá)最少,各組與空白組對(duì)比,NGF表達(dá)均有增高,P0.01,差異有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(2)與模型組相比,Sema4D抗體組及咳喘寧各組中NGF的含量均有減低,p0.01,差異有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。聯(lián)合Ⅰ組與模型組相比,NGF表達(dá)稍高,p0.05,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。聯(lián)合Ⅱ、Ⅲ組與模型組相比,NGF表達(dá)減低,P0.01,差異有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(3)Sema4D抗體組與咳喘寧各組相比,咳喘寧Ⅱ、Ⅲ組中NGF表達(dá)減低,P0.01,差異有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義�？却瓕帰窠MNGF表達(dá)比抗體組增高,P0.01,差異有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(4)與咳喘寧Ⅲ組相比,模型組、Sema4D組、Sema4D抗體組、咳喘寧Ⅰ組、聯(lián)合Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組NGF表達(dá)均有明顯增高,P0.01,差異有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與咳喘寧Ⅲ組相比,咳喘寧Ⅱ組NGF含量稍低(p0.05),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:1.哮喘發(fā)病時(shí),Sema4D促進(jìn)NGF的表達(dá),加重哮喘發(fā)展。2.哮喘發(fā)病時(shí),咳喘寧口服液可抑制NGF的表達(dá),Sema4D對(duì)NGF的促進(jìn)作用可被咳喘寧削弱,咳喘寧中、高劑量組的調(diào)控作用最佳,即咳喘寧口服液可能通過(guò)調(diào)控Sema4D而影響NGF的表達(dá)發(fā)揮治療作用。
【圖文】：

表 2 各組大鼠氣道阻力比較（ x±s）Rl 升高率%正常組 模型組濃度（mg /kg）生理鹽水 20.50±2.81 21.17±3.371.56 42.17±3.25 44.50±1.523.12 60.50±3.33 105.00±7.32◇6.25 82.50±4.14 152.83±7.31◇12.5 107.83±7.00 324.33±4.89◇25 158.67±4.84 575.00±4.34◇注：與正常組相比，◇表示 P＜0.01，，差異有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，未標(biāo)記表示無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

肺組織NGF的表達(dá)（100×）
【學(xué)位授予單位】：湖南中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R285.5;R-332

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2643108