【摘要】：目的:通過免疫誘導(dǎo)的方式建立干燥綜合征(Sjogren's syndrome,SS)的動物模型,動態(tài)觀察增液潤燥湯對SS模型小鼠IFN-Y(白介素-Y)、AQP-5(水通道蛋白-5)的干預(yù)作用,明確其治療靶點,為進一步探討增液潤燥湯治療SS的作用機制提供基礎(chǔ)依據(jù),同時也為其臨床治療干燥綜合征提供有力的實驗依據(jù)。方法:選取BALB/c小鼠,脫頸處死,取出兩側(cè)頜下腺,取出雙側(cè)頜下腺并分離組織表面的附屬物,稱質(zhì)量、剪碎后加生理鹽水在冰浴中勻漿機勻漿,然后在4℃低溫離心機中離心,棄去上層脂質(zhì),保留上清液,得到自身抗原蛋白。用滅菌PBS將抗原稀釋成800 μg/ml,加等量CFA,使抗原變?yōu)?00 μg/ml的油水混合乳劑。根據(jù)數(shù)字隨機表將60只實驗小鼠隨機分為6組,分別為:空白組,模型組(MXZ),低劑量中藥組(ZYZI)、中劑量中藥組(ZYZII)、高劑量中藥組(ZYZIII),西藥治療組(XYZ)。第 0天,MXZ、ZYZI、ZYZII、ZYZ III及XYZ小鼠每側(cè)腹股溝酒精消毒后注射0.05ml抗原,即每只小鼠注射0.1ml抗原。第14天重復(fù)上述操作以加強免疫。在第2天及第7天,向MXZ、ZYZI、ZYZII、ZYZIII及XYZ小鼠各腹腔注射0.05ml白百破聯(lián)合疫苗,造成類似SS的頜下腺表現(xiàn)和癥狀。三組中藥組給予增液潤燥湯顆粒劑沖泡溶液灌胃。空白組、模型組給予去離子水灌胃,西藥治療組給予白芍總苷溶液灌胃。Elisa法測定頜下腺組織上清液中IFN-γ(白介素-γ)含量,免疫組化SP法檢測AQP5定位表達。結(jié)果:增液潤燥湯能減少SS模型小鼠IFN-γ的分泌。病理切片表明增液潤燥湯能上調(diào)AQP5的表達、減輕小鼠頜下腺淋巴細胞浸潤情況。結(jié)論:增液潤燥湯可能通過降低腺體組織的IFN-γ含量,從而抑制自身的免疫炎癥反應(yīng),結(jié)合病理切片增液潤燥湯能修復(fù)SS模型小鼠頜下腺腺泡及導(dǎo)管結(jié)構(gòu),清除聚集浸潤的淋巴細胞,上調(diào)AQP5的表達,進而恢復(fù)腺體的生理功能,達到緩解病情的目的。
【學(xué)位授予單位】：河南中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5;R-332

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本文編號：2642922