【摘要】：目的:1.采用低壓低氧動(dòng)物實(shí)驗(yàn)艙建立重復(fù)性良好的高原肺水腫大鼠模型,并探討急性低壓低氧、寒冷結(jié)合運(yùn)動(dòng)對大鼠發(fā)生高原肺水腫的影響。2.研究7-羥乙基白楊素對高原肺水腫大鼠的干預(yù)作用及其初步作用機(jī)制。方法:1.120只Wistar大鼠隨機(jī)分為正常對照組、模型-Ⅰ(海拔6000 m)、模型-Ⅱ(海拔6000 m+低溫2℃)、模型-Ⅲ(海拔6000 m+低溫2℃+跑步運(yùn)動(dòng))、模型-Ⅳ(海拔6000 m+晝夜溫差12℃/2℃)、模型-Ⅴ組(海拔6000 m+晝夜溫差12℃/2℃+跑步運(yùn)動(dòng)),通過預(yù)設(shè)條件處理各組大鼠,以肺組織病理改變、肺含水量及肺微血管通透性作為大鼠發(fā)生高原肺水腫的初步指示指標(biāo),篩選出高原肺水腫大鼠模型,通過肺組織氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)與相關(guān)炎性因子表達(dá)的檢測進(jìn)一步評價(jià)模型,并通過重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)考察模型穩(wěn)定性。2.100只Wistar大鼠隨機(jī)分為正常對照組(等容滅菌注射用水)、高原肺水腫模型組(等容滅菌注射用水)、乙酰唑胺組(200 mg/kg)、白楊素組(350 mg/kg)、7-羥乙基白楊素組(350 mg/kg),復(fù)制高原肺水腫大鼠模型,灌胃給藥6天,通過對大鼠肺組織病理變化觀察、肺含水量與肺微血管通透性檢測、血?dú)馀c血常規(guī)分析、氧化應(yīng)激與能量代謝相關(guān)指標(biāo)檢測、炎性因子檢測、肺血管通透性相關(guān)指標(biāo)檢測、肺動(dòng)脈壓相關(guān)指標(biāo)檢測、肺泡清除率相關(guān)指標(biāo)檢測,評價(jià)白楊素及7-羥乙基白楊素對高原肺水腫大鼠的干預(yù)作用,并通過Real-Time PCR法檢測高原肺水腫發(fā)生相關(guān)基因的表達(dá),探討7-羥乙基白楊素預(yù)防大鼠高原肺水腫的初步作用機(jī)制。結(jié)果:1.模型-Ⅳ與模型-Ⅴ組大鼠肺組織均發(fā)生明顯病理改變,肺含水量升高、肺微血管通透性增大,其中以模型-Ⅴ的變化更為顯著,初步篩選模型-Ⅴ為高原肺水腫大鼠模型。同時(shí)檢測氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)與相關(guān)炎性因子表達(dá),結(jié)果顯示模型-Ⅴ組大鼠發(fā)生明顯的氧化應(yīng)激反應(yīng)與炎癥反應(yīng),表現(xiàn)為肺組織MPO、MDA、H2O2水平明顯升高,SOD、CAT、GST、GPX及GSH水平降低,血清NFκB p65、TNF-α、IL-1β及IL-6水平與肺組織VCAM-1、s ICAM-1蛋白含量升高。進(jìn)一步通過重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)檢測模型-Ⅳ與模型-Ⅴ肺含水量及肺微血管通透性,發(fā)現(xiàn)模型-Ⅴ條件下大鼠肺組織含水量與肺微血管通透性顯著增大,發(fā)生明顯肺水腫,說明模型-Ⅴ為更穩(wěn)定、可靠的高原肺水腫大鼠模型。2.7-羥乙基白楊素預(yù)防給藥可以明顯改善高原肺水腫大鼠肺組織病理改變、降低肺含水量與肺微血管通透性、緩解大鼠體重快速下降,改善血?dú)馀c血常規(guī)各項(xiàng)指標(biāo)變化,使之接近正常水平;降低MPO、MDA、H2O2水平,增強(qiáng)SOD、GST、GPX活力,升高GSH含量,對CAT無明顯作用,提高肺組織對·OH、O2-·的清除能力,明顯減弱氧化應(yīng)激反應(yīng);增加ATP的生成,對LD/Pyr比值無影響,提示其可能提高大鼠對氧的利用,而對糖酵解途徑無明顯作用;下調(diào)NFκB p65蛋白的表達(dá),減少由其調(diào)控的炎性因子的產(chǎn)生;升高NO、CO含量,增大e NOS/ET-1比值,抑制肺血管過度收縮,降低肺動(dòng)脈高壓;下調(diào)HIF-1α、VEGFA基因的表達(dá),上調(diào)Occludin基因與蛋白表達(dá),降低肺微血管通透性;上調(diào)AQP1、α-ENa C及Na+K+-ATPase基因及蛋白的表達(dá),增大肺泡液體清除能力,改善肺泡主動(dòng)重吸收功能障礙。結(jié)論:1.篩選出重現(xiàn)性良好的高原肺水腫大鼠模型,初步確定了高原肺水腫大鼠模型的建立條件。2.7-羥乙基白楊素對預(yù)防大鼠高原肺水腫具有良好效果,且作用優(yōu)于乙酰唑胺與白楊素,其預(yù)防作用可能表現(xiàn)在改善大鼠生理病理改變、抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)與炎癥反應(yīng)、降低肺動(dòng)脈壓與肺血管通透性及提高肺泡液體清除能力等方面。3.HIF-1活化后啟動(dòng)下游基因的轉(zhuǎn)錄與激活可能是7-羥乙基白楊素預(yù)防大鼠發(fā)生高原肺水腫的重要作用途徑,7-羥乙基白楊素上調(diào)α-ENa C與Na+K+-ATPase的表達(dá)對改善肺泡液體重吸收功能障礙具有重要意義。
【圖文】：

圖 1-1 白楊素的化學(xué)結(jié)構(gòu)與神經(jīng)保護(hù)作用用是白楊素最重要的藥理活性，研究表明[67]，白楊素變細(xì)胞周期、抑制血管生成來實(shí)現(xiàn)其抗腫瘤作用，與毒性造成的不良反應(yīng)。白楊素及其大多數(shù)衍生物具有較強(qiáng)抗腫瘤活性，白構(gòu)有利于黃酮與靶蛋白或靶分子相互作用，增強(qiáng)抗過少均能影響其抗腫瘤活性，關(guān)于羥基取代位置，則基抗腫瘤活性增強(qiáng)，而 5,7-位、B 環(huán)間羥基存在降低異戊二烯氧基時(shí)，激活 Caspase 活性消失，提示 5-位亡的重要因素，當(dāng) 5-位甲氧基存在時(shí)對腫瘤細(xì)胞的抑 Mannich 基團(tuán)能增強(qiáng)白楊素對腫瘤細(xì)胞的毒性作用，白楊素及其衍生物 Chrysin-Sn 通過激活 Caspase -Ⅱ水平增加，來完成抗腫瘤作用，且 Chrysin-Sn 可

最終以模擬海拔 6000m、低溫 2℃或晝夜溫差 模條件的選擇，設(shè)置 5 種建模方案，通過不同條件現(xiàn)性良好的 HAPE 大鼠模型。合物在自然界廣泛存在，其藥理作用廣泛，具有良在諸多黃酮類化合物中篩選出活性較強(qiáng)的白楊素，并種白楊素衍生物，發(fā)現(xiàn)其中的 7-羥乙基白楊素（C）具有更強(qiáng)的自由基清除能力，其合成方法已申請4926769A，7-羥乙基白楊素化學(xué)結(jié)構(gòu)如圖 1-2 示。本鼠常壓密閉耐受實(shí)驗(yàn)、急性減壓耐受實(shí)驗(yàn)及對腦組織其對腦組織損傷有保護(hù)作用，具有較強(qiáng)抗缺氧活性時(shí)，也有研究表明白楊素對肺組織損傷具有一定的�；讞钏貙Ψ螕p傷的保護(hù)作用亦具有一定研究價(jià)值 7-羥乙基白楊素對預(yù)防大鼠 HAPE 的發(fā)生確實(shí)存在全面的角度對 7-羥乙基白楊素對 HAPE 大鼠的干預(yù)研究。
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5;R-332

【參考文獻(xiàn)】

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1 劉雪;鄧燕;尚進(jìn);楊秀紅;劉馗;劉輝國;徐永健;;Effect of NADPH Oxidase Inhibitor Apocynin on the Expression of Hypoxia-induced Factor-1α and Endothelin-1 in Rat Carotid Body Exposed to Chronic Intermittent Hypoxia[J];Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences);2013年02期

2 ;Endothelial Nitric Oxide Synthase Gene Polymorphisms Associated with Susceptibility to High Altitude Pulmonary Edema in Chinese Railway Construction Workers at Qinghai-Tibet over 4500 Meters above Sea Level[J];Chinese Medical Sciences Journal;2010年04期

3 陳有;高鈺琪;李素芝;趙忠誠;劉福玉;牟信兵;;高原肺水腫動(dòng)物模型的初步研究[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2006年11期

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本文編號：2640050