【摘要】：第一部分異葉敗醬化學(xué)成分及其抗腫瘤活性的研究異葉敗醬(Patrinia heterophylla Bunge)屬于敗醬科敗醬屬植物,又稱墓頭回,多年生草本,以其根及根莖入藥。敗醬屬植物全球約有20種,主要分布于亞洲和北美洲,我國有10種,3亞種,2變種,主要分布于甘肅、河南、河北等地。該屬植物在我國具有悠久的藥用歷史,具有抗腫瘤、抗炎、抗菌、抗病毒、抗氧化、鎮(zhèn)靜催眠、保肝等作用。異葉敗醬作為一種傳統(tǒng)的抗腫瘤藥物,目前,除了揮發(fā)油成分外,僅從該植物中分離出7個三萜類化合物、4個環(huán)烯醚萜酯類化合物、3個木脂素類化合物、2個甾體類化合物、3個黃酮類化合物、4個三萜皂苷類化合物和1個香豆素類化合物。有關(guān)其化學(xué)成分的系統(tǒng)研究和抗腫瘤的物質(zhì)基礎(chǔ)研究是十分必須的。目的:異葉敗醬作為一種傳統(tǒng)抗腫瘤藥物,本文對異葉敗醬的化學(xué)成分其及抗腫瘤活性進行研究,為以后異葉敗醬的開發(fā)和利用提供科學(xué)依據(jù)。方法:采用各種柱分離技術(shù)從異葉敗醬中分離鑒定得到了15種化合物,通過核磁共振波譜、質(zhì)譜分析技術(shù)確定它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)。采用了四甲基偶氮唑藍(MTT)法測定異葉敗醬總提物和14個單體化合物對6株人源腫瘤細胞株:人黑色素瘤細胞(A 375)、人肝細胞癌(SMMC-7721)、人胃癌(SGC-7901)、人宮頸癌(He La)、人結(jié)腸癌(HCT-116)和人乳腺癌(MDA-MB-231)的細胞毒性作用。采用Annexin V-FITC/PI雙染法測定化合物1,5,12和15對腫瘤細胞A 375的誘導(dǎo)凋亡作用。結(jié)果:15個單體化合物經(jīng)鑒定分別為5種苯丙素類化合物:咖啡酸乙酯(1),松柏醛(5),4-羥基苯乙醛(6),咖啡酸甲酯(12),3,4-二羥基肉桂酸(15);4種苯乙酮類化合物:2,4-二羥基苯基乙酮(2),2',5'-二羥基苯乙酮(3),cynanchone A(8),cynandione A(10);2種苯酚類:香草醛(4),鄰苯二酚(9);2種環(huán)烯醚萜酯類化合物:瓶子草素(7),patriscabrol(11);1種香豆素類:東莨菪素(13);1種烷烴類:正二十四烷(14)。其中化合物1-10,12和14-15首次從異葉敗醬中分離得到,化合物1和15首次被報道具有體外抗腫瘤活性。MTT法顯示異葉敗醬總提物對A375,SMMC-7721,He La,HCT-116和MDA-MB-231這5種腫瘤細胞均有明顯的抑制增值作用,其中對He La細胞作用最明顯�；衔�1,5-9,12-13和15對腫瘤細胞具有明顯細胞毒性,流式細胞儀檢測到化合物1,5,12和15在低濃度下可誘導(dǎo)A 375細胞凋亡。結(jié)論:本課題豐富了異葉敗醬化學(xué)成分的研究,并表明了苯丙素類、環(huán)烯醚萜類和香豆素類化合物可能是異葉敗醬的活性成分。第二部分玉米須對Ⅱ型糖尿病小鼠降糖作用的研究玉米須(Stigma maydis)為禾本科植物玉蜀黍Zea mays L.的花柱和柱頭,在我國大部分地區(qū)均有種植生產(chǎn)。玉米須是我國的傳統(tǒng)中藥,在許多中藥典籍中都有關(guān)于其的記載,如《河北藥材》、《嶺南采藥錄》、《滇南本草》等。具有利水消腫、平肝利膽的作用。研究發(fā)現(xiàn)玉米須的主要成分有多糖類、黃酮類、皂苷類、甾醇類、酚類等成分�，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明玉米須具有降血糖、降血脂、降血壓、抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫力等作用。地方植物志《四川中藥志》中記載其無毒,現(xiàn)代毒理學(xué)實驗和臨床用藥觀察均發(fā)現(xiàn)其無毒,使用安全。目的:為了更好地開發(fā)和利用我國玉米須資源,本課題對玉米須的降血糖及其作用機制進行初步研究。方法:用60%乙醇在60℃提取制備玉米須提取物,濃縮、冷凍、干燥得玉米須粉末;高脂飼料聯(lián)合鏈脲佐菌素誘導(dǎo)建立小鼠Ⅱ型糖尿病模型;造模小鼠隨機分為玉米須高、中、低、劑量組(1200,600,300 mg/kg.d),陽性藥組(150 mg/kg.d)和模型組,模型組和正常組灌胃給予生理鹽水(0.1 m L/10g),灌胃四周;每周測定小鼠血糖、體重,且觀察小鼠毛色、精神、行為等;四周后進行糖耐量實驗,灌胃給予葡萄糖水溶液(濃度20%),給藥體積10 m L/kg,分別在0,15,30,60,120分鐘時測定血糖值;眼球取血,離心得血清,用于總膽固醇(TC),甘油三酯(TG),丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD)的測定。最后解剖收集肝臟、腎臟,濾紙吸干后稱重,放置于福爾馬林固定液中,常規(guī)脫水,石蠟包埋,切片,染色后進行光鏡檢查實驗。結(jié)果:玉米須高、中劑量組和陽性組能明顯降低Ⅱ型糖尿病小鼠的空腹血糖值(P0.05),且改善小鼠糖耐量情況。與模型組相比,玉米須高、中劑量組以及陽性組可以明顯降低小鼠血清中TC,TG,MDA水平,并顯著升高SOD活性(P0.05)。與模型組相比,玉米須高劑量組和陽性組能改善糖尿病小鼠的肝損傷。結(jié)論:玉米須能明顯降低Ⅱ型糖尿病小鼠血糖,可能與其抗氧化和調(diào)節(jié)脂代謝作用有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R284.1;R285.5

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本文編號：2639368