【摘要】：背景:癌癥是世界范圍內(nèi)的重大公共衛(wèi)生問題之一,結(jié)直腸癌(Colorectal Cancer)是世界上最常見的惡性腫瘤之一。2019年美國結(jié)直腸癌預(yù)計(jì)的發(fā)病率和死亡率將在所有癌癥中居于第三位,結(jié)直腸癌嚴(yán)重威脅著人類的健康。藥物化療是治療結(jié)直腸癌的主要方法之一,但因傳統(tǒng)化療藥物選擇性差,伴有不同程度毒副作用,長期使用導(dǎo)致耐藥等原因,直接或間接影響患者的預(yù)后情況和生存質(zhì)量。由于不少患者對天然化合物具有很好的耐受性,即使在高劑量時(shí)也不會產(chǎn)生明顯的毒副作用。因此,急切尋找一種更有效的天然化合物,與傳統(tǒng)化療藥物相結(jié)合,從而提高結(jié)直腸癌患者的預(yù)后和生存質(zhì)量。目的:(1)探究石蒜堿能否抑制結(jié)腸癌HT29細(xì)胞株增殖,并誘導(dǎo)其凋亡。(2)探究石蒜堿誘導(dǎo)結(jié)腸癌HT29細(xì)胞株凋亡的可能機(jī)制。方法:(1)石蒜堿對結(jié)腸癌HT29細(xì)胞增殖和凋亡的影響,(1)MTT法檢測石蒜堿對HT29細(xì)胞增殖的影響。(2)細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)檢測石蒜堿對HT29細(xì)胞集落形成的影響。(3)Hochest33258實(shí)驗(yàn)觀察石蒜堿對HT29細(xì)胞核凋亡形態(tài)的影響。(4)流式細(xì)胞術(shù)檢測石蒜堿對HT29細(xì)胞凋亡情況的影響。(2)石蒜堿誘導(dǎo)結(jié)腸癌HT29細(xì)胞凋亡的可能機(jī)制,Western blot檢測石蒜堿對HT29細(xì)胞中的Bcl-2、Bax、caspase-3、ERK、p-ERK、p38、p-p38、JNK、AKT、NF-κB蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果:(1)石蒜堿對結(jié)腸癌HT29細(xì)胞增殖和凋亡的影響,(1)MTT法結(jié)果顯示石蒜堿能有效抑制結(jié)腸癌HT29細(xì)胞增殖(P0.05),呈現(xiàn)時(shí)間、濃度依賴性。(2)細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示石蒜堿能顯著抑制HT29細(xì)胞集落形成能力(P0.05),呈濃度依賴性。(3)Hochest33258實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示石蒜堿能促進(jìn)HT29細(xì)胞產(chǎn)生凋亡,細(xì)胞形態(tài)呈現(xiàn)明顯的凋亡變化。(4)流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果顯示石蒜堿能有效促進(jìn)HT29細(xì)胞凋亡,呈現(xiàn)濃度依賴性(P0.05)。(2)Western blot檢測結(jié)果顯示石蒜堿能明顯下調(diào)HT29細(xì)胞中的Bcl-2、p-ERK、AKT、NF-κB的表達(dá),上調(diào)Bax、caspase-3、p38、JNK的表達(dá)。結(jié)論:(1)石蒜堿能明顯抑制結(jié)腸癌HT29細(xì)胞株增殖,并誘導(dǎo)其凋亡。(2)石蒜堿誘導(dǎo)結(jié)腸癌HT29細(xì)胞,發(fā)生凋亡的機(jī)制可能與上調(diào)促凋亡蛋白Bax,caspase-3蛋白,下調(diào)抑凋亡蛋白Bcl2蛋白,發(fā)生內(nèi)源性凋亡途徑有關(guān)。(3)石蒜堿誘導(dǎo)結(jié)腸癌HT29細(xì)胞株凋亡的可能機(jī)制是與抑制MAPK/ERK通路,激活MAPK/p38、MAPK/JNK通路有關(guān)。(4)石蒜堿誘導(dǎo)結(jié)腸癌HT29細(xì)胞株凋亡的可能機(jī)制是與抑制AKT/NF-κB通路來實(shí)現(xiàn)。
【圖文】：

石蒜堿誘導(dǎo)結(jié)腸癌細(xì)胞株 HT29 凋亡及其機(jī)制的研究 2019 屆碩士學(xué)位畢業(yè)論文結(jié)果1. MTT 實(shí)驗(yàn)觀察石蒜堿對結(jié)腸癌 HT29 細(xì)胞增殖的影響MTT 實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖 1 所示，與空白對照組比較，石蒜堿誘導(dǎo)作用于 HT29 細(xì)胞 24、48h 后，HT29 細(xì)胞的存活率明顯下降（P<0.05），且呈時(shí)間、濃度依賴相關(guān)。石蒜堿對 HT29 細(xì)胞增殖有明顯的抑制作用，，石蒜堿作用于 HT29 細(xì)胞后的 24、48h 的 IC50 分別為（23.52±1.33）、（0.59±0.20）umol·L-1。

石蒜堿誘導(dǎo)結(jié)腸癌細(xì)胞株 HT29 凋亡及其機(jī)制的研究 2019 屆碩士學(xué)位畢業(yè)論文2. 細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)觀察石蒜堿對結(jié)腸癌 HT29 細(xì)胞增殖的影響細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖 2 顯示，（0、1、4、16 umol·L-1）各石蒜堿加藥組加藥誘導(dǎo)HT29細(xì)胞接種7d后形成肉眼可見的細(xì)胞集落 ， 克 隆 形 成 率 分 別 為 (77.00±3.61)% 、 (64.17±2.02) % 、(51.50±2.78) %、(26.67±1.61) %,克隆形成率明顯下降（P<0.05），且呈明顯量效趨勢，說明石蒜堿能有效抑制結(jié)腸癌 HT29 細(xì)胞的集落形成能力，抑制癌細(xì)胞增殖。
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R285.5

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本文編號：2638722