【摘要】：研究目的研究天然水蛭素對人微血管內(nèi)皮細(xì)胞(human microva-scular vein endothelial cells,HMVECs)增殖的影響及其誘導(dǎo)血管再生的機制。實驗方法取HMVECs接種至Matrigel基質(zhì)膠培養(yǎng)24h,體外建立三維培養(yǎng)模型,于倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。然后將細(xì)胞三維培養(yǎng)模型隨機分為含不同濃度天然水蛭素培養(yǎng)組(1、4、7 ATU/ml組)以及單純含10%FBS的DMEM培養(yǎng)基的培養(yǎng)組(對照組)。各組細(xì)胞三維培養(yǎng)模型加入對應(yīng)培養(yǎng)基后,培養(yǎng)24、48、72 h采用細(xì)胞計數(shù)試劑盒8(cell counting kit 8,CCK-8)檢測各組細(xì)胞增殖情況;培養(yǎng)24 h對1、4、7 ATU/ml組行成管實驗,免疫熒光染色法測定各組細(xì)胞VEGF及Notch1表達(dá)水平。實驗結(jié)果細(xì)胞三維培養(yǎng)觀察示,HMVECs于基質(zhì)膠上貼附良好,24h完全形成管腔樣結(jié)構(gòu)。CCK-8檢測示,各時間點1、4 ATU/ml組A值均高于對照組(P0.05),其中4 ATU/ml組最高;而7 ATU/ml組A值顯著低于對照組以及1、4 ATU/ml組,(P0.05)。細(xì)胞成管實驗示,1、4 ATU/ml組成管數(shù)較對照組及7 ATU/ml組明顯增多,且4 ATU/ml組多于1 ATU/ml組,比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);7 ATU/ml組與對照組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。免疫熒光染色示,與對照組比較,1、4 ATU/ml組Notch1表達(dá)量增高,7 ATU/ml組降低;其中4 ATU/ml組與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。1、4、7 ATU/ml組VEGF表達(dá)量均較對照組增高,比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);4 ATU/ml組高于1、7 ATU/ml組,比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論低、中濃度天然水蛭素可促進(jìn)HMVECs增殖使血管再生,而高濃度天然水蛭素則對HMVECs的血管再生起抑制作用;其作用機制可能與VEGF-Notch信號通路有關(guān)。
【圖文】：

圖 1 人微血管內(nèi)皮細(xì)胞（HMVECs）三維培養(yǎng) 24 小時后觀察（倒置相差顯微鏡×2Fig1 HMVECs by 3D cultured after 24 hours (inverted phase contrast microscope×200

CCK-8檢測人微血管內(nèi)皮細(xì)胞（HMVECs）生長曲線
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R285.5

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7 劉，

本文編號：2638630