【摘要】：實(shí)驗(yàn)?zāi)康?探討濕阻中焦證大鼠模型對(duì)葡萄糖代謝中無氧酵解及糖異生的影響。揭示濕阻中焦證機(jī)體物質(zhì)代謝和能量代謝失衡的部分分子機(jī)制、脾胃調(diào)控葡萄糖代謝無氧酵解及糖異生方面的作用靶點(diǎn)、平胃散與藿香正氣散的干預(yù)作用以及簡單對(duì)比。實(shí)驗(yàn)方法:采用前期成熟的濕阻中焦證的造模方法,建立濕阻中焦證動(dòng)物模型。選取間苯三酚法檢測(cè)血清中D-木糖含量,肝臟Na~+-K~+-ATP酶活性以化學(xué)比色法檢測(cè),血清、肝臟及肌肉中葡萄糖含量以過氧化物酶法檢測(cè),化學(xué)方法檢測(cè)肝臟組織中蛋白、丙酮酸、乳酸、肝糖原含量及血清中乳酸、胰島素、胰高血糖素含量及肌肉當(dāng)中的乳酸、肌糖原含量;ELISA法檢測(cè)肝臟組織中己糖激酶、丙酮酸激酶、磷酸果糖激酶-1、2,6-雙磷酸果糖、乙酰輔酶A、丙酮酸羧化酶、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶、葡萄糖-6-磷酸酶及肌肉當(dāng)中的乳酸脫氫酶與丙酮酸含量;高效液相色譜技術(shù)檢測(cè)ATP含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:1濕阻中焦證模型的建立(1)通過一般情況觀察,與空白組相比,模型組大鼠體重、飲食均明顯降低,精神狀態(tài)較差。(2)客觀指標(biāo)檢測(cè),模型組大鼠胃排空遲緩,血清D-木糖含量及Na~+-K~+-ATP酶活力均下降。(3)經(jīng)平胃散、藿香正氣散干預(yù)治療后,模型組大鼠體重、精神狀態(tài)、胃殘留率、腸推進(jìn)率、血清D-木糖吸收率和Na~+-K~+-ATP酶活性均得到改善。濕阻中焦證模型大鼠造模成功。2濕阻中焦大鼠葡萄糖、糖原、ATP及相關(guān)因子的變化造模后,與空白組相比,模型組大鼠血清及肝臟組織中葡萄糖、肝糖原、肝臟組織ATP及肌肉組織中葡萄糖含量顯著升高,而血清中胰島素、胰高血糖素含量及胰島素與胰高血糖素的比值有降低趨勢(shì),肌糖原無明顯變化。與模型組相比,自然恢復(fù)組血清及肝臟組織當(dāng)中葡萄糖、肝糖原、肝臟組織ATP及肌肉組織中葡萄糖含量顯著降低,血清中胰島素、胰高血糖素含量及胰島素與胰高血糖素的比值持續(xù)降低,肌糖原無明顯變化,其中ATP自然恢復(fù)組含量高于空白組水平。平胃散干預(yù)后,大鼠肌糖原含量升高,肝臟組織中的葡萄糖、ATP、肝糖原及肌肉組織中葡萄糖含量均降低明顯,其中肌肉組織葡萄糖平胃散各劑量組、肝糖原平胃散低劑量組、血清葡萄糖平胃散中劑量組及低劑量組水平均低于空白組;胰島素與胰高血糖素比值減小且與給藥劑量大小呈正相關(guān),其中胰島素與胰高血糖素比值平胃散中、低劑量組水平均低于空白組;大鼠血清中胰島素、胰高血糖素含量持續(xù)降低,二者變化趨勢(shì)一致且以平胃散低劑量降低最為明顯。藿香正氣散干預(yù)后,大鼠血清中葡萄糖、胰高血糖素、肝糖原、肝臟組織ATP含量降低,肌肉組織葡萄糖含量變化不明顯,而肝臟組織葡萄糖含量減小且與給藥劑量大小呈負(fù)相關(guān),肌糖原、胰島素含量及胰島素與胰高血糖素比值均升高,其中肝糖原、血清葡萄糖藿香正氣散干預(yù)后各組水平均低于空白組,胰島素藿香正氣散中劑量組及低劑量組、胰島素與胰高血糖素比值藿香正氣散各給藥組水平均高于空白組。3.濕阻中焦大鼠肝臟丙酮酸含量的變化造模后,模型組肝組織丙酮酸含量較空白組顯著降低;與模型組比較,自然恢復(fù)組肝臟組織丙酮酸含量升高到與空白組水平相近。平胃散干預(yù)后,肝臟組織丙酮酸含量升高,其中平胃散高劑量組及平胃散低劑量組水平高于空白組;藿香正氣散干預(yù)后,肝臟組織丙酮酸含量升高,各組水平均高于空白組。4.濕阻中焦大鼠無氧酵解相關(guān)因子的變化4.1濕阻中焦大鼠無氧酵解相關(guān)因子的變化造模后,模型組大鼠肝臟組織中己糖激酶、丙酮酸激酶、磷酸果糖激酶-1、2,6-雙磷酸果糖含量較空白組均降低或呈降低趨勢(shì);與模型組比較,自然恢復(fù)組肝臟組織己糖激酶、丙酮酸激酶、磷酸果糖激酶-1、2,6-雙磷酸果糖含量均升高,其中丙酮酸激酶、磷酸果糖激酶-1、2,6-雙磷酸果糖自然恢復(fù)組含量高于空白組。平胃散干預(yù)后,肝臟組織己糖激酶含量降低且與給藥劑量大小呈負(fù)相關(guān),而丙酮酸激酶、磷酸果糖激酶-1、2,6-雙磷酸果糖自然恢復(fù)組含量升高,且水平高于空白組;藿香正氣散干預(yù)后,肝臟組織己糖激酶、2,6-雙磷酸果糖含量升高,且水平高于空白組,丙酮酸激酶、磷酸果糖激酶-1含量降低。4.2濕阻中焦大鼠乳酸循環(huán)相關(guān)因子的變化造模后,與空白組相比,模型組大鼠肝臟和肌肉當(dāng)中的乳酸含量升高,血清當(dāng)中的乳酸含量降低;肌肉組織中丙酮酸和乳酸脫氫酶含量降低,肝臟組織中乳酸脫氫酶含量降低;與模型組比較,自然恢復(fù)組肌肉組織中丙酮酸、乳酸脫氫酶、血清中乳酸及肝臟組織中乳酸脫氫酶含量均升高,肝臟組織和肌肉組織中乳酸含量均降低,其中肝臟組織和肌肉組織中乳酸脫氫酶含量高于空白組,肌肉組織中乳酸含量低于空白組水平。經(jīng)平胃散干預(yù)后,與模型組比較,肝臟和血清中的乳酸含量升高,肌肉中的乳酸含量、丙酮酸含量均降低,肝臟與肌肉組織中乳酸脫氫酶含量升高;經(jīng)藿香正氣散干預(yù)后,與模型組比較,血清中乳酸含量升高,肝臟、肌肉中乳酸含量降低,肌肉組織丙酮酸含量降低、乳酸脫氫酶含量升高,肝臟組織乳酸脫氫酶含量升高。5.濕阻中焦大鼠糖異生途徑中相關(guān)因子的變化造模后,與空白組相比,模型組大鼠肝臟組織丙酮酸羧化酶含量升高、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶含量降低,葡萄糖-6-磷酸酶含量無明顯變化趨于穩(wěn)定;與模型組比較,自然恢復(fù)組肝臟組織丙酮酸羧化酶、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶含量升高,葡萄糖-6-磷酸酶含量仍無明顯變化。平胃散及藿香正氣散干預(yù)后,肝臟組織丙酮酸羧化酶、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶、葡萄糖-6-磷酸酶含量均升高。實(shí)驗(yàn)結(jié)論:濕阻中焦證模型可以影響肝臟葡萄糖代謝無氧酵解與糖異生的部分相關(guān)因子,這可能是濕阻中焦證導(dǎo)致機(jī)體物質(zhì)代謝與能量代謝失衡的機(jī)制之一;平胃散、藿香正氣散能夠不同程度改善濕阻中焦證模型肝臟葡萄糖代謝無氧酵解與糖異生部分因子的狀態(tài),參與機(jī)體物質(zhì)代謝和能量代謝的輸布與調(diào)控,這可能是脾胃調(diào)控葡萄糖無氧代謝方面的作用靶點(diǎn)及平胃散燥濕和胃、藿香正氣散化濕和中的作用機(jī)制之一。平胃散和藿香正氣散對(duì)濕阻中焦的作用趨勢(shì)一致,但側(cè)重不同。
【圖文】：

在造模箱內(nèi)造模前的大鼠

在造模箱內(nèi)造模后的大鼠
【學(xué)位授予單位】：成都中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R285.5

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2637623