【摘要】：目的:觀察復(fù)方蜥蜴散不同微粒組合劑對人SGC-7901胃癌細(xì)胞增殖、凋亡及對SIRT1、P53蛋白表達(dá)水平的影響,闡明該方干預(yù)胃癌細(xì)胞的作用機(jī)制。方法:160只SPF級雄性SD大鼠隨機(jī)分8組:生理鹽水組、復(fù)方蜥蜴散80目組、100目組,80目+100目混合高劑量組、中劑量組、低劑量組、華蟾素片組、5-Fu組,每組20只。各組分別予相應(yīng)藥物灌胃或尾靜脈注射1周后,在無菌環(huán)境下腹主動脈取血離心制備含藥血清,將其加入人SGC-7901胃癌細(xì)胞培養(yǎng)預(yù)定時間。MTT法測定經(jīng)復(fù)方蜥蜴散含藥大鼠血清干預(yù)后體外培養(yǎng)SGC-7901細(xì)胞的增殖活性;Annexin V-FITC/PI雙染法和流式細(xì)胞儀檢測復(fù)方蜥蜴散對SGC-7901細(xì)胞凋亡和周期的影響;免疫細(xì)胞化學(xué)法和Western-Blot法檢測復(fù)方蜥蜴散對SGC-7901細(xì)胞SIRT1、P53蛋白表達(dá)水平的影響。采用SPSS20.0 For Windows軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。結(jié)果1.MTT檢測細(xì)胞增殖:與生理鹽水組比較,各藥物血清干預(yù)組細(xì)胞增殖明顯受到抑制(P0.05);與5-Fu組、華蟾素片組比較,各中藥組OD均值減小(P0.05);80目+100目混合組的OD值小于80目組、100目組(P0.05);各混合組之間相互比較,以80目+100目混合高劑量組效果最優(yōu)(P0.05)。2.Annexin V-FITC/PI雙染法對細(xì)胞凋亡的影響:與生理鹽水組比較,各藥物血清干預(yù)組細(xì)胞總凋亡率明顯增加(P0.05);各中藥組細(xì)胞總凋亡率大于5-Fu組、華蟾素片組(P0.05);80目+100目混合組的總凋亡率大于80目組、100目組(P0.05);各混合組相互比較,以80目+100目混合高劑量組細(xì)胞總凋亡率最高(P0.05)。3.流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期:與生理鹽水組相比,各藥物血清干預(yù)組處于G_1期細(xì)胞的比例顯著增多(P0.05);各中藥組G_1期細(xì)胞的比例大于華蟾素片組、5-Fu組(P0.05);80目+100目混合組G_1期細(xì)胞的比例大于80目組、100目組(P0.05);各混合組之間比較,以80目+100目混合高劑量組G_1期細(xì)胞的比例最大(P0.05)。4.免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測人SGC-7901胃癌細(xì)胞SIRT1、P53表達(dá):與生理鹽水組比較,各含藥血清組中SIRT1、P53蛋白的陽性表達(dá)均有不同程度降低(P0.05);各中藥組SIRT1、P53蛋白的陽性表達(dá)均低于華蟾素片組、5-Fu組(P0.05);80目+100目混合組SIRT1、P53蛋白的陽性表達(dá)低于80目組、100目組(P0.05);各混合組比較,SIRT1、P53蛋白的陽性表達(dá)以80+100目高劑量組最少(P0.05)。5.Western-Blot檢測人SGC-7901胃癌細(xì)胞SIRT1、P53表達(dá)水平:與生理鹽水組比較,各含藥血清組中SIRT1、P53的灰度值均有不同程度降低(P0.05);各中藥組SIRT1、P53的灰度值均低于華蟾素片組、5-Fu組(P0.05);80目+100目混合組SIRT1、P53的灰度值低于80目組、100目組(P0.05);各混合組比較,SIRT1、P53的灰度值以80目+100目高劑量組最低(P0.05)。結(jié)論1.復(fù)方蜥蜴散不同微粒組合劑能夠抑制人SGC-7901胃癌細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。2.復(fù)方蜥蜴散不同微粒組合劑能夠促進(jìn)人SGC-7901胃癌細(xì)胞周期停滯,并且將細(xì)胞阻滯在G_1期。3.復(fù)方蜥蜴散不同微粒組合劑能夠降低SIRT1、P53蛋白表達(dá),通過抑制SIRT1介導(dǎo)的P53信號通路進(jìn)而阻斷癌變,發(fā)揮抑制腫瘤增長作用。
【圖文】：

組別 總凋亡率（%）生理鹽水組 7.9±1.235-Fu 組 15.3±1.45*華蟾素片組 18.1±2.32*80 目組 24.3±2.51*△100 目組 24.3±2.11*△80 目+100 目低劑量組 27.3±2.42*△▲80 目+100 目中劑量組 30.3±1.97*△▲80 目+100 目高劑量組 35.7±3.98*△▲□注：*與生理鹽水組比較，*P<0.05；△與 5-Fu 組、華蟾素片組比較，△P<0.05；▲與 80 目組、100 目組比較<0.05；□各混合組之間比較，□P<0.05。

組別 G1期比例生理鹽水組 50.4±4.245-Fu 組 59.51±3.87*華蟾素片組 60.36±6.21*80 目組 65.44±6.15*△100 目組 65.24±8.76*△80 目+100 目低劑量組 67.69±6.19*△▲80 目+100 目中劑量組 69.3±5.22*△▲80 目+100 目高劑量組 73.32±2.96*△▲□注：*與生理鹽水組比較，*P<0.05；△與 5-Fu 組、華蟾素片組比較，△P<0.05；▲與 80 目組、100 目組比較.05；□各混合組之間比較，□P<0.05。
【學(xué)位授予單位】：寧夏醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R285.5

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