發(fā)布時(shí)間：2020-04-18 10:39

【摘要】：目的:我們前期的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明平堂五號(hào)膠囊能夠改善肝臟脂質(zhì)代謝,但是其機(jī)制尚不明確。有人研究證實(shí)自噬在非酒精性脂肪肝病的治療中起著重要作用,因此本課題重點(diǎn)通過(guò)觀察平堂五號(hào)膠囊對(duì)非酒精性脂肪肝細(xì)胞模型的干預(yù),兼以通過(guò)觀察平堂五號(hào)膠囊對(duì)非酒精性脂肪肝動(dòng)物模型的干預(yù),探究平堂五號(hào)膠囊是否能通過(guò)增強(qiáng)自噬治療非酒精性脂肪肝病。方法:體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn):將HepG2細(xì)胞實(shí)驗(yàn)分為五組,第一組為對(duì)照組,其余四組用0.25mM的棕櫚酸(PA)誘導(dǎo),第二組為模型組,剩下組分別加入平堂五號(hào)膠囊含藥血清、平堂五號(hào)膠囊含藥血清+3-MA、雷帕霉素。培育72h后分別進(jìn)行相關(guān)檢測(cè):甘油三酯含量的檢測(cè)、油紅O染色;Western Blot檢測(cè)自噬相關(guān)蛋白LC3、P62、Beclin-1;透射電鏡觀察細(xì)胞自噬體;PCR檢測(cè)各組細(xì)胞炎癥因子IL-1β、iNOS、TNF-α基因及自噬基因Beclin-1、P62表達(dá)水平;試劑盒檢測(cè)各組細(xì)胞氧化應(yīng)激產(chǎn)物SOD、GSH、MDA。體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn):將小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后,隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組及給藥組,每組各5只:對(duì)照組予正常飼料喂養(yǎng),模型組和給藥組給予60%高脂飼料喂養(yǎng),兩周后開(kāi)始進(jìn)行藥物干預(yù)處理,正常組和模型組小鼠同時(shí)予生理鹽水灌胃,給藥組予平堂五號(hào)膠囊灌胃,10周后取材。用試劑盒測(cè)定小鼠血液TC和TG含量;Western Blot檢測(cè)各組小鼠肝臟組織自噬蛋白Beclin-1、P62的表達(dá)情況;PCR檢測(cè)各組小鼠肝臟組織炎癥因子IL-1β、COX-2、iNOS、TNF-α基因和自噬基因P62、Beclin-1的表達(dá)水平。結(jié)果:體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn):與對(duì)照組相比,模型組HepG2細(xì)胞甘油三酯含量增加,氧化應(yīng)激與炎癥反應(yīng)活躍,自噬受到抑制;與模型組相比,平堂五號(hào)膠囊組HepG2細(xì)胞脂質(zhì)堆積、氧化應(yīng)激與炎癥反應(yīng)均得到緩解,自噬增強(qiáng);當(dāng)在平堂五號(hào)膠囊含藥血清中加了3-MA后,其治療非酒精性脂肪肝的效果受到抑制。體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn):與對(duì)照組相比,模型組小鼠血液TC和TG水平升高,肝臟組織炎癥反應(yīng)增強(qiáng),其自噬受到抑制;與模型組相比,平堂五號(hào)膠囊組小鼠血液TC和TG水平降低,肝臟組織炎癥反應(yīng)減輕,其自噬水平上調(diào)。結(jié)論:平堂五號(hào)膠囊能通過(guò)增強(qiáng)自噬而降低肝臟細(xì)胞內(nèi)的甘油三脂含量、減輕氧化應(yīng)激反應(yīng)與炎癥反應(yīng),從而治療非酒精性脂肪肝。
【學(xué)位授予單位】：福建中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R285.5

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本文編號(hào)：2632010