發(fā)布時間：2020-04-13 03:05

【摘要】：目的探討不同濃度的槐耳清膏對人早幼粒細胞白血病HL-60細胞株的增殖、凋亡的影響。方法將人早幼粒白血病細胞株HL-60培養(yǎng)至對數(shù)生長期,以不同濃度槐耳清膏(0mg/ml、2mg/ml、4mg/ml、8mg/ml、16mg/ml)分別培養(yǎng)HL-60細胞24h,48h和72h,0mg/ml為對照組,2mg/ml、4mg/ml、8mg/ml、16mg/ml為實驗組,收集各分組的細胞,臺盼藍染色后進行細胞計數(shù)初步判讀槐耳清膏對HL-60細胞增殖的影響;采用CCK-8細胞增殖活性檢測法檢測上述濃度槐耳清膏培養(yǎng)細胞24h,48h和72h后的吸光度,分析槐耳清膏對HL-60細胞的增殖抑制作用;應用Annexin V-FITC/PI雙染流式細胞術檢測分析槐耳清膏對HL-60細胞凋亡的影響。結(jié)果1.在倒置顯微鏡下觀察加入槐耳清膏培養(yǎng)48h后,發(fā)現(xiàn)隨著藥物濃度的升高,作用時間的延長,HL-60細胞形態(tài)發(fā)生變化,細胞密度下降,折光性減低,胞體變小,細胞皺縮、破裂。2.通過細胞計數(shù)方法,不同濃度的槐耳清膏(2、4、8和16 mg/ml)分別作用于HL-60細胞24h、48h和72h后,實驗組除2mg/ml組在48小時外,其余各槐耳清膏濃度組HL-60細胞數(shù)在各個時間均較對照組相應時間的細胞數(shù)減少,變化具有統(tǒng)計學差異(P0.05)。3.CCK-8增殖活性檢測實驗結(jié)果顯示,不同濃度的槐耳清膏(2、4、8和16mg/ml),對HL-60細胞的抑制率與陰性對照組相比,均有顯著性差異(P0.001)。在一定濃度范圍內(nèi)(2-8mg/ml),隨著藥物濃度的增加,作用時間的延長,抑制率明顯升高。16mg/ml槐耳清膏組48小時與72小時的抑制率相比,結(jié)果沒有統(tǒng)計學意義(P0.05)。4.Annexin V-FITC/PI雙染流式細胞術分析研究槐耳清膏對HL-60細胞誘導凋亡的結(jié)果顯示,不同濃度(2、4、8和16 mg/ml)的槐耳清膏分別作用于HL-60細胞24h,48h和72h,細胞凋亡率高于對照組,有統(tǒng)計學意義(P0.01)。培養(yǎng)時間在24h和48h時間點,細胞凋亡率隨著藥物濃度的增加,凋亡率逐漸升高。當培養(yǎng)時間達到72小時,各不同濃度實驗組凋亡率與對照組相比,細胞凋亡率均增加,統(tǒng)計學有差異;但各不同濃度組實驗組之間兩兩比較,結(jié)果均無統(tǒng)計學差異(P=0.0784)結(jié)論1.不同濃度的槐耳清膏(2、4、8和16 mg/ml),可抑制HL-60細胞增殖,在一定濃度范圍內(nèi)(2-8mg/ml),隨著藥物濃度的增加,作用時間的延長,抑制率逐漸升高。2.不同濃度槐耳清膏(2、4、8和16 mg/ml)對HL-60細胞有誘導凋亡作用,低濃度組(2mg/ml和4mg/ml)隨著時間的延長,凋亡率呈線性升高。高濃度組(8mg/ml和16mg/ml),其48小時的細胞凋亡率較24小時的凋亡率明顯升高,72小時的凋亡率較48小時組下降。3.槐耳清膏可在體外抑制HL-60細胞的增殖,并促進其凋亡。
【學位授予單位】：青島大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R285

【參考文獻】

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本文編號：2625508