【摘要】：目的探討不同濃度的槐耳清膏對(duì)人早幼粒細(xì)胞白血病HL-60細(xì)胞株的增殖、凋亡的影響。方法將人早幼粒白血病細(xì)胞株HL-60培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,以不同濃度槐耳清膏(0mg/ml、2mg/ml、4mg/ml、8mg/ml、16mg/ml)分別培養(yǎng)HL-60細(xì)胞24h,48h和72h,0mg/ml為對(duì)照組,2mg/ml、4mg/ml、8mg/ml、16mg/ml為實(shí)驗(yàn)組,收集各分組的細(xì)胞,臺(tái)盼藍(lán)染色后進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)初步判讀槐耳清膏對(duì)HL-60細(xì)胞增殖的影響;采用CCK-8細(xì)胞增殖活性檢測(cè)法檢測(cè)上述濃度槐耳清膏培養(yǎng)細(xì)胞24h,48h和72h后的吸光度,分析槐耳清膏對(duì)HL-60細(xì)胞的增殖抑制作用;應(yīng)用Annexin V-FITC/PI雙染流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)分析槐耳清膏對(duì)HL-60細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果1.在倒置顯微鏡下觀察加入槐耳清膏培養(yǎng)48h后,發(fā)現(xiàn)隨著藥物濃度的升高,作用時(shí)間的延長(zhǎng),HL-60細(xì)胞形態(tài)發(fā)生變化,細(xì)胞密度下降,折光性減低,胞體變小,細(xì)胞皺縮、破裂。2.通過細(xì)胞計(jì)數(shù)方法,不同濃度的槐耳清膏(2、4、8和16 mg/ml)分別作用于HL-60細(xì)胞24h、48h和72h后,實(shí)驗(yàn)組除2mg/ml組在48小時(shí)外,其余各槐耳清膏濃度組HL-60細(xì)胞數(shù)在各個(gè)時(shí)間均較對(duì)照組相應(yīng)時(shí)間的細(xì)胞數(shù)減少,變化具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。3.CCK-8增殖活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,不同濃度的槐耳清膏(2、4、8和16mg/ml),對(duì)HL-60細(xì)胞的抑制率與陰性對(duì)照組相比,均有顯著性差異(P0.001)。在一定濃度范圍內(nèi)(2-8mg/ml),隨著藥物濃度的增加,作用時(shí)間的延長(zhǎng),抑制率明顯升高。16mg/ml槐耳清膏組48小時(shí)與72小時(shí)的抑制率相比,結(jié)果沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4.Annexin V-FITC/PI雙染流式細(xì)胞術(shù)分析研究槐耳清膏對(duì)HL-60細(xì)胞誘導(dǎo)凋亡的結(jié)果顯示,不同濃度(2、4、8和16 mg/ml)的槐耳清膏分別作用于HL-60細(xì)胞24h,48h和72h,細(xì)胞凋亡率高于對(duì)照組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。培養(yǎng)時(shí)間在24h和48h時(shí)間點(diǎn),細(xì)胞凋亡率隨著藥物濃度的增加,凋亡率逐漸升高。當(dāng)培養(yǎng)時(shí)間達(dá)到72小時(shí),各不同濃度實(shí)驗(yàn)組凋亡率與對(duì)照組相比,細(xì)胞凋亡率均增加,統(tǒng)計(jì)學(xué)有差異;但各不同濃度組實(shí)驗(yàn)組之間兩兩比較,結(jié)果均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.0784)結(jié)論1.不同濃度的槐耳清膏(2、4、8和16 mg/ml),可抑制HL-60細(xì)胞增殖,在一定濃度范圍內(nèi)(2-8mg/ml),隨著藥物濃度的增加,作用時(shí)間的延長(zhǎng),抑制率逐漸升高。2.不同濃度槐耳清膏(2、4、8和16 mg/ml)對(duì)HL-60細(xì)胞有誘導(dǎo)凋亡作用,低濃度組(2mg/ml和4mg/ml)隨著時(shí)間的延長(zhǎng),凋亡率呈線性升高。高濃度組(8mg/ml和16mg/ml),其48小時(shí)的細(xì)胞凋亡率較24小時(shí)的凋亡率明顯升高,72小時(shí)的凋亡率較48小時(shí)組下降。3.槐耳清膏可在體外抑制HL-60細(xì)胞的增殖,并促進(jìn)其凋亡。
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R285

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2625508