發(fā)布時間：2020-04-13 01:32

【摘要】：目的補骨脂-肉豆蔻藥對為中醫(yī)臨床常用藥對,兩藥合用具有溫腎暖脾,澀腸止瀉之功效。本課題以補骨脂-肉豆蔻藥對為研究對象,建立補骨脂-肉豆蔻藥對含藥血清指紋圖譜,探討藥效物質(zhì)基礎(chǔ);采用超高效液相色譜-串聯(lián)四極桿飛行時間質(zhì)譜(UPLC-Q-TOF/MS)技術(shù)快速分析補骨脂-肉豆蔻藥對配伍對移行成分的影響;采用UPLC-MS/MS技術(shù)探究口服補骨脂-肉豆蔻藥對配伍前后對指標(biāo)成分藥物動力學(xué)過程的影響。方法1.對20只SD大鼠分別灌胃10個不同批次的補骨脂-肉豆蔻藥對提取物,采用UPLC法比較體外供試品、含藥血清和空白血清指紋圖譜,分析其入血成分。2.建立超高效液相色譜-串聯(lián)四極桿飛行時間質(zhì)譜(UPLC-Q-TOF/MS)技術(shù)快速分析補骨脂-肉豆蔻藥對提取物在大鼠體內(nèi)移行成分,并結(jié)合Peakview軟件進(jìn)行分析。3.將36只SD大鼠隨機分為三組(A組、B組、C組)并分別灌胃補骨脂提取液、補骨脂-肉豆蔻藥對提取液、肉豆蔻提取液,于不同時間點采集血漿樣品。采用UPLC-MS/MS多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)定量分析,以氯霉素為內(nèi)標(biāo)物在正離子模式下建立血漿中補骨脂素、異補骨脂素、補骨脂酚及氫二異丁香酚藥物濃度的測定方法,研究口服補骨脂-肉豆蔻藥對配伍前后指標(biāo)成分的藥物動力學(xué)過程。結(jié)果1.建立10個不同批次的補骨脂-肉豆蔻藥對的UPLC血清指紋圖譜(相似度0.90),標(biāo)出13個共有峰(相似度均在0.90以上),其中10個峰來源于體外供試品中原型成分,3個峰為代謝產(chǎn)物。2.補骨脂-肉豆蔻藥對配伍前后移行成分結(jié)果如下:與體外補骨脂提取物相比,有17個原型成分入血;與體外補骨脂-肉豆蔻藥對提取物相比,有28個原型成分入血;與肉豆蔻藥材提取物相比,有6個原型成分入血。3.采用UPLC-MS/MS多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)定量分析,血漿樣品中補骨脂素、異補骨脂素、補骨脂酚和去氫二異丁香酚分別在39.25~0.098125μg/m L、33.75~0.084375μg/m L、18.75~0.046875μg/m L、2.2~0.11μg/m L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,精密度、穩(wěn)定性的實驗結(jié)果表明,該類成分的血藥濃度測定方法穩(wěn)定可靠。四種指標(biāo)成分吸收迅速,補骨脂素和異補骨脂素具有雙峰現(xiàn)象,配伍后Tmax明顯縮短,Cmax和AUC0-t均有不同程度的增加。結(jié)論采用血清藥物化學(xué)方法,建立補骨脂-肉豆蔻藥對血清指紋圖譜,反映補骨脂-肉豆蔻藥對口服給藥吸收入血情況,并采用UPLC-Q-TOF/MS技術(shù)對補骨脂-肉豆蔻藥對配伍前后血清移行成分進(jìn)行定性分析,為其體內(nèi)藥效物質(zhì)研究奠定基礎(chǔ)。采用UPLC-MS/MS技術(shù)考察配伍對補骨脂-肉豆蔻藥對指標(biāo)成分動力學(xué)參數(shù)的影響,根據(jù)DAS 2.0計算所得藥物動力學(xué)參數(shù)在配伍前后均有不同程度的差異,說明補骨脂和肉豆蔻配伍能影響指標(biāo)成分在體內(nèi)的藥動學(xué)過程,使分布更廣泛,代謝消除更快。
【圖文】：

E圖 1-1 不同時間點補骨脂-肉豆蔻藥對血清的 UPLC 圖譜A：空白血清樣品；B：1h 血清樣品；C：2h 血清樣品；D：3h 血清樣品；E：4h 清樣品ig.1-1 The different time points of Drug-couple Psoralea corylifoLia L-Myristica fragrants Hoon serum Chromatogram of UPLC：blank serum sample；B：serum sample at 1 hour；C：serum sample at 2 hour；D：serum samat 3 hour；E：serum sample at 4 hour.5 含藥血清樣品處理方法的篩選[10].5.1 10%三氯乙酸沉淀法取含藥血清 400 μL 至 5 mL EP 管中，加入 800 μL 10%三氯乙酸，渦旋 1 mi

實驗一 補骨脂-肉豆蔻藥對含藥血清指紋圖譜研究溶，移置 5 mL EP 管中，渦旋混勻，再次 12 000 r/min 條件下離心 10 min，，上清液為含藥血清供試品。將處理好的空白血清樣品及給藥后血清樣品各 200進(jìn)行 UPLC 分析。2.7 血清指紋圖譜方法學(xué)的考察2.7.1 精密度考察取含藥血清樣品 S12 μL，按“2.1”項下色譜條件，連續(xù)進(jìn)樣 6 次，以考儀器精密度，記錄得到的圖譜圖，經(jīng)“中藥特色指紋圖譜相似度評價軟件（2004版”計算，6 張圖譜的相似度均 ≥ 0.934，見表 1-2，表明整個檢測系統(tǒng)的精密良好。
【學(xué)位授予單位】：安徽中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R284.1;R285.5

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 代冬梅,賈天柱,徐洪亮,相宇;肉豆蔻炮制及現(xiàn)代研究進(jìn)展[J];中成藥;2005年12期

2 田偉剛;;肉豆蔻提取物的藥理作用[J];中國社區(qū)醫(yī)師(醫(yī)學(xué)專業(yè));2012年16期

3 張愛武;劉樂樂;何學(xué)敏;馬瑞蓮;;肉豆蔻化學(xué)成分與藥理活性的研究進(jìn)展[J];內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2014年01期

4 翁繩美;;13-甲基肉豆蔻酸對小鼠的調(diào)節(jié)血糖作用[J];海峽藥學(xué);2005年06期

5 權(quán)美平;;13-甲基肉豆蔻酸抗腫瘤機制研究進(jìn)展[J];動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2013年09期

6 方愛娟;徐凱節(jié);;肉豆蔻的化學(xué)成分及生物活性研究進(jìn)展[J];中國藥業(yè);2013年15期

7 余得平;不同濃度乙醇提取補骨脂的比較[J];時珍國醫(yī)國藥;2000年07期

8 李安娟;補骨脂藥材及其制劑中補骨脂素與異補骨脂素的含量測定方法研究綜述[J];中國藥品標(biāo)準(zhǔn);2002年02期

9 范菊娣;從補骨脂中分離鑒定補骨脂素和異補骨脂素[J];貴陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2003年02期

10 劉志林,張相年,趙樹進(jìn),周日笑;補骨脂中補骨脂素的提取及純化[J];第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2005年06期

相關(guān)會議論文 前10條

1 周秋霞;袁曉龍;岳淑梅;;基于文獻(xiàn)的補骨脂注射液研究現(xiàn)狀分析[A];2013年中國藥學(xué)會藥事管理專業(yè)委員會年會暨“醫(yī)藥安全與科學(xué)發(fā)展”學(xué)術(shù)論壇論文集（下冊）[C];2013年

2 江芳;周昕睿;王旗;張寶旭;;補骨脂酚及其與補骨脂素聯(lián)合的腎細(xì)胞毒性[A];中國毒理學(xué)會第五次全國學(xué)術(shù)大會論文集[C];2009年

3 項歡;;中藥補骨脂研究現(xiàn)狀與前景[A];2010年中國藥學(xué)大會暨第十屆中國藥師周論文集[C];2010年

4 李凱;;補骨脂炮制原理研究進(jìn)展[A];2010中藥炮制技術(shù)、學(xué)術(shù)交流暨產(chǎn)業(yè)發(fā)展高峰論壇論文集[C];2010年

5 夏阿林;吳海龍;朱紹華;韓清娟;張艷;景明;俞汝勤;;二階校正新方法結(jié)合激發(fā)-發(fā)射矩陣熒光用于定量測定人血漿中的補骨脂素[A];第九屆全國計算（機）化學(xué)學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2007年

6 孟祥松;簡冬明;王平軍;蔣磊;薛媛春;王玉;;補骨脂2010版藥典質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)探究[A];2013年中國藥學(xué)大會暨第十三屆中國藥師周論文集[C];2013年

7 譚生建;王琰;劉剛;郭代紅;韓晉;閔慶旺;;補骨脂酊中補骨脂素和異補骨脂素的高效液相色譜測定法[A];全國中成藥學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];1994年

8 修彥鳳;施貝;唐昌娟;張丹;;炮制對補骨脂在大鼠體內(nèi)藥動學(xué)特性的影響[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會中藥炮制分會2011年學(xué)術(shù)年會論文集[C];2011年

9 丁黎艷;郭晏華;;HPLC法同時測定補骨脂中三種成分的含量[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會中藥炮制分會2011年學(xué)術(shù)年會論文集[C];2011年

10 施貝;張丹;唐昌娟;修彥鳳;;補骨脂鹽炙前后外觀性狀和內(nèi)在成分的比較[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會中藥炮制分會2011年學(xué)術(shù)年會論文集[C];2011年

相關(guān)重要報紙文章 前8條

1 常怡勇;補骨脂臨床新用[N];大眾衛(wèi)生報;2005年

2 常怡勇;補骨脂臨床新用[N];中國中醫(yī)藥報;2002年

3 高秉諤 焦愛蘭;補骨脂新用[N];中國中醫(yī)藥報;2002年

4 葉水泉;腰腎虛損妙用補骨脂[N];大眾衛(wèi)生報;2004年

5 葉水泉（主管中藥師）;補腎壯陽的補骨脂[N];上海中醫(yī)藥報;2006年

6 朱冬;補腎健骨補骨脂[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2006年

7 常怡勇;補骨脂臨床新用[N];中國醫(yī)藥報;2002年

8 蔡宇 唐鳳德;補骨脂素能逆轉(zhuǎn)白血病細(xì)胞MDR[N];中國醫(yī)藥報;2005年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前6條

1 郭晏華;補骨脂炮制原理研究[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2007年

2 郭江寧;補骨脂抗氧化與抗癌活性成分的研究[D];沈陽藥科大學(xué);2004年

3 陳楠楠;中藥補骨脂素在自體骨髓移植中的應(yīng)用[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2008年

4 楊榮平;補骨質(zhì)緩釋片的藥學(xué)研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2005年

5 沈麗霞;槲皮素和補骨脂素對人乳腺癌細(xì)胞株雌激素樣作用的實驗研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2008年

6 趙建斌;華蟾毒精及補骨脂素類抗癌作用研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);1999年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 徐雙枝;補骨脂—肉豆蔻藥對的血清指紋圖譜和指標(biāo)成分藥物動力學(xué)研究[D];安徽中醫(yī)藥大學(xué);2017年

2 黃海娟;中藥肉豆蔻抗腫瘤活性部位篩選及體外抗腫瘤機制研究[D];青島科技大學(xué);2014年

3 楊曉旭;補骨脂—肉豆蔻藥對醇提部位配伍前后指紋圖譜變化及藥對成分的定性、定量研究[D];安徽中醫(yī)藥大學(xué);2015年

4 張合亮;無花果葉提取物的制備及其抑菌效果研究[D];齊魯工業(yè)大學(xué);2015年

5 蔡浩;單味骨碎補、補骨脂及雙味聯(lián)合防治去勢大鼠骨丟失的實驗研究[D];安徽中醫(yī)藥大學(xué);2015年

6 馬興苗;補骨脂與白蔻仁有效部位的制備及抗腫瘤增效作用研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2013年

7 李明月;補骨脂主要成分對尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶(UGT)抑制的研究[D];遼寧醫(yī)學(xué)院;2015年

8 李啟活;補骨脂素激活MAPK-NF-κB信號通路促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖的研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2016年

9 向軍;3,5-二甲基補骨脂素誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞凋亡的分子機制研究[D];浙江大學(xué);2016年

10 張婷;基于UPLC-Q-TOF/MS技術(shù)的補骨脂-肉豆蔻藥對的研究[D];安徽中醫(yī)藥大學(xué);2016年

本文編號：2625425