【摘要】：許多的藥理研究和大量的臨床研究證實,黃連素具有顯著抗癌的作用。但是關于其抗癌的具體靶點以及機理卻鮮有報道。黃連素的化學結(jié)構(gòu)式與秋水仙堿結(jié)構(gòu)類似,而秋水仙堿的抗癌機理與微管相關。所以,我們利用細胞模型實驗以及移植性腫瘤動物模型實驗來探究黃連素抗癌的具體機理是否與微管相關。首先進行分子對接模擬實驗,探索黃連素和微管的結(jié)合位點。然后利用生物膜干涉儀器、等溫滴定量熱儀為研究手段,檢測到黃連素和微管之間的相互作用。本實驗進一步采用MTT法檢測黃連素對8種腫瘤細胞系存活率的影響,篩選出合適的細胞系、藥物濃度以及時間之后,我們通過電轉(zhuǎn)染質(zhì)粒α-tubulin實驗,用10μg/ml黃連素處理細胞24h和48h之后,在倒置顯微鏡下觀察腫瘤細胞中微管的狀態(tài)。通過western blotting實驗,觀察乙�；摩�-tubulin的表達情況。根據(jù)體外實驗的結(jié)果,又進行了移植性腫瘤動物模型實驗,將6到8周齡的雄性裸鼠分為三組,對照組(生理鹽水)、順鉑組(1mg/kg)、黃連素組(10mg/kg),每組6只,并對裸鼠的體重進行監(jiān)測。在最終處死裸鼠后,對摘取的肝臟、脾臟、腫瘤進行稱量,并對腫瘤進行拍照和對比。研究發(fā)現(xiàn)黃連素和微管能夠在微管Gln8的位點結(jié)合;在8種腫瘤細胞系中,黃連素對表皮鱗癌細胞A431的抑制效果最好,黃連素的濃度在為2μg/ml時,處理48h之后,對A431細胞抑制率達到50%以上;黃連素能夠打亂A431腫瘤細胞中微管的正常聚合和解聚的過程;黃連素促進乙�；摩�-tubulin的高表達,可能具有促進微管穩(wěn)定的作用;黃連素處理組與對照組相比,裸鼠的體重、肝臟以及脾臟沒有顯著性的差異,腫瘤的重量以及腫瘤體積的大小具有減小的趨勢,但是也都沒有顯著性差異。綜上所述,我們得出黃連素通過靶向微管抑制表皮鱗癌A431細胞增殖,并且?guī)缀鯖]有毒副作用。本實驗為黃連素這種中藥的應用開辟更廣的領域,也為相關的類似藥物的抗癌機理研究提供理論參考。
【圖文】：

內(nèi)的其他的蛋白共同組裝成紡錘體以及鞭毛等多種細胞器[19]。它的結(jié)構(gòu)如圖1-1所示。圖1-1微管的結(jié)構(gòu)Fig1-1the structure of the microtubule在正常情況之下，細胞內(nèi)的微管聚合和解聚保持一種循環(huán)動態(tài)平衡，微管在正常的聚合和解聚的平衡動態(tài)的狀態(tài)下，具有維持細胞形態(tài)、細胞有絲分裂的過程，以及細胞營養(yǎng)物質(zhì)的運輸?shù)戎匾恼{(diào)節(jié)功能。細胞的分裂是一種有秩序的和高度可以控制的過程。當細胞進入分裂期時，細胞內(nèi)的微管以兩種形式存在細胞內(nèi)[20]，一種形式是胞質(zhì)微管，另一種則是形成紡錘體的微管。在細胞分裂的前期，細胞內(nèi)的微管會發(fā)生解聚，解聚的微管能夠迅速的聚合成為紡錘體，在細胞有絲分裂過程中，紡錘體會牽引著染色體向細胞的兩極移動，最終它們會進入至兩個子細胞中，即完成了一次細

[20]，然后會在新的細胞內(nèi)重復這樣微管聚合和解聚循環(huán)的動態(tài)平衡。這個過程如圖1-2所示。一旦細胞微管動態(tài)循環(huán)平衡遭到破壞，腫瘤細胞的有絲分裂過程就會被阻滯，進而使腫瘤細胞生長以及增殖受到抑制，進一步誘導其凋亡[21]。圖1-2微管在細胞有絲分裂過程中的作用Fig1-2 The role of microtubules during mitosis很多的研究證實微管是目前醫(yī)學領域的研究熱點之一，，而且是目前開發(fā)抗癌藥物的重要靶點之一。腫瘤細胞區(qū)別于正常細胞的一個非常重要的特點就是可以無限制的
【學位授予單位】：云南農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R285

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 李春明;張穎鵬;劉志剛;;色素上皮衍生因子在A431細胞的表達及對其增殖的影響[J];江西醫(yī)藥;2013年11期

2 陳達民;結(jié)腸和上部直腸的鱗癌和腺鱗癌[J];國外醫(yī)學(消化系疾病分冊);2002年01期

3 董淑曉;訾力;亓健;;原發(fā)性胃鱗癌的臨床病理特點[J];中國臨床醫(yī)生;2011年11期

4 趙鎮(zhèn)清;張熙曾;劉亦庸;;賁門鱗癌[J];中國腫瘤臨床;1987年04期

5 王懷娥,任德印,崔允峰;肺炎樣鱗癌誤診原因探討(附5例報告)[J];醫(yī)學影像學雜志;1994年03期

6 劉建良,周鑫官,張勤;賁門鱗癌的外科治療[J];江蘇醫(yī)藥;1995年08期

7 ;中咽部鱗癌前壁型的治療[J];國外醫(yī)學(耳鼻咽喉科學分冊);1998年01期

8 ;鱗癌中人類乳頭狀瘤病毒的表達及P~(53)突變[J];國外醫(yī)學(耳鼻咽喉科學分冊);1999年01期

9 張地君,許速,徐小珂;表皮內(nèi)鱗癌2例報告[J];皮膚病與性病;1999年01期

10 錢偉明;原發(fā)性附睪鱗癌1例[J];診斷病理學雜志;2002年04期

相關會議論文 前5條

1 胡偉漢;徐韜;伍國號;郭朱明;高遠紅;王芳;蔡修宇;;151例下咽鱗癌的治療與預后[A];2007第六屆全國放射腫瘤學學術年會論文集[C];2007年

2 俞新民;;鱗癌1例[A];2009年浙江省皮膚病學術會議論文匯編[C];2009年

3 高明陽;;頭部鱗癌伴嗜酸性粒細胞增多一例[A];2003中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學術會議論文匯編[C];2003年

4 徐致祥;譚家駒;陳風蘭;司建華;韓建英;;農(nóng)家肥料污染水源誘發(fā)大小鼠前胃鱗癌[A];全國腫瘤流行病學和腫瘤病因?qū)W學術會議論文集[C];2007年

5 李梅嬌;王鵬;符磊;吳偉偉;;伴有多臟器功能損害的老年鱗癌(翻花瘡)患者的處理體會[A];2012全國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學術會議論文匯編[C];2012年

相關重要報紙文章 前2條

1 上海龍華醫(yī)院腫瘤科 王菊勇 副研究員;胃鱗癌的治療[N];上海中醫(yī)藥報;2010年

2 記者 王丹 通訊員 高翠峰;食管鱗癌基因組研究告別“盲人摸象”[N];健康報;2014年

相關博士學位論文 前10條

1 任重;塑料微管氣輔擠出成型理論及實驗研究[D];南昌大學;2017年

2 范虹;TRPC6通道對食管鱗癌的增殖及放療增敏作用的研究[D];復旦大學;2013年

3 王娜娜;RACK1在食管鱗癌預后及進展中的作用及與上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的相關性研究[D];山東大學;2015年

4 孟慧;miR-330-3p和miR-26b在食管鱗癌中的功能及其調(diào)控機制探討[D];第三軍醫(yī)大學;2015年

5 周韶梅;miR-100在食管鱗癌中的調(diào)控作用及機制研究[D];北京工業(yè)大學;2015年

6 曾薇;食管鱗癌中Survivin對NF-κB p65調(diào)控機制的研究[D];新疆醫(yī)科大學;2015年

7 楊宏麗;PRKDC、XRCC4多態(tài)性與中國安陽地區(qū)食管鱗癌發(fā)生風險關聯(lián)性研究[D];山東大學;2015年

8 崔瑤;STAT3對缺氧誘導食管鱗癌上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的調(diào)控作用[D];鄭州大學;2016年

9 楊璇;miR-1207-5p對食管鱗癌發(fā)生的影響[D];鄭州大學;2016年

10 江亞南;T-LAK細胞來源的蛋白激酶(TOPK)在食管鱗癌增殖中的功能研究[D];鄭州大學;2016年

相關碩士學位論文 前10條

1 劉菲菲;黃連素靶向微管抑制表皮鱗癌A431細胞增殖的作用及機理研究[D];云南農(nóng)業(yè)大學;2017年

2 翟立廣;姜黃素對皮膚鱗狀細胞癌A431細胞增殖和凋亡的影響[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學院;2015年

3 劉建平;MTA1、VEGF-C在食管鱗癌中的表達及與臨床病理、腫瘤淋巴管生成的關系[D];川北醫(yī)學院;2015年

4 范玉宏;Caveolin-1在食管鱗癌浸潤進展中的作用研究[D];河北醫(yī)科大學;2015年

5 聞朋浩;同期放化療聯(lián)合DC-CIK對Ⅰ~Ⅱ期食管鱗癌的療效分析[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學院;2015年

6 王春麗;食管鱗癌高頻擴增基因IGHMBP2的鑒定及其功能的初步研究[D];安徽醫(yī)科大學;2015年

7 劉嬌;GPRC5A和STAT3在食管鱗癌中的表達及意義[D];鄭州大學;2015年

8 朱毓卉;江蘇省泰興地區(qū)食管癌時空分布特征分析及女性生殖因素研究[D];山東大學;2015年

9 孫智;黏蛋白1在食管鱗癌中的表達及其與臨床病理及預后的關系[D];山東大學;2015年

10 楊蕾;熱休克蛋白HSP32、HSP27在食管鱗癌轉(zhuǎn)移中作用的研究[D];第四軍醫(yī)大學;2015年

本文編號：2625247