【摘要】：目的研究固本防哮飲對(duì)哮喘小鼠IL-33及其信號(hào)通路相關(guān)因子ST2 Caspase3 Caspase7 ERK1/2等表達(dá)的影響,探索固本防哮飲防治哮喘的相關(guān)機(jī)制。方法將24只雌性BALB/C小鼠分為正常組、模型組、中藥組(固本防哮飲組)。以卵清蛋白(OVA)聯(lián)合呼吸道合胞病毒(RSV)構(gòu)建哮喘持續(xù)期小鼠模型。HE染色法觀察各組小鼠肺組織病理變化;ELISA WB qPCR法分別測(cè)定小鼠肺泡灌洗液、血清、肺組織和支氣管中IL-33及其通路中ST2 Caspase3 Caspase7 IL-5 ERK1/2相關(guān)蛋白及mRNA表達(dá)水平。結(jié)果(1)肺組織病理結(jié)果顯示:與正常組相比,模型組小鼠氣道有明顯的杯狀細(xì)胞增生,嗜酸粒細(xì)胞聚集,平滑肌增生等病理改變;而中藥組較模型組小鼠有明顯改善。(2)肺泡灌洗液及血清ELISA結(jié)果顯示,與模型組相比,中藥組小鼠肺泡灌洗液中IL-33蛋白的表達(dá)量明顯降低;中藥組小鼠肺泡灌洗液中sST2蛋白的表達(dá)量較模型組增加(P0.05);小鼠血清中IL-33 sST2蛋白的表達(dá)量三組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。(3)肺組織及支氣管WB結(jié)果顯示:中藥干預(yù)后模型小鼠肺組織中IL-33 ERK1/2蛋白的表達(dá)量較模型組明顯降低(P0.05);肺組織中ST2 Caspase3 Caspase7蛋白的表達(dá)量三組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。中藥干預(yù)后模型小鼠支氣管中IL-33 Caspase3 ERK1/2蛋白的表達(dá)量明顯降低(P0.05);支氣管中Caspase7蛋白的表達(dá)量三組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。(4)肺組織qPCR結(jié)果顯示,中藥組干預(yù)后小鼠肺組織中IL-33 ERK1/2 IL-5 mRNA表達(dá)量明顯低于模型組(P0.05);與正常組相比較模型組ST2 mRNA未見明顯升高(P0.05);與模型組相比中藥組ST2 mRNA明顯升高(P0.05);與正常組相比模型組Caspase7 mRNA較正常組明顯升高(P0.05);但中藥組與模型組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);Caspase3 mRNA比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論(1)固本防哮飲能減輕哮喘小鼠肺部炎癥,改善杯狀細(xì)胞增生、平滑肌增生肥大,抑制嗜酸粒細(xì)胞聚集。說明固本防哮飲能夠改善哮喘小鼠氣道炎癥以及氣道重塑。(2)固本防哮飲干預(yù)后IL-33表達(dá)顯著降低,ERK1/2 IL-5表達(dá)降低,同時(shí)sST2蛋白表達(dá)上調(diào)(競(jìng)爭(zhēng)性抑制IL-33的蛋白活性),提示固本防哮飲防治哮喘的作用機(jī)制可能與其抑制IL-33表達(dá)有關(guān)。(3)固本防哮飲改善哮喘小鼠氣道重塑的作用,可能與其通過抑制IL-33/ERK1/2信號(hào)通路的激活,進(jìn)而抑制細(xì)胞過度修復(fù)有關(guān)。
【圖文】：

和４２ｋＤ，它們有９０％的相似性。ＥＲＫ１／２促進(jìn)某些基因的轉(zhuǎn)錄與表達(dá)，和細(xì)胞的增殖與分化逡逑密切相關(guān)與。最近的研究發(fā)現(xiàn)ＩＬ－３３通過激活ＥＲＫ１／２信號(hào)通誘導(dǎo)加重了哮喘的氣道重塑［４１］。逡逑ＩＬ－３３誘導(dǎo)的信號(hào)通路，如圖２所示。逡逑１４逡逑

圖３技術(shù)路線圖逡逑驗(yàn)材料逡逑實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及中藥制備逡逑（１）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：ＳＰＦ級(jí)ＢＡＬＢ／ｃ雌性小鼠，２４只，４－６周齡，體重１６－１８ｇ，由南大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。逡逑（２）中藥制備：炙黃芪１５ｇ，黨參１０ｇ，白術(shù)１０ｇ，茯苓１０ｇ，qF牡蠣１５ｇ，蟬蛻６６ｇ，辛夷６ｇ，防風(fēng)３ｇ，五味子６ｇ，生甘草３ｇ，３付。購(gòu)于江蘇省中醫(yī)院，經(jīng)南大學(xué)中藥資源產(chǎn)業(yè)化過程協(xié)同創(chuàng)新中心劉圣金副教授鑒定其均為正品。取１０倍藥，浸泡２０分鐘，，煅牡蠣先煎１５分鐘后加入其它中藥，煎煮３０ｍｉｎ后濾出藥液后的中藥加８倍水煎煮３０ｍｉｎ后過濾，合并兩次藥液濃縮至含生藥量３．６ｇ＊ｍＬ，菌試管中，－８０°Ｃ儲(chǔ)存。逡逑１７逡逑
【學(xué)位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R285.5

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1 王寧;王立軍;任筱

本文編號(hào)：2623019