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香菇柄多糖提取和體外抑癌活性的研究

發(fā)布時間:2020-04-10 09:30
【摘要】:香菇(Lentinus edodes)是一種藥食兩用的真菌。香菇多糖具有提高機體免疫功能、降血脂、抗腫瘤、抗衰老、抗病毒等生物活性,且沒有任何毒副作用。香菇柄作為香菇生產(chǎn)中的下腳料被丟棄,造成了極大的資源浪費。為了充分開發(fā)香菇柄的利用價值,并且為香菇柄多糖的工業(yè)生產(chǎn)提供數(shù)據(jù)參考。本文的主要研究結(jié)果和創(chuàng)新點如下:1.對比了香菇柄多糖與香菇蓋多糖的體外抑癌活性。香菇柄也有很好的提取率,說明香菇柄具有良好的多糖提取加工價值;香菇柄與香菇蓋粗多糖對8個離體癌細(xì)胞系HCT116、HT29、KM12L4、SW620、SW480、RKO、H4、HepG2的增殖均有明顯抑制作用,表現(xiàn)出較強的抑癌活性;利用流式細(xì)胞儀研究表明,香菇柄與香菇蓋粗多糖均可抑制HCT116細(xì)胞有絲分裂,使停留在G0/G1期的細(xì)胞比例明顯增加,這可能與其抑癌功能相關(guān);利用實時定量PCR技術(shù),發(fā)現(xiàn)香菇柄、香菇蓋粗多糖對與抗癌機制有關(guān)的基因ATF4的表達(dá)有顯著促進作用,對C-ymc的表達(dá)有抑制作用。在以上試驗中,說明香菇柄多糖同香菇蓋多糖一樣具有較好的開發(fā)價值。2.對比了粗多糖和純化多糖的體外抗氧化和抑癌效果。為了研究香菇柄中的蛋白成分是否具有生物活性,用Sevage法將香菇柄樣品進行脫蛋白處理,得到純化多糖。粗多糖對自由基的清除率高于純化多糖;結(jié)果表明,粗多糖具有更好的體外抗氧化和抑癌效果,開發(fā)粗多糖產(chǎn)品具有更好的應(yīng)用前景。3.通過響應(yīng)面法優(yōu)化了香菇柄多糖的提取工藝。利用響應(yīng)面軟件進行設(shè)計得到17個試驗點。進行響應(yīng)面分析后得到參數(shù)為液料比(mL/g)43:1、浸提溫度79℃、浸提時間124 min,在此條件下多糖的含量為18.66%,所得優(yōu)化條件為大規(guī)模提取香菇柄多糖提供了試驗和理論參考。4.研究了不同提取方法對香菇柄多糖的體外抗氧化活性影響。冷凍干燥得到的多糖比噴霧干燥得到的多糖具有更強的清除自由基的能力,說明冷凍干燥法更有利于多糖抗氧化活性的保持;浸提液要比醇沉物多糖具有更強的清除自由基的能力,說明浸提液有更好的體外抗氧化活性。在考慮藥效和經(jīng)濟成本平衡的前提下,應(yīng)選擇醇沉冷凍干燥法進行多糖提取。5.研究了儲藏時間長短對香菇柄粗多糖抗氧化和抑癌活性的影響。將新提取的香菇柄粗多糖樣品在-20℃保存40 d,香菇柄粗多糖仍具有良好的抗氧化活性。因加工簡單,生產(chǎn)成本低,抗氧化效果良好,使香菇菇柄粗多糖具有良好的開發(fā)前景。將新提取的香菇柄粗多糖液保存于-20℃,檢測了40 d內(nèi)香菇柄粗多糖對人肝癌SMMC-7721細(xì)胞增殖的抑制作用。如以液體狀態(tài)儲存香菇柄粗多糖,儲藏溫度應(yīng)為低于-20℃,儲藏時間應(yīng)小于30 d。
【學(xué)位授予單位】:河北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:R284.2;R285

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號:2622060

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