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巴戟天抗抑郁和抗疲勞的活性成分研究

發(fā)布時間:2020-04-09 03:08
【摘要】:巴戟天(Morinda officinalis How)是茜草科巴戟屬植物巴戟天的干燥根,與益智仁、檳榔、砂仁并成為我國“四大南藥”。具有治療風(fēng)濕疼痛、補(bǔ)腎虛、降血壓和強(qiáng)筋健骨等功能。目前,對其研究主要集中在粗提物的功效上,對功效成分的研究相對不足。為了加強(qiáng)對巴戟天的深加工及其生物活性的研究,本文對其抗抑郁和抗疲勞的功能及活性成分進(jìn)行研究。1.巴戟天粉碎過篩后經(jīng)75%乙醇重復(fù)提取二次,減壓濃縮得到巴戟天醇提物,得率為21.7%;抽濾經(jīng)去離子水提取二次,減壓濃縮得到巴戟天水提物,用95%乙醇醇沉攪拌,靜置過夜,得到巴戟天水提醇沉物和醇溶物,得率分別為12.3%和8.6%。經(jīng)抗抑郁和抗疲勞小鼠行為學(xué)模型對巴戟天醇提物、巴戟天水提醇沉物和醇溶物進(jìn)行活性檢測(小鼠灌胃劑量為1.5 g/Kg/d,灌胃體積是0.1 mL/10 g/只)。結(jié)果顯示巴戟天水提醇沉物具有抗抑郁的作用,巴戟天醇提物具有抗疲勞的作用。2.巴戟天水提醇沉物依次經(jīng)Hw-55F和Hw-40凝膠色譜柱分離,通過小鼠抗抑郁行為學(xué)模型實驗檢測(小鼠灌胃劑量為0.8 g/Kg/d,灌胃體積是0.1 mL/10 g/只),經(jīng)Hw-40凝膠柱分離得到的組分D-2抗抑郁活性最顯著。通過測定各組小鼠大腦海馬區(qū)和紋狀體中多巴胺濃度,具有抗抑郁作用的D-2組小鼠大腦海馬區(qū)和紋狀體中DA濃度均顯著升高。組分D-2經(jīng)過ODS-AQ色譜柱純化,得到4個單體化合物,經(jīng)NMR結(jié)構(gòu)鑒定,分別為:耐斯糖(1)、菊粉五糖(2)、菊粉六糖(3)、菊粉七糖(4)。3.比較灌胃和腹腔注射兩種給藥方式(小鼠灌胃劑量為0.8 g/Kg/d,灌胃體積是0.1mL/10 g/只;小鼠腹腔注射劑量為0.8 g/Kg/d,小鼠的灌胃體積是0.1 mL/10 g/只),實驗結(jié)果顯示巴戟天組分D-2通過灌胃經(jīng)口給藥的方式發(fā)揮抗抑郁作用,而通過腹腔注射沒有發(fā)揮出抗抑郁的作用。4.巴戟天醇提物依次經(jīng)過大孔樹脂AB-8柱、MCI柱進(jìn)行分離,通過小鼠行為學(xué)疲勞模型實驗(小鼠灌胃劑量為1.0 g/Kg/d,灌胃體積是0.1 mL/10 g/只),結(jié)果表明MCI柱分離得到組分E-1具有抗疲勞的作用。將MCI柱水洗脫物E-1反復(fù)上樣至ODS-A和ODS-AQ色譜柱進(jìn)一步純化,最終分離得到5、6、7三個化合物,經(jīng)NMR結(jié)構(gòu)鑒定,分別為4-羧基-7-羥基-8-羥甲基-3,6-環(huán)戊烯環(huán)烯醚萜苷(5)、4-乙;-8-羥甲基-3,7-環(huán)戊烯環(huán)烯醚萜苷(6)、4-羧基-7-羥基-8-羥甲基-10-乙;-3,6-環(huán)戊烯環(huán)烯醚萜苷(7)。且本文得到的5、6、7三個環(huán)烯醚萜類化合物是首次從巴戟天中分離得到的。
【圖文】:

巴戟天


1 巴戟天概述中藥巴戟天(Morinda officinalis How)又稱黑藤鉆、雞眼藤、三角藤,是茜草屬雙子葉植物巴戟天的干燥根,味甘、微澀,性微溫,是我國四大南藥之一,主于四川、江西、海南、福建和廣東、廣西等地區(qū)[1-2]。《中國藥典》和中藥典籍《草經(jīng)》歷代本草均記載巴戟天常用于強(qiáng)筋健骨、治療風(fēng)濕疼痛、滋補(bǔ)腎虛和緩解[3-6]。臨床醫(yī)學(xué)上還常用巴戟天治療小便失禁、陽痿、早泄、不孕不育等病癥[7-10]近三十年來,巴戟天不僅在國內(nèi)廣泛使用,還在日本、韓國等國家常作藥用,研究者深入研究巴戟天的化學(xué)成分和藥理活性,其主要成分包括:糖類、環(huán)烯醚萜醌類、生物堿類、黃酮類、氨基酸及微量元素等[11-18]。藥理活性研究發(fā)現(xiàn)巴戟天統(tǒng)中醫(yī)學(xué)提及強(qiáng)筋健骨、治療風(fēng)濕疼痛、滋補(bǔ)腎虛和緩解疲勞等[19-22]作用之外,增強(qiáng)免疫、抗骨質(zhì)疏松、抗疲勞、抗抑郁和抗腫瘤等功效[23-27],開展對巴戟天的并將其制成安全性更高、效果更顯著的保健品、藥品順應(yīng)了時代的要求。近年來不少中藥企業(yè)研究團(tuán)隊展開了對巴戟天中活性物質(zhì)的分析研究和應(yīng)用。由此可見對中藥功能性成分的研究及其深加工,實現(xiàn)中藥材作為天然產(chǎn)物的優(yōu)勢向產(chǎn)品轉(zhuǎn)將是我國農(nóng)業(yè)發(fā)展的新契機(jī),將成為我國經(jīng)濟(jì)新的增長點,促進(jìn)國名經(jīng)濟(jì)發(fā)展[28

曲線,測定標(biāo)準(zhǔn),多巴胺,曲線


江南大學(xué)碩士學(xué)位論文實驗結(jié)束 24 h 后,使用異氟烷對實驗小鼠進(jìn)行麻醉,將小鼠放置生理鹽水對小鼠經(jīng)心臟灌注,快速分離出小鼠大腦左右海馬組織-80℃冷凍保存?zhèn)溆。HPLC 檢測各組小鼠大腦海馬區(qū)和紋狀體多巴胺濃度。具體步驟如馬組織和紋狀體,加入 200 L 的 mol/L 高氯酸,采用冰浴勻漿 1 3 min 后取上清液過 0.22 μm 濾膜,即處理完畢,進(jìn)樣分析。 色譜條件:(1)采用 Waters Xbridge HSS T3 色譜柱(4.6 mm×150件:波長范圍 280 nm~320 nm;(3)柱溫:30℃;(4)流速:0.8 mH=3.0,濃度為 0.1 mol/L 磷酸二氫鉀溶液和甲醇;(6)進(jìn)樣量:2標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:稀釋多巴胺(DA)標(biāo)準(zhǔn)液,配制濃度為 0.2 ng/μL、4.0 ng/μL 和 10.0 ng/μL 的 DA 溶液。待 HPLC 基線平衡后,按上量 10 μL,記錄數(shù)據(jù)。以 DA 濃度為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo)。LC 檢測,,多巴胺在 0.2 ng/μL~10 ng/μL 之間具有良好的線性關(guān)系1.6724×106x-2.9850×105(R2=0.9993),如圖 3-4 所示。
【學(xué)位授予單位】:江南大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:R285.5;R284.2

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本文編號:2620202

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