【摘要】：便秘是一種臨床上較為常見的病癥,通常表現(xiàn)為排便次數(shù)減少,糞便干結(jié),排便困難。長期便秘可導(dǎo)致并發(fā)癥的產(chǎn)生,嚴(yán)重影響人們的生活質(zhì)量。關(guān)于便秘的治療藥物種類繁多,大部分藥物初期使用療效較好,但隨著使用時間的延長,藥物副作用隨之出現(xiàn),甚至出現(xiàn)藥物依賴性。對于便秘的治療祖國醫(yī)學(xué)經(jīng)驗豐富,同時療效確切、副作用小。中成藥養(yǎng)陰通秘膠囊能夠行氣通便,養(yǎng)陰潤燥,適用于各種虛性便秘,但其作用機(jī)制尚未明確,需要進(jìn)一步探索。本研究以養(yǎng)陰通秘膠囊灌胃給予氣陰血虛便秘模型小鼠,觀察養(yǎng)陰通秘膠囊對小鼠氣陰血虛便秘模型的緩解作用,并初步探討其作用機(jī)制。方法:將120只昆明小鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、養(yǎng)陰通秘膠囊低、中、高(0.3、0.6、1.2 g/kg)組及陽性藥麻仁軟膠囊(0.6 g/kg)組,每組20只。模型組、養(yǎng)陰通秘膠囊各劑量組及陽性藥組小鼠灌胃(ig)給予復(fù)方利血平0.3 mg/kg和L-甲狀腺素0.8 mg/kg,每天1次,連續(xù)7天,并于第1、3、5、7天尾靜脈放血(0.3m L/20 g);空白組ig給予等體積0.5%羧甲基纖維素鈉(0.5%CMC-Na),不放血。造模同時空白組與模型組小鼠ig給予0.5%CMC-Na 20 m L/kg,其余各組ig給予相應(yīng)藥物,每天1次,連續(xù)給藥21天。給藥期間觀察各組小鼠體征變化及糞便性狀,并每天記錄小鼠體重;測定外周血紅細(xì)胞(RBC)數(shù)、血紅蛋白(Hb)含量、首粒黑便排出時間、腸道推進(jìn)率、糞便含水量及數(shù)量;測定血清中胃動素(MTL)、胃泌素(GT)、P物質(zhì)(SP)、生長抑素(SST)含量及結(jié)腸組織勻漿中血管活性腸肽(VIP)、一氧化氮(NO)、乙酰膽堿(Ach)含量;HE染色觀察結(jié)腸病理形態(tài)學(xué)改變;免疫組化檢測結(jié)腸組織中干細(xì)胞因子受體(c-kit)、水通道蛋白3(AQP3)、水通道蛋白8(AQP8)的表達(dá)及western blot檢測結(jié)腸組織中c-kit、干細(xì)胞因子(SCF)的表達(dá)。結(jié)果:1.與空白組比較,模型組小鼠精神萎靡,活動及攝食量減少,大便外觀干硬、粒形小、光澤度低;與模型組比較,養(yǎng)陰通秘膠囊低劑量組小鼠活動狀態(tài)、攝食量及排便情況無明顯改善,養(yǎng)陰通秘膠囊中、高劑量組及陽性藥組小鼠倦怠少動癥狀逐漸改善,排便粒數(shù)增多,香腸狀或團(tuán)塊狀光滑軟便增加。2.與空白組比較,模型組小鼠RBC數(shù)、Hb含量均顯著降低(p0.01);與模型組比較,養(yǎng)陰通秘膠囊低、中、高劑量組小鼠RBC數(shù)顯著升高(p0.01),Hb含量有升高趨勢(p0.05),陽性藥組小鼠RBC數(shù)和Hb含量均顯著升高(p0.01)。3.與空白組比較,模型組小鼠首粒黑便排出時間顯著增加(p0.01);與模型組比較,養(yǎng)陰通秘膠囊低劑量組小鼠首粒黑便排出時間無顯著變化(p0.05),養(yǎng)陰通秘膠囊中、高劑量組及陽性藥組小鼠首粒黑便排出時間顯著減少(p0.05或p0.01)。4.與空白組比較,模型組小鼠6h內(nèi)糞便粒數(shù)和含水量顯著減少(p0.01);與模型組比較,養(yǎng)陰通秘膠囊低劑量組小鼠6h內(nèi)糞便粒數(shù)和含水量無顯著變化(p0.05),養(yǎng)陰通秘膠囊中、高劑量組及陽性藥組小鼠6h內(nèi)糞便粒數(shù)和含水量顯著增加(p0.05或p0.01)。5.與空白組比較,模型組小鼠腸道炭末推進(jìn)率顯著降低(p0.01);與模型組比較,養(yǎng)陰通秘膠囊低劑量組小鼠腸道炭末推進(jìn)率無顯著變化(p0.05),養(yǎng)陰通秘膠囊中、高劑量組及陽性藥組小鼠腸道炭末推進(jìn)率顯著升高(p0.01)。6.HE染色結(jié)果顯示:空白組粘膜層上皮細(xì)胞完整、排列整齊、規(guī)則,杯狀細(xì)胞形態(tài)正常,數(shù)目未見減少;模型組粘膜層上皮細(xì)胞破損、缺失,杯狀細(xì)胞減少,固有層結(jié)腸腺杯狀細(xì)胞缺失,固有層及粘膜下層散在炎細(xì)胞浸潤,肌層、外膜未見異常;養(yǎng)陰通秘膠囊低劑量組偶見粘膜層上皮細(xì)胞破損、缺失,固有層結(jié)腸腺杯狀細(xì)胞缺失,固有層、粘膜下層散在炎細(xì)胞浸潤,肌層、外膜未見異常;養(yǎng)陰通秘膠囊中劑量組偶見固有層結(jié)腸腺杯狀細(xì)胞缺失,固有層及黏膜下層散在炎細(xì)胞浸潤,肌層、外膜未見異常;養(yǎng)陰通秘膠囊高劑量組及陽性藥組粘膜層上皮細(xì)胞完整、排列整齊、規(guī)則,固有層結(jié)腸腺杯狀細(xì)胞形態(tài)正常,數(shù)目未見減少,肌層、外膜未見異常,養(yǎng)陰通秘膠囊可不同程度改善其病理形態(tài)學(xué)損傷。7.與空白組比較,模型組小鼠血清中MTL、SP含量顯著降低,GT、SST含量顯著升高(p0.01);與模型組比較,養(yǎng)陰通秘膠囊低劑量組小鼠血清中MTL含量顯著升高,而GT含量顯著降低(p0.05),養(yǎng)陰通秘膠囊中、高劑量組及陽性藥組小鼠血清中MTL、SP含量均顯著升高,而GT、SST含量均顯著降低(p0.05或p0.01)。8.與空白組比較,模型組小鼠結(jié)腸組織中VIP、Ach含量顯著降低,NO含量顯著升高(p0.01);與模型組比較,養(yǎng)陰通秘膠囊低劑量組對結(jié)腸組織VIP、Ach、NO含量均無顯著影響(p0.05),養(yǎng)陰通秘膠囊中、高劑量組及陽性藥組VIP、Ach含量顯著升高,NO含量顯著降低(p0.05或p0.01)。9.免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示:與空白組比較,模型組小鼠結(jié)腸中c-kit的表達(dá)顯著減少,AQP3、AQP8的表達(dá)顯著增加(p0.05或p0.01);與模型組比較,養(yǎng)陰通秘膠囊低劑量組小鼠結(jié)腸中c-kit、AQP3、AQP8的表達(dá)無顯著變化(p0.05),養(yǎng)陰通秘膠囊中、高劑量組及陽性藥組c-kit的表達(dá)顯著升高,AQP3、AQP8的表達(dá)顯著降低(p0.05或p0.01)。10.Western blot實驗結(jié)果顯示:模型組小鼠結(jié)腸中c-kit、SCF蛋白表達(dá)降低,養(yǎng)陰通秘膠囊低劑量組c-kit蛋白表達(dá)升高,養(yǎng)陰通秘膠囊中、高劑量組及陽性藥組c-kit、SCF的蛋白表達(dá)均升高。結(jié)論:本研究結(jié)果表明,養(yǎng)陰通秘膠囊能明顯縮短氣陰血虛便秘模型小鼠首粒黑便排出時間,提高腸道推進(jìn)率、糞便含水量及數(shù)量,調(diào)節(jié)腸激素及神經(jīng)遞質(zhì)含量,下調(diào)結(jié)腸中AQP3、AQP8的表達(dá)從而改善便秘癥狀,其緩解作用可能通過調(diào)控SCF/c-kit信號途徑增加結(jié)腸中卡哈爾間質(zhì)細(xì)胞的表達(dá),改善結(jié)腸慢波的產(chǎn)生,調(diào)控平滑肌收縮節(jié)律實現(xiàn)的。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R285.5;R-332

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本文編號：2619774