【摘要】：腸道微生物與機(jī)體的消化吸收、免疫系統(tǒng)的發(fā)育和功能的發(fā)揮有著密切的關(guān)系,但其易受宿主基因及外界環(huán)境的影響,尤其是抗生素的使用嚴(yán)重威脅著腸道微生物的穩(wěn)態(tài)平衡,長(zhǎng)期濫用抗生素會(huì)使腸道微生物在數(shù)量和組成上發(fā)生變化,出現(xiàn)腸道菌失調(diào)現(xiàn)象,所以探討如何消除抗生素造成的腸道微生物失調(diào)以及其它的副作用具有重要的作用。人參皂苷作為人參草本植物的主要活性成分,具有良好的藥理作用,同時(shí)也可以調(diào)節(jié)腸道菌。原人參三醇型皂苷(PPT)作為人參皂苷的主要成分之一,具有很好的抗腫瘤、抗糖尿病的作用,因此,探討其對(duì)腸道微生物的調(diào)節(jié)具有重要的意義。因此,本課題旨在研究PPT對(duì)抗生素造成的C57/BL6小鼠腸道健康破壞的調(diào)節(jié)作用。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)給小鼠灌胃300 mg/kg的頭孢菌素,建立腸道菌失調(diào)模型,然后給模型組小鼠25,50,100 mg/kg的PPT,連續(xù)灌胃4周之后,觀察PPT對(duì)頭孢菌素造成的小鼠腸道健康損壞的治療作用。采用16S rRNA技術(shù)分析不同處理組的小鼠糞便中微生物的豐度以及組成結(jié)構(gòu),GC-MS技術(shù)分析不同處理組小鼠糞便中短鏈脂肪酸(SCFAs)的含量,RT-qPCR技術(shù)分析不同處理組小鼠結(jié)腸組織中緊密連接蛋白(ZO-1,occludin)和炎癥細(xì)胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-1β和IFN-γ)基因水平的表達(dá)含量;Western blot(WB)技術(shù)用來(lái)分析不同處理組小鼠結(jié)腸組織中短鏈脂肪酸受體蛋白(GPR109A、GPR43和GPR41)和TLR4信號(hào)通路相關(guān)蛋白(TLR4、JNK和NF-κB)的表達(dá)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:抗生素的使用會(huì)造成腸道菌失調(diào)和結(jié)腸炎癥,破壞腸道屏障的完整性,減少SCFAs的含量和短鏈脂肪酸受體蛋白的表達(dá)。PPT的使用會(huì)改善抗生素引起的腸道菌紊亂和結(jié)腸炎癥以及腸道健康破化的狀態(tài),對(duì)腸道微生物具有保護(hù)作用,并且可以增強(qiáng)腸屏障的完整性以及減輕抗生素引起的結(jié)腸炎癥,改善腸道健康。
【圖文】：

圖 2.1 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)處理過(guò)程Figure 2.1 Animal experiment process在小鼠適應(yīng)環(huán)境一周后，隨機(jī)選取 15 只小鼠作為正常組（Normal group），其余45 只為模型組（Model group）。實(shí)驗(yàn)期間模型組小鼠每天灌胃服用 300 mg/kg 頭孢菌素誘導(dǎo)腸道菌失調(diào)模型，灌胃 4 周；正常組的小鼠也采用灌胃的方法服用同樣量的超純水。建模 4 周后，隨機(jī)選取正常組小鼠 5 只和模型組小鼠 5 只，各收集糞便 1.0 g，儲(chǔ)存在-80℃進(jìn)一步分析，然后，將小鼠禁食 12 個(gè)小時(shí)后通過(guò)斷頸法處死，同時(shí)通過(guò)眼眶靜脈取血收集血液樣品以制備血清，收集結(jié)腸，，盲腸等組織，稱重后儲(chǔ)存在-80℃?zhèn)溆�。�?）PPT 治療實(shí)驗(yàn)把剩余 40 只模型組的小鼠隨機(jī)分為 4 組（每組 N = 10）：第 1 組：對(duì)照組（Controlgroup），在治療期間每天給小鼠服用相同量的溶劑（PEG 400：H2O = 1：3）；第 2 組（L-PPT group），第 3 組（M-PPT group）和第 4 組（H-PPT group）分別給予 25，50

第二章 PPT 對(duì)小鼠機(jī)體的影響2.4 結(jié)果與討論2.4.1 PPT 的成分組成由圖 2.2 可以得出，通過(guò) HPLC 分析 PPT 中存在的人參皂苷成分，結(jié)果顯示在 45.23分鐘的時(shí)候，檢測(cè)出了人參皂苷 Rh1（S）；在 45.80 分鐘的時(shí)候，檢測(cè)出了人參皂苷Rh1（R）；在 54.50 分鐘的時(shí)候，檢測(cè)出了人參皂苷 Rk3；在 56.32 分鐘的時(shí)候，檢測(cè)出了人參皂苷 Rh4。檢測(cè)結(jié)果表明，PPT 中含有人參皂苷 Rh1、Rk3 以及 Rh4。
【學(xué)位授予單位】：西北大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R285.5

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本文編號(hào)：2619578