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基于“線粒體能量代謝”探討腎氣丸“少火生氣”配伍機(jī)理

發(fā)布時(shí)間:2020-04-08 16:23
【摘要】:目的:觀察腎氣丸對(duì)氫化可的松法誘導(dǎo)的腎陽(yáng)虛大鼠肝線粒體能量代謝的變化的影響,探討腎氣丸“少火生氣”配伍中所起的作用,解讀腎氣丸“少火生氣”治療腎陽(yáng)虛證的配伍機(jī)理,從能量代謝角度揭示“少火生氣”的實(shí)質(zhì),揭示辨證論治規(guī)律,同時(shí)也為腎氣丸在臨床上的廣泛運(yùn)用提供更為科學(xué)的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法:將60只SD大鼠(雌雄各半)予以普通飼料喂養(yǎng),其中48只采用氫化可的松腹腔注射造模,觀察2周制備腎陽(yáng)虛證大鼠,根據(jù)隨機(jī)分組原則可分為模型組、腎氣丸組、腎氣丸去附桂組、附子桂枝組。另設(shè)空白組12只。其中腎氣丸組、腎氣丸去附桂組、附子桂枝組均以7.29m L/Kg灌胃1次/天,連續(xù)2周;正常組、模型組均灌胃給予7.29m L/Kg的生理鹽水,1次/天,連續(xù)2周。在造模第一天,灌胃第一天、第十四天分別測(cè)量所有大鼠體重,在灌胃第十四天測(cè)量大鼠肛溫,在灌胃結(jié)束后第二天上午麻醉處死全部大鼠,將肝組織分離,用高效液相色譜法檢測(cè)大鼠肝線粒體內(nèi)ATP、ADP及AMP含量,運(yùn)用電鏡觀察肝組織線粒體結(jié)構(gòu),采用酶聯(lián)免疫分析(ELISA)法分別測(cè)定肝線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ-Ⅳ、ATP酶、PFH、LDH、PK、HK、ICD、CS、α-KGDHC活性。結(jié)果:(1)造模成功,出現(xiàn)腎陽(yáng)虛的典型表現(xiàn):畏寒、背蜷縮、喜扎堆、毛發(fā)脫落、肛周污染、攝食量及飲水量減少、行動(dòng)遲緩、活動(dòng)減少。(2)在PFH、LDH、PK、HK、ICD、CS、α-KGDHC、呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ-Ⅳ活性及肝線粒體內(nèi)ATP、ADP含量指標(biāo)上來(lái)看,與正常組比較,模型組均明顯降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意(P0.05);經(jīng)腎氣丸干預(yù)后,與模型組比較指標(biāo)上升較為顯著,組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與正常組比較,組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與模型組比較,腎氣丸去附桂組、附桂組組間差距無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)(3)與正常組比較,模型組線粒體結(jié)構(gòu)不完整,甚至出現(xiàn)空泡變性,部分線粒體水腫、嵴排列紊亂、裂嵴甚至消失,電子密度變低,基質(zhì)顏色較淡,與模型組比較,腎氣丸組肝線粒體超微結(jié)構(gòu)有較為明顯的改善,表現(xiàn)在線粒體水腫減輕,多數(shù)線粒體結(jié)構(gòu)正常,附桂組與腎氣丸去附桂組線粒體結(jié)構(gòu)紊亂,出現(xiàn)空泡樣變性。結(jié)論:1.腎陽(yáng)虛大鼠肝線粒體內(nèi)ATP、ADP含量下降,存在線粒體能量代謝障礙。2.腎陽(yáng)虛證大鼠經(jīng)過(guò)腎氣丸的干預(yù)后其PFH、LDH、PK、HK、ICD、CS、α-KGDHC、呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ-Ⅳ活性及肝線粒體內(nèi)ATP、ADP含量水平均有所恢復(fù),AMP含量減少,EC值增大;肝線粒體超微結(jié)構(gòu)的病理變化得以改善;從而調(diào)節(jié)了大鼠肝線粒體功能及機(jī)體能量代謝,這可能是腎氣丸“少火生氣”配伍能夠治療腎陽(yáng)虛證的現(xiàn)代生物學(xué)基礎(chǔ),從而為溫陽(yáng)助陽(yáng)中藥治療腎陽(yáng)虛證提供了科學(xué)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
【圖文】:

基于“線粒體能量代謝”探討腎氣丸“少火生氣”配伍機(jī)理


正常組(×5000)

基于“線粒體能量代謝”探討腎氣丸“少火生氣”配伍機(jī)理


模型組(×5000)
【學(xué)位授予單位】:湖南中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類(lèi)號(hào)】:R289.1

【參考文獻(xiàn)】

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2 李艷紅;Cr(Ⅵ)誘導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡與線粒體電子傳遞鏈功能障礙的關(guān)系[D];中南大學(xué);2011年



本文編號(hào):2619566

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