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軟棗獼猴桃多糖、黃酮的分離純化及潤(rùn)腸通便活性研究

發(fā)布時(shí)間:2020-04-03 21:22
【摘要】:軟棗獼猴桃是東北地區(qū)重要的野生水果,被冠以"世界珍果"之名。目前,全球慢病爆發(fā),人們開始重視食療保健,軟棗獼猴桃作為第三代藥食兼用保健品開發(fā)具有重要意義。本試驗(yàn)室前期研究表明,軟棗獼猴桃多糖類物質(zhì)可作用于脾臟,有降血糖作用,黃酮類物質(zhì)可作用于肝臟,有保護(hù)肝臟的作用;诼¢g的相通性及便秘的病機(jī),本試驗(yàn)通過(guò)研究19種軟棗獼猴桃的性狀表現(xiàn)、次生物質(zhì)含量、營(yíng)養(yǎng)成分篩選出四個(gè)品系,并對(duì)這四個(gè)品系進(jìn)行多糖、黃酮的提取及純化,用提取物灌胃小鼠,探討其對(duì)便秘小鼠的影響,以期為潤(rùn)腸通便類功能食品的開發(fā)提供理論依據(jù)。本試驗(yàn)主要研究結(jié)果如下:(1)分析19種軟棗獼猴桃的次生物質(zhì)含量,19個(gè)品系軟棗獼猴桃均含有酚類、揮發(fā)油脂類,多糖及其苷、黃酮及其苷,不含萜類、鞣質(zhì)及皂苷,其中1號(hào)、2號(hào)、4號(hào)、7號(hào)、8號(hào)、13號(hào)、19號(hào)品系含量均較高。通過(guò)分析營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量得:19個(gè)品系的平均Vc含量為266.97 mg ·100g-1,平均還原糖含量為27.07%,平均可滴定酸含量為0.23%,平均可溶性固形物含量為19.58%,平均多糖含量為43.71%,平均黃酮含量為2.56%,其中2號(hào)、4號(hào)、7號(hào)、19號(hào)各物質(zhì)含量均高于平均值,最后結(jié)合顏色、形狀等性狀表現(xiàn)分析,確定以上四個(gè)品系為后期試驗(yàn)用軟棗獼猴桃,并重新編號(hào)為1號(hào)、2號(hào)、3號(hào)、4號(hào)。(2)采用熱水提取法提取1號(hào)、2號(hào)、3號(hào)、4號(hào)品系多糖,得率分別為43.14%、45.01%、42.79%、58.02%。粗多糖經(jīng)過(guò)DEAE-52纖維素層析柱法分離純化后,1號(hào)多糖得到三個(gè)亞組分;AAP 2得到兩個(gè)亞組分;AAP 3得到三個(gè)亞組分;AAP 4得到兩個(gè)亞組分。各品系亞組分經(jīng)紫外掃描圖譜未見260 nm和280 nm蛋白及核酸,可見光部分也無(wú)色素,從SephadexG-100凝膠柱洗脫曲線可看出,各組分均只有一個(gè)主峰,說(shuō)明以上各組分均為成分單一的多糖亞組分。通過(guò)紅外光譜圖分析可知,AAP1、AAP2、AAP 3、AAP 4均具有糖類特征的吸收峰,是由多種單糖通過(guò)α糖苷鍵及β糖苷鍵連接組成的雜多糖。(3)采用乙醇提取法提取1號(hào)、2號(hào)、3號(hào)、4號(hào)黃酮,提取率分別是2.79%、3.01%、3.27%、2.62%。通過(guò)電噴霧電離試驗(yàn),初步確定AAF1中含有蘆丁、槲皮素-葡萄糖苷/半乳糖苷以及大豆異黃酮苷五乙酸酯、金絲桃苷八乙酸酯;AAF2中含有蘆丁、槲皮素-葡萄糖苷/半乳糖苷以及普羅西亞尼定八甲醚;AAF 3中含有蘆丁、槲皮素-葡萄糖苷/半乳糖苷以及葛根黃酮六乙酸酯;AAF 4中含有蘆丁、槲皮素-葡萄糖苷/半乳糖苷以及普羅西亞尼定八甲醚、八甲氧基黃酮。(4)小鼠灌胃試驗(yàn)顯示,AAP各組較AAF各組、AAPF各組排便時(shí)間更快,品系間比較,AAP1AAP4AAP3AAP2;研究數(shù)據(jù)6小時(shí)排便粒數(shù),AAPF各組比AAP組、AAF組6小時(shí)排便粒數(shù)更多,品系間比較,AAPF 4AAPF 3AAPF 2AAPF 1;糞便含水量比較,AAF各組較AAP各組、AAPF各組排便時(shí)間更快,品系間比較,AAF4AAF2AAF3AAF1;但糞便重量各組差異并不顯著(p0.05),其中,AAP 4組效果最好,AAPF各組效果次之,AAF 1和AAF 3品系效果較好。
【圖文】:

洗脫曲線,多糖,洗脫曲線,脫蛋白


蛋白濃度(ug/ml)逡逑pjTotein邋concentration(邋g/址)逡逑圖3-1蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線逡逑Fig.邋3-1邋Pro化in邋Standard邋curve逡逑Sewg法反復(fù)處理脫蛋白,,分別測(cè)定四個(gè)品系的蛋白質(zhì)含量,隨著脫蛋白次數(shù)的增逡逑加,蛋白含量逐漸下降,但考慮到多糖損失率,最終確定AAP邋1、AAP2邋Sevage脫蛋逡逑白次數(shù)為6次,AAP3、AAP4Sevage脫蛋白次數(shù)為4次。逡逑12邋;逡逑灥IhV逡逑lit邋2;友邋3巧邋4化邋5波邋6次邋7;丈逡逑齡蛋白次教dealing邋tines逡逑圖3-2邋Sevage法脫蛋白不同次數(shù)蛋白含量逡逑Fig.邋3-2邋Sevage邋method邋depro1:einization邋pro化in邋content逡逑3.2.3軟Y"s6猴桃多糖各亞組分的制備逡逑2-4逡逑2-弓-邐/一\逡逑Ixi邋::邐/邋\逡逑5邋1.6邐

脫蛋白,蛋白含量,次數(shù)


蛋白濃度(ug/ml)逡逑pjTotein邋concentration(邋g/址)逡逑圖3-1蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線逡逑Fig.邋3-1邋Pro化in邋Standard邋curve逡逑Sewg法反復(fù)處理脫蛋白,分別測(cè)定四個(gè)品系的蛋白質(zhì)含量,隨著脫蛋白次數(shù)的增逡逑加,蛋白含量逐漸下降,但考慮到多糖損失率,最終確定AAP邋1、AAP2邋Sevage脫蛋逡逑白次數(shù)為6次,AAP3、AAP4Sevage脫蛋白次數(shù)為4次。逡逑12邋;逡逑灥IhV逡逑lit邋2;友邋3巧邋4化邋5波邋6次邋7;丈逡逑齡蛋白次教dealing邋tines逡逑圖3-2邋Sevage法脫蛋白不同次數(shù)蛋白含量逡逑Fig.邋3-2邋Sevage邋method邋depro1:einization邋pro化in邋content逡逑3.2.3軟Y"s6猴桃多糖各亞組分的制備逡逑2-4逡逑2-弓-邐/一\逡逑Ixi邋::邐/邋\逡逑5邋1.6邐
【學(xué)位授予單位】:沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:R284.2;R285.5

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4 劉延吉;朱雪Z

本文編號(hào):2613719


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