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五味子HG型果膠的甲酯化位點(diǎn)研究

發(fā)布時(shí)間:2020-03-28 21:20
【摘要】:五味子(Schisandra chinensis(Turcz.)Baill)為木蘭科五味子屬植物,有斂肺止咳、滋補(bǔ)澀精、止瀉止汗之效。水溶性多糖是五味子的有效活性成分之一,尤其是果膠多糖。果膠是構(gòu)成植物細(xì)胞壁的主要成分之一,也是自然界一類結(jié)構(gòu)復(fù)雜的生物大分子。不同類型的果膠生理功能及藥理活性差異較大,因此明確果膠的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是研究果膠構(gòu)效關(guān)系的基礎(chǔ)。本研究首先制備了五味子果膠多糖,然后對(duì)其中主要的HG型果膠的結(jié)構(gòu)特征進(jìn)行了分析,取得的研究結(jié)果如下:采用DEAE-Cellulose離子交換層析法對(duì)五味子多糖SCP進(jìn)行分級(jí),得到蒸餾水洗脫的中性糖級(jí)分SCPN和0.5 M NaCl溶液洗脫的果膠級(jí)分SCPA。單糖組成分析結(jié)果顯示,SCPA主要由GalA構(gòu)成,此外還有少量的Glc、Gal、Rha和Ara。~(13)C NMR譜及TBA定性檢測實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,SCPA主要由HG型果膠結(jié)構(gòu)域組成,還含有少量的RG-I和RG-II型果膠結(jié)構(gòu)域。同時(shí),~(13)C NMR譜和FT-IR譜的結(jié)果表明,SCPA中的HG結(jié)構(gòu)域具有較高程度的甲酯化,不具有乙;揎棥榱藢(duì)五味子果膠中主要的HG結(jié)構(gòu)域進(jìn)行分析,采用Endo-Polygalacturonase M2(EC 3.2.1.15)對(duì)五味子總果膠SCPA進(jìn)行酶解。產(chǎn)物利用Sephadex G-50凝膠層析柱層析分級(jí),得到分子量均一的四個(gè)級(jí)分SCPA-PG1、SCPA-PG2、SCPA-PG3和SCPA-PG4。單糖組成分析結(jié)果表明SCPA-PG1為分子量較大的RG-I結(jié)構(gòu)域,SCPA-PG2為RG-II結(jié)構(gòu)域,SCPA-PG3和SCPA-PG4為HG型果膠降解產(chǎn)生的寡糖片段。利用ESI-IT-MS分別對(duì)這些HG寡糖片段進(jìn)行一級(jí)和二級(jí)質(zhì)譜分析明確了HG寡糖片段中甲酯基的位置。進(jìn)一步利用層析法從五味子總果膠SCPA中分離純化出一個(gè)GalA含量在90%以上的高純度HG型果膠結(jié)構(gòu)域。通過酶解及ESI-IT-MS初步推測出了五味子中HG型果膠的結(jié)構(gòu)模型。
【圖文】:

結(jié)構(gòu)模型,甲酯化,果膠,聚合度


程度也是不一樣的,如在高爾基體處的 HG 型果膠幾乎發(fā)生了 100%的甲酯飾。同時(shí)在植物的生長過程中,HG 型果膠會(huì)發(fā)生去酯化作用[43,44]。一般來大于 50%的甲酯化程度被稱為高甲酯化,小于 50%的被稱為低甲酯化。研究,植物細(xì)胞壁的胞間層既存在低甲酯化的 HG 型果膠,也存在高甲酯化的型果膠,而植物細(xì)胞壁的初生壁中只存在高甲酯化的 HG 型果膠[45]。目前發(fā)在鴨跖草亞綱的單子葉植物中,HG 型果膠的聚合度相對(duì)較低為 60,但是在跖草亞綱的單子葉植物中,HG 型果膠的聚合度大約比其多了 1 倍[46]。當(dāng)然報(bào)道的更高聚合度的 HG 型果膠[45,47]。因此,隨著植物種類的不同,HG 型的聚合度也不同,并且也與 HG 型果膠的提取方法有關(guān)。

模型圖,果膠,交聯(lián),模型


G 型果膠的活性研究現(xiàn),中藥植物果膠類多糖具有多種生物功能與活性。王佳發(fā)現(xiàn)抗疲勞和抗抑郁[50~52]。孫成新的研究表明人參果膠對(duì)糖尿病能[53]。范玉瑩從人參中分離出的果膠對(duì) L-929 細(xì)胞的遷移具有,49]。于曉娜的研究表明西洋參果膠級(jí)分 AEP-2 具有抗氧化活[54]。果膠結(jié)構(gòu)的改變與植物的生長發(fā)育有直接關(guān)系。研究表明,植、完整性、相對(duì)剛度、機(jī)械性質(zhì)、細(xì)胞間粘附等皆與 HG 型果,56]。不通酯化度的 HG 型果膠在植物細(xì)胞壁的胞間層中均有分程度和分布對(duì) HG 型果膠的結(jié)構(gòu)有很大的影響,進(jìn)而影響了明,HG 型果膠具有 Ca2+結(jié)合特點(diǎn),即在 HG 型果膠中,,兩個(gè)間通過離子鍵與 Ca2+交聯(lián)形成膠狀,從而與相鄰的細(xì)胞壁連接Sila 的研究發(fā)現(xiàn)在維管類植物中不同的 HG 果膠交聯(lián)形式對(duì)細(xì)間粘附和正常生長都有重要作用[57]。
【學(xué)位授予單位】:東北師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號(hào)】:R284.1

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2604932

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