【摘要】：通過HPLC檢測,FSN002內(nèi)生真菌發(fā)酵液中主要含有3種待分離物質(zhì),這三種物質(zhì)分別是楸靈素(化合物1,RT 21 min,最大吸收波長282 nm),酸降解產(chǎn)物(化合物2,RT 24 min,最大吸收波長306 nm)和黃色降解產(chǎn)物(化合物3,RT 28 min,最大吸收波長362 nm)。研究發(fā)現(xiàn)楸靈素對肝癌、腦癌等具有一定的抵抗效果,且不會損傷正常細(xì)胞。為優(yōu)化楸靈素的HPLC檢測條件,用Na Cl對發(fā)酵液樣品進(jìn)行了預(yù)處理,使得楸靈素保留時間提前,峰寬變窄,峰形更加對稱。為分離純化與鑒定這3種物質(zhì),本課題采用了樹脂吸附,萃取分離,HPLC,LC-MS,NMR等研究手段,獲得以下研究結(jié)果:(1)大孔樹脂ADS-7較適合分離楸靈素。通過鹽水-水-甲醇-飽和鹽甲醇4步洗脫,將楸靈素濃縮純化到鹽甲醇溶液中供進(jìn)一步分離,同時親水性色素被除去。另外,采用聚酰胺、薄層層析和高效液相ODS制備柱制備相結(jié)合的方法對甲醇部分進(jìn)行分離制備,獲得色譜純度為91.54%的化合物3,通過核磁和LC-MS-MS數(shù)據(jù)分析,該物質(zhì)摩爾質(zhì)量496.21 g/mol,分子式C28H32O8,英文名稱為Trichodimerol,屬聚酮類化合物,其空間結(jié)構(gòu)對稱,與黃酮有許多性質(zhì)相似,可從紅樹林木霉菌和海洋微生物中獲得該物質(zhì),其具有抗菌、抗流感等作用。(2)通過向發(fā)酵液樣品中加入酸堿,調(diào)節(jié)電離平衡,改變其極性和油水兩相分配系數(shù),可以實(shí)現(xiàn)楸靈素的萃取分離與濃縮。通過考察溶劑種類、萃取溶劑與物料的體積比以及萃取體系的pH值,以HPLC為檢測手段,建立分離純化楸靈素的方法工藝。楸靈素在4中有機(jī)溶劑中的油水分配系數(shù)大小依次是:乙酸乙酯氯仿二氯甲烷甲苯;酸萃取時萃取劑體積過小,楸靈素存在降解,萃取過程中,隨著pH增大,楸靈素在油水兩相中分配比值減小,在pH 4.5發(fā)酵液-乙酸乙酯1:1和pH 9氫氧化鈉-乙酸乙酯1:3條件下進(jìn)行萃取反萃取,楸靈素的萃取收率達(dá)78.28%,對應(yīng)楸靈素色譜純度97.7%,這種萃取工藝對楸靈素的分離純化效果明顯。
【圖文】：

離心后對上層和下層分別取樣，加入等體測，進(jìn)樣體積 10 μL，每組設(shè)置 3 個重復(fù)。和與流動相加鹽對楸靈素檢測的影響收集的發(fā)酵液，每組 1 mL，一組直接與甲醇 1:1 飽和處理 30 min 后，，再與甲醇 1:1 混合，這兩組樣檢測方法進(jìn)行檢測，進(jìn)樣體積 10 μL；將 2.2.2 檢測/100 mL 的 NaCl 水溶液，對與甲醇 1:1 混合離心后10 μL。PLC 檢測楸靈素的影響

圖 2-3 NaCl 飽和處理時間對楸靈素 RT 的影響he impact of saturation processing time by NaCl on the RT o圖 2-4 NaCl 飽和處理時間對楸靈素檢 的影響 impact of saturation processing time by NaCl on the detectin
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R284.2

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 劉品;苗辰飛;王玲;張曼;苗志奇;;楸靈素的萃取-反萃分離純化方法研究[J];上海交通大學(xué)學(xué)報(農(nóng)業(yè)科學(xué)版);2018年04期

2 陳衛(wèi)衛(wèi);;南社傳奇伉儷劉三與陸靈素[J];檔案天地;2017年08期

3 彭君堂;;彭君堂詩歌[J];參花(上);2017年03期

4 蒙塵;;七律·為文[J];北方文學(xué);2017年10期

5 楊介賓;讀《四川中醫(yī)》有感[J];四川中醫(yī);1988年04期

6 馮婷婷;苗辰飛;于湘莉;苗志奇;;樹脂對楸靈素吸附與洗脫特性的影響[J];吉林大學(xué)學(xué)報(理學(xué)版);2018年01期

7 師洪亮,趙佳琦;自擬生胃靈素片治療消化性潰湯療效觀察[J];中國鄉(xiāng)村醫(yī)生;2001年07期

8 張修德;胃靈素膠囊臨床觀察研究[J];科學(xué)中國人;2000年06期

9 傅婉霏;;別等了,往前沖吧[J];青春歲月;2015年16期

10 方靈素;東來;;從打工妹到女老板——講述方靈素成功的創(chuàng)業(yè)致富經(jīng)歷[J];報林;2008年05期

相關(guān)會議論文 前1條

1 師洪亮;師者書;;自擬生胃靈素片治療消化性潰瘍療效觀察(附199例分析)[A];中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會第十三次全國消化系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2001年

相關(guān)重要報紙文章 前4條

1 廣文;探索“靈素”的軌跡[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2007年

2 曹偉明 青浦區(qū)宣傳部副部長 上海作家協(xié)會會員;劍膽琴心的南社伉儷[N];聯(lián)合時報;2015年

3 王先東;海中抗癌產(chǎn)品多[N];保健時報;2004年

4 趙榮立;具有抗癌作用的海產(chǎn)品[N];中國消費(fèi)者報;2000年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前2條

1 劉品;楸靈素及其類似物的分離純化研究[D];上海交通大學(xué);2017年

2 苗學(xué)瑤;理想者的悲哀[D];南京大學(xué);2015年

本文編號：2603551