【摘要】：化瘀通脈顆粒是一種醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑,具有活血化瘀的功效,臨床上用于皮膚血管炎的治療。該制劑處方包括丹參、毛冬青、赤芍、桃仁和川芎等多種藥材,其中丹參和毛冬青為君藥,可以活血通絡(luò)、清熱解毒。如同大多數(shù)醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑,化瘀通脈顆粒藥學(xué)研究并不完善。因此本課題通過相關(guān)質(zhì)量研究,以提高該制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn);同時進(jìn)行初步藥效學(xué)研究,評價化瘀通脈顆粒的藥理作用,為化瘀通脈顆粒的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。實驗方法:(1)建立毛冬青皂苷甲和冬青素A含量測定的高效液相色譜法(HPLC),并同時檢測市售9批藥材和化瘀通脈顆粒及其中間產(chǎn)品中三萜皂苷的含量;建立HPLC同時測定化瘀通脈顆粒中指標(biāo)成分丹酚酸B和芍藥苷含量的方法,并測定3批化瘀通脈顆粒中有效成分的含量;通過對化瘀通脈顆粒指紋圖譜的研究,對該制劑進(jìn)行總體重評價。(2)進(jìn)行最大給藥量的急性毒性試驗,根據(jù)試驗結(jié)果初步評價化瘀通脈顆粒的安全性;采用小鼠耳腫脹動物模型,考察化瘀通脈顆粒的抗炎作用;基于小鼠凝血時間和出血時間,評價化瘀通脈顆粒的抗凝作用。實驗結(jié)果:本實驗采用HPLC法能準(zhǔn)確、穩(wěn)定的對毛冬青皂苷甲和冬青素A進(jìn)行含量測定,通過檢測后發(fā)現(xiàn)9批毛冬青藥材中三萜皂苷含量差異較大,化瘀通脈顆粒及中間產(chǎn)品中的三萜皂苷含量低;本實驗成功建立了同時測定化瘀通脈顆粒中丹酚酸B和芍藥苷的含量測定方法,該方法線性關(guān)系良好,穩(wěn)定性、重復(fù)性和精密度RSD均小于2%;通過對化瘀通脈顆粒HPLC指紋圖譜研究,發(fā)現(xiàn)化瘀通脈顆粒各批次間質(zhì)量略有差異。急性毒性試驗結(jié)果表明化瘀通脈顆粒的安全范圍較大,無明顯毒理反應(yīng);藥理試驗中發(fā)現(xiàn)高劑量的化瘀通脈顆�？梢越档托∈蠖[脹率,低、中、高劑量的化瘀通脈顆粒均可以延長小鼠的出血時間和凝血時間。實驗結(jié)論:本文成功建立了毛冬青中三萜皂苷、化瘀通脈顆粒中有效成分的含量測定方法,并建立該制劑的指紋圖譜,全面反映和評價化瘀通脈顆粒的質(zhì)量水平,研究結(jié)果可用于提升制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),加強(qiáng)對化瘀通脈顆粒的質(zhì)量控制。通過動物實驗發(fā)現(xiàn)化瘀通脈顆粒安全性高,有抗炎作用和抗凝作用,為臨床使用提供了參考。
【圖文】：

在本次研究中，采用 HPLC 對藥材毛冬青中的毛冬青皂苷甲和冬青素 A 進(jìn)行含量測定的色譜條件為：色譜柱 DiKMA Diamonsil plus (5 μm C18，250 mm×4.6mm)；流動相：乙腈-0.05%磷酸水溶液，梯度洗脫如表 2-1 所示；檢測波長 210 nm；流速為 1.0 mL/min；柱溫：30 ℃；進(jìn)樣量：10 μL。2.1.4 方法學(xué)2.1.4.1 專屬性考察取毛冬青藥材按 2.1.2.2 制備供試品溶液，，將混合對照溶液加入制備好后的供試品溶液中，按 2.1.3.3 中色譜條件對供試品溶液及含對照樣品溶液進(jìn)行檢測。結(jié)果如圖 2-1 和圖 2-2 所示，含有對照樣品溶液色譜圖中毛冬青皂苷甲和冬青素 A 的色譜峰與供試品溶液基本一致，且兩個溶液中的待測組份光譜圖一致，這表明該方法能夠準(zhǔn)確識別選擇毛冬青皂苷甲和冬青素 A，具有良好的專屬性。

圖 2-2 毛冬青藥材與對照品混合溶液 HPLC 色譜圖2.1.4.2 線性關(guān)系的考察取 2.1.2.1 中的對照品儲備液配制毛冬青皂苷甲濃度 0.493 mg/mL、0.19mg/mL、0.099 mg/mL、0.049 mg/mL、0.025 mg/mL 和冬青素 A 濃度 0.497 mg/mL、0.199 mg/mL、0.099 mg/mL、0.050 mg/mL、0.025 mg/mL 的系列混合溶液，按 2.1.3中色譜條件進(jìn)行測定，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，如圖 2-3 和圖 2-4 所示，計算得出線性方程。毛冬青皂苷甲的線性方程為：Y=1.66×106X + 1.17×104，R2=0.9993。冬青素 A 的線性方程為：Y=3.74×106X +1.74×104，R2=0.9998。線性關(guān)系考察結(jié)果表明毛冬青皂苷甲在 0.025 mg/mL 至 0.493 mg/mL 的濃度范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系，冬青素 在 0.025 mg/mL 至 0.497 mg/mL 的濃度范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系。600000700000800000900000
【學(xué)位授予單位】：電子科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R286.0;R285.1;R-332

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2600865