不同區(qū)域鐵皮石斛成分差異分析與指紋圖譜建立研究
發(fā)布時間:2020-03-25 19:28
【摘要】:鐵皮石斛(Dendrobium officinale Kiumra et Migo)是我國傳統(tǒng)中草藥,目前主要以莖入藥,為加強鐵皮石斛藥材資源的綜合利用與質(zhì)量控制,本研究以高效液相色譜(HPLC)指紋圖譜、氣相色譜/質(zhì)譜(GC-MS)結合多指標成分定量分析的方法,對不同產(chǎn)地、不同部位、不同生長時期的鐵皮石斛有效成分進行了綜合系統(tǒng)的評價,同時建立了鐵皮石斛的標準指紋圖譜,具體研究結果如下:1.本研究采用頂空固相微萃取技術(HS-SPME)高效提取鐵皮石斛花、莖、葉中的揮發(fā)性成分,并以GC-MS技術測定各化合物,根據(jù)NIST 11質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫的檢索匹配結果并結合保留指數(shù)RIs,共鑒定得到37種化合物,分為七大類:烷烴類、烯烴類、醛類、醇類、酮類、酯類化合物及其他,其中花中有30種化合物,葉中18種,莖中11種。鐵皮石斛花、莖、葉中有7種共有的化合物,分別為:十一烷、反-2-辛烯醛、長葉烯、β-紫羅蘭酮、壬醛、癸醛和香葉基丙酮。從揮發(fā)性成分種類分析,發(fā)現(xiàn)鐵皮石斛葉中成分種類豐富,β-紫羅蘭酮、香葉基丙酮、β-環(huán)檸檬醛、壬醛和癸醛這幾類主要成分的含量較高,表明了鐵皮石斛葉片在揮發(fā)性成分上具有較大的研究利用價值。進一步比較了安徽霍山、浙江德清、浙江磐安、浙江永康這四個產(chǎn)地的鐵皮石斛葉中揮發(fā)性成分,安徽霍山的鐵皮石斛葉片共有22種成分,種類最為豐富。其次為浙江磐安,共有21種成分,浙江德清含有20種成分,浙江永康含有18種成分。四個產(chǎn)地的鐵皮石斛葉片共有14種共有的揮發(fā)性成分。2.本研究建立了鐵皮石斛HPLC指紋圖譜研究的方法。結果顯示葉中化合物種類和含量都明顯高于莖,這說明鐵皮石斛葉具有較高的研究價值。在此基礎上,對7個產(chǎn)地(云南德宏、江西鷹潭、安徽霍山、浙江德清、浙江磐安、浙江永康、浙江麗水)11個批次的鐵皮石斛樣品的甲醇提取物進行成分研究及比較,建立了11個批次鐵皮石斛葉片有效成分的指紋圖譜體系。共獲得21個共有色譜峰,并以其峰面積計算各產(chǎn)地鐵皮石斛樣品的相似性,浙江德清兩個批次樣品與對照圖譜相似性較低,分別為0.639和0.654,其余六個產(chǎn)地的樣品與對照圖譜相似性較高,在0.816~0.954之間。聚類分析結果顯示,云南德宏的鐵皮石斛被單獨聚為一類,安徽霍山和浙江磐安聚為一類,浙江其余三個產(chǎn)地和江西鷹潭聚為一類。此外,通過主成分分析得到累積貢獻率達70.583%的三個主成分,其中峰8、9、10、14、15、16對主成分1貢獻率較高,峰1、2、4、5、20對主成分2貢獻率較高,峰11、12、13對主成分3貢獻率較高。鐵皮石斛葉和莖的甲醇提取物均有一定的抗氧化活性,且葉的抗氧化活性高于莖。3.對不同部位、不同產(chǎn)地的鐵皮石斛黃酮、多糖、生物堿含量進行比較,結果發(fā)現(xiàn)鐵皮石斛葉中的黃酮含量明顯高于莖,不同產(chǎn)地之間,浙江永康的鐵皮石斛的總黃酮含量明顯高于其他產(chǎn)地,其次為安徽霍山和云南德宏。鐵皮石斛莖的多糖含量明顯高于葉,不同產(chǎn)地之間,浙江德清鐵皮石斛的總多糖含量最高,為51.453%。鐵皮石斛生物堿含量明顯低于黃酮和多糖,并且在葉中含量明顯高于莖,不同產(chǎn)地之間,浙江磐安的鐵皮石斛總生物堿含量最高,為0.0575%。鐵皮石斛的總黃酮和總多糖都具有一定的抗氧化活性,黃酮的抗氧化活性與黃酮含量成正相關,而石斛粗多糖的抗氧化活性與粗多糖含量成負相關。本文通過對不同產(chǎn)地、不同部位鐵皮石斛的揮發(fā)性成分、甲醇提取物、多糖、生物堿、黃酮進行測定,采用HPLC指紋圖譜、GC-MS檢測等方法結合多成分定量分析,同時,對各成分進行體外抗氧化活性分析,本研究為鐵皮石斛藥材質(zhì)量控制和資源利用提供了更為全面的科學參考依據(jù)。
【圖文】:
圖 2.1 37 種揮發(fā)性成分在鐵皮石斛花、莖、葉中的分布Figure 2.1 The distribution of the 37 volatile compounds in different tissues of D. off揮發(fā)性成分峰面積
16圖 2.2 鐵皮石斛花、莖、葉中共有的七種揮發(fā)性成分含量比較。圖中同 成分中的不同示含量存在顯著差異,小寫英文字母表示顯著性差異 p<0.05,大寫英文字母表示顯著性差異Figure 2.2 Seven common volatile compounds present in flower, leaf and stem of DDifferent letters within the same compound indicate significant differences in amounts.Amousame letters do not differ significantly. Lowercase letters indicate a significant difference at puppercase letters indicate a significant difference at p < 0.01.2.4.2 不同產(chǎn)地鐵皮石斛葉中揮發(fā)性成分比較根據(jù)對鐵皮石斛不同組織中揮發(fā)性成分的研究,發(fā)現(xiàn)花中揮發(fā)性成分種類
【學位授予單位】:浙江理工大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:R284.1
【圖文】:
圖 2.1 37 種揮發(fā)性成分在鐵皮石斛花、莖、葉中的分布Figure 2.1 The distribution of the 37 volatile compounds in different tissues of D. off揮發(fā)性成分峰面積
16圖 2.2 鐵皮石斛花、莖、葉中共有的七種揮發(fā)性成分含量比較。圖中同 成分中的不同示含量存在顯著差異,小寫英文字母表示顯著性差異 p<0.05,大寫英文字母表示顯著性差異Figure 2.2 Seven common volatile compounds present in flower, leaf and stem of DDifferent letters within the same compound indicate significant differences in amounts.Amousame letters do not differ significantly. Lowercase letters indicate a significant difference at puppercase letters indicate a significant difference at p < 0.01.2.4.2 不同產(chǎn)地鐵皮石斛葉中揮發(fā)性成分比較根據(jù)對鐵皮石斛不同組織中揮發(fā)性成分的研究,發(fā)現(xiàn)花中揮發(fā)性成分種類
【學位授予單位】:浙江理工大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:R284.1
【參考文獻】
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8 宓文佳;陳素紅;呂圭源;李燕;張sダ,
本文編號:2600328
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