【摘要】：目的:探討黃芩素(baicalein,BAI)對胃癌MGC-803細胞的抑癌作用及機制。方法:MGC-803細胞用不同濃度BAI處理后,采用MTT法檢測細胞增殖;平板克隆形成實驗檢測細胞的集落形成能力;劃痕愈合實驗和Transwell小室遷移實驗檢測細胞的遷移能力;Annexin V-FITC/PI雙染流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡;Hoechst33342染色觀察細胞凋亡小體的形成;PI單染流式細胞術(shù)檢測細胞周期;免疫熒光染色法檢測自噬體標記蛋白LC3的表達;Western blot實驗檢測p12-LOX和p-Ezrin蛋白、EMT標志物蛋白、凋亡相關(guān)蛋白及LC3的表達。結(jié)果:1.MTT實驗結(jié)果顯示:5、10、15、25、50μmol/L的BAI分別處理MGC-803細胞12h、24h、48h,與對照組相比均可明顯抑制細胞增殖,并呈時間和劑量依賴性(P0.05或P0.01);2.平板克隆形成實驗結(jié)果顯示:15、25μmol/L的BAI可抑制MGC-803細胞的集落形成能力(P0.05或P0.01);3.劃痕愈合實驗結(jié)果顯示:5、15、25μmol//L的BAI處理細胞24h、48h,與對照組相比可使細胞的橫向遷移能力明顯降低,并呈劑量依賴性(P0.05或P0.01);4.Transwell小室遷移實驗結(jié)果顯示:25μmol/L的BAI處理細胞48h,與對照組相比可使細胞的縱向遷移能力明顯降低(P0.01);5.流式細胞術(shù)檢測凋亡結(jié)果顯示:與對照組比較,25μmol/L的BAI處理組的MGC-803細胞的晚期凋亡比率明顯升高(P0.01);6.Hoechst 33342染色結(jié)果也顯示:5、15、25μmol/L的BAI作用后MGC-803細胞出現(xiàn)了亮藍色凋亡小體,并隨BAI濃度的增高凋亡小體數(shù)量有增加的趨勢;7.流式細胞術(shù)檢測細胞周期結(jié)果顯示:15、25μmol/L的BAI可誘導(dǎo)MGC-803細胞周期阻滯在G0/G1期(P0.01);8.免疫熒光染色結(jié)果顯示:25μmol/L的BAI處理MGC-803細胞與對照組相比可顯著增加自噬體標記蛋白LC3的表達量;9.Western blot實驗結(jié)果顯示:BAI可顯著下調(diào)MGC-803細胞中 P12-LOX、p-Ezrin、Vimentin、Snail、Bcl-2蛋白表達水平(P0.05或P0.01),上調(diào) E-cadherin、cleaved-caspase-3、LC3-II 蛋白表達水平(P0.05或P0.01)。結(jié)論:1.BAI抑制胃癌MGC-803細胞的增殖、克隆形成、遷移,誘導(dǎo)細胞凋亡和自噬,具有抗腫瘤作用。2.BAI的抗腫瘤作用與其調(diào)控p12-LOX、Ezrin、凋亡相關(guān)蛋白、LC3及EMT相關(guān)蛋白的表達密切相關(guān)。
【圖文】：

院病理學(xué)與病理生理學(xué)專業(yè)碩士學(xué)位論文邐材料混勻細胞懸液，，用加樣槍吸取２０Ｗ懸液緩慢加入到蓋玻片與中；逡逑鏡下觀察計數(shù)板上細胞平均分布情況，并計數(shù)，計４大格里的壓線的細胞只計上側(cè)和左側(cè)；逡逑計數(shù)結(jié)果進行計算并稀釋成需要的細胞濃度的懸液。逡逑

邐實驗結(jié)果逡逑的長期影響，其結(jié)果顯示（圖２）：與對照組相比５ｐｍｏｌ／Ｌ的ＢＡＩ對細胞的集落逡逑形成影響不明顯，１５和２５ｊｉｍｏｌ／Ｌ的ＢＡＩ可顯著抑制ＭＧＣ－８０３細胞的集落形成逡逑能力（尸＜０．０５或尸＜０．０１）。逡逑ＢＡＩ邋（ｎｍｏｌ／Ｌ）逡逑Ｃｏｎｔｒｏｌ邐５邐１５邐２５逡逑

本文編號：2599850