【摘要】：目的:優(yōu)選出黃芪中黃酮類成分的最佳工業(yè)提取、純化工藝,制定黃酮類成分的質(zhì)量標準,并探討黃芪中黃酮類成分的抗“柯薩奇”病毒性心肌炎作用。方法:1.優(yōu)選最佳的提取工藝:以毛蕊異黃酮苷含量和總黃酮含量為考察指標,先對不同溶劑對提取的影響進行考察,選出其中提取效果較好的溶劑。再以溶劑用量、提取時間、提取次數(shù)為影響因素,設(shè)計正交實驗,選出最佳的提取工藝。2.優(yōu)選最佳工業(yè)純化工藝:以毛蕊異黃酮苷轉(zhuǎn)移率、總黃酮轉(zhuǎn)移率為考察指標,先設(shè)計預(yù)實驗選出雙水相體系,再以鹽質(zhì)量分數(shù)、無水乙醇質(zhì)量分數(shù)、投料比為影響因素,設(shè)計正交實驗,優(yōu)化出最佳初步純化工藝。再采用聚酰胺柱對初步純化液進行分離,考察各種影響因素,優(yōu)化出最佳分離工藝。3.抗“柯薩奇”病毒心肌炎作用:(1)用制備液給小鼠灌胃,通過酶聯(lián)免疫法和胸腺指數(shù)評價黃芪中黃酮類成分對機體免疫功能的影響。(2)通過體外細胞實驗,評價黃芪中黃酮類成分對柯薩奇病毒的影響。結(jié)果:1.最佳的提取工藝為采用煎煮法提取,提取條件為:加水煎煮提取二次,第一次加9倍量水,煎煮2小時,第二次加7倍量水,煎煮1小時。2.最佳的純化、分離工藝為:采用磷酸氫二鉀-無水乙醇雙水相體系,對黃芪提取液進行純化;最后采用聚酰胺柱對黃芪中黃酮類成分進行分離,聚酰胺活化后每100mL上2.5g原藥(濕法裝柱濕法上樣),活化1h,用3BV的水、25%乙醇溶液進行洗脫,洗脫速度為1.0BV/h。3.(1)黃芪中黃酮類成分可以調(diào)節(jié)機體免疫功能。(2)黃芪中黃酮類成分對柯薩奇病毒有抑制作用。結(jié)論:通過優(yōu)化提取、純化工藝,可以得到含量較高的黃酮類成分,而黃芪中黃酮類成分可以從多個角度提高機體抗病毒的能力。
【圖文】：

圖 1 毛蕊異黃酮苷標準曲線精密度試驗：精密吸取毛蕊異黃酮苷對照品溶液（0.056mg/mL）20μL，色譜條件連續(xù)進樣 5 次，測定峰面積積分值，計算精密度，結(jié)果毛蕊異黃測定峰面積變異系數(shù) RSD 為 1.86%，結(jié)果見表 1。

圖 2 不同溶劑提取液中毛蕊異黃酮苷含量結(jié)果（%） 提取液中總黃酮含量的測定照品溶液的制備：精密稱取毛蕊異黃酮苷對照品 4.0mg，置于 50mL 容量瓶至刻度線溶解，定容，，即得濃度為 0.08mg/mL 的毛蕊異黃酮苷對照品溶液
【學位授予單位】：山東中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R284;R285

【引證文獻】

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1 馬慧;特異性產(chǎn)牡荊苷木豆內(nèi)生真菌Dichotomopilus funicola Y3的發(fā)酵工藝優(yōu)化及其生物活性研究[D];東北林業(yè)大學;2018年

本文編號：2597505