【摘要】：目的:1.建立乳腺癌并發(fā)抑郁癥(Breast Cancer Complicated with Depression,BC RD)動物模型,并從行為學、血液學和組織病理學等相關(guān)指標確定模型評價體系,為BCRD的研究奠定模型基礎(chǔ)。2.以建立的BCRD小鼠模型為研究對象,給予中藥復(fù)方逍遙抗癌解郁方干預(yù),研究其抗腫瘤、抗抑郁的療效,并初步推測出其治療BCRD的作用機理,為BCRD的防治研究提供方向。方法:1.BCRD模型的建立。BALB/c雌性小鼠腋下注射4T1炎性乳腺癌細胞(107個/ml,0.1 ml),7天后觀察是否成模,成模的小鼠按糖水消耗隨機分為2組:乳腺癌組和BCRD組,未注射乳腺癌細胞的小鼠根據(jù)糖水消耗隨機分為2組:空白組與抑郁癥組。BCRD組與抑郁癥組連續(xù)21天給予背部皮下注射皮質(zhì)酮(30mg/Kg)造就抑郁癥模型,同時每周一次糖水消耗測試。BCRD模型制備21天后,測定各組曠場實驗、懸尾實驗與新奇攝食實驗;Elisa檢測血漿促腎上腺激素釋放激素(CRH)、促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)、皮質(zhì)酮(CORT)、5-羥色胺(5-HT),血清多巴胺(DA)、去甲腎上腺素(NE),腫瘤標志物癌抗原15-3(CA15-3)、癌胚抗原(CEA)和糖類抗原CA125的含量;檢測乳腺腫瘤瘤重與瘤體積;HE染色觀察各組小鼠海馬、腎上腺和腫瘤的病理改變;q RT-PCR檢測海馬中NR2A、NR2B、CREB和Ca MKⅡ基因以及腫瘤中NR2A和NR2B基因的表達。2.逍遙抗癌解郁方(Xiaoyao Kangai Jieyu Compound,XYKAJY)的干預(yù)作用。建立BCRD小鼠模型,并根據(jù)糖水消耗量隨機分為6組:空白組、BCRD組、化療組、中藥組、化療(20 mg/Kg)聯(lián)合抗抑郁藥(2.6 mg/Kg)組、化療聯(lián)合中藥組;造抑郁模型的同時給藥,給藥完成后檢測上述指標。結(jié)果:1.與空白組比較,BCRD組小鼠糖水消耗明顯降低(P0.01);新奇攝食實驗中首次攝食耗時明顯增加(P0.05);懸尾實驗中不動時間明顯上升(P0.01或P0.05);曠場實驗中水平運動與垂直運動明顯減少(P0.01或P0.05);腫瘤標物CA15-3、CA125和CEA的表達顯著升高(P0.01);單胺類神經(jīng)遞質(zhì)NE、DA和5-HT均明顯下降(P0.01);HPA軸相關(guān)指標CORT、ACTH和CRH明顯升高(P0.01或P0.05);HE染色發(fā)現(xiàn)海馬、腎上腺和腫瘤出現(xiàn)明顯病理改變;NR2A、NR2B和Ca MKⅡ基因的表達明顯升高,CREB基因的表達明顯降低(P0.01)。2.與空白比較,BCRD模型小鼠各項指標均出現(xiàn)明顯異常。與模型組比較,中藥復(fù)方逍遙抗癌解郁方組小鼠糖水消耗明顯升高,探索欲望明顯加強,行為絕望狀態(tài)顯著改善(P0.01或P0.05);單胺類神經(jīng)遞質(zhì)DA和NE的表達顯著升高(P0.01或P0.05);HPA軸相關(guān)指標CORT、ACTH和CRH顯著降低(P0.01);海馬損傷和腎上腺功能亢進得到緩解;NR2A、NR2B、Ca MKⅡ和CREB基因的表達趨于正常(P0.01);化療聯(lián)合中藥組乳腺腫瘤細胞出現(xiàn)大面積壞死,腫瘤瘤重和瘤體積明顯降低(P0.01或P0.05),腫瘤標物CA15-3、CA125和CEA的表達顯著降低(P0.01或P0.05)。結(jié)論:1.采用腋下注射乳腺癌細胞聯(lián)合背部皮下注射皮質(zhì)酮的復(fù)合造模方法,初步成功復(fù)制了BCRD動物模型。2.結(jié)合BCRD的臨床特征,采用糖水消耗、曠場實驗、新奇攝食實驗、懸尾實驗,腫瘤標志物CA153、CA125和CEA,單胺類神經(jīng)遞質(zhì)5-HT、DA和NE的含量和海馬和乳腺腫瘤病理結(jié)構(gòu)等一系列指標檢測,可建立一套乳腺癌癌并發(fā)抑郁癥動物模型評價體系。3.逍遙抗癌解郁方可明顯改善BCRD小鼠的抑郁行為,上調(diào)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)高分泌,輔助化療藥物減低腫瘤標志物表達和抗腫瘤生長,其作用可能與保護海馬損傷和逆轉(zhuǎn)HPA軸功能亢進,改變NR2A、NR2B、Ca MKⅡ和CREB基因表達有關(guān)。
【圖文】：

腫瘤離體后肉眼下觀察可見，乳腺腫瘤呈不規(guī)則的長橢圓形、球形或結(jié)節(jié)形，外表有完整的包膜包被，顏色為肉紅色，有豐富的血管包裹，部分腫瘤分化生長成多個瘤體，或者有黑色的壞死區(qū)，質(zhì)硬。結(jié)果見圖1。注：A.乳腺癌組 B.BCRD 組圖 1 各組小鼠乳腺腫瘤肉眼形態(tài)特征3.1.3 光鏡下小鼠乳腺腫瘤病理檢測結(jié)果光鏡下觀察小鼠乳腺腫瘤結(jié)構(gòu)，乳腺癌組和 BCRD 模型組腫瘤細胞排列緊密，壞死少，核質(zhì)比大，細胞形態(tài)不規(guī)則，間質(zhì)與實質(zhì)界限不清，間質(zhì)可見新生血管，偶可見腫瘤細胞侵入血管造成的血栓，400 倍可見明顯的核分裂現(xiàn)象；與乳腺癌組比較，BCRD 組腫瘤細胞生長更加密集。結(jié)果見圖 2。注：A.乳腺癌組 B.BCRD 組圖 2 各組小鼠乳腺腫瘤病理染色結(jié)果（A1，B1：×40；A2，B2：×400）3.2 腫瘤標志物檢測結(jié)果與空白組比較

注：A.乳腺癌組 B.BCRD 組圖 2 各組小鼠乳腺腫瘤病理染色結(jié)果（A1，B1：×40；A2，B2：×400）3.2 腫瘤標志物檢測結(jié)果與空白組比較，抑郁組 CA153，，乳腺癌組 CA153 和 CA125，以及 BCRD
【學位授予單位】：湖南中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R285.5;R-332

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 楊振磊;張四喜;黃桂華;;抗腫瘤藥紫杉醇載體的研究進展[J];中國生化藥物雜志;2015年09期

2 慕磊;孫建緒;;抑郁癥發(fā)病機制與抗抑郁藥物作用靶標[J];國際藥學研究雜志;2015年04期

3 劉密花;;抑郁癥藥物治療進展[J];世界最新醫(yī)學信息文摘;2015年61期

4 任秀英;;紫杉醇脂質(zhì)體用于宮頸癌患者術(shù)后放化療中的療效觀察[J];實用癌癥雜志;2015年07期

5 楊爽;李心樂;張平;;乳腺癌骨轉(zhuǎn)移治療的藥物研究進展[J];中國民康醫(yī)學;2015年14期

6 楊敏;康洪鈞;戴曉暢;;抑郁癥的發(fā)病機制與治療進展[J];四川生理科學雜志;2015年03期

7 張繪宇;趙玉男;王中立;;慢性皮質(zhì)酮注射對小鼠抑郁樣行為及腦糖原水平的影響[J];中國病理生理雜志;2015年05期

8 亢俊俊;陶晶;仇劍];;HPA軸與抑郁癥關(guān)系的研究進展[J];醫(yī)學臨床研究;2015年04期

9 戴宏宇;李蘇宜;馬國棟;萬明月;徐玲;夏春偉;權(quán)琳;王毅;陳文萍;;7種β-微管蛋白同型在非小細胞肺癌中的表達及其和紫杉類藥物敏感性的研究[J];臨床肺科雜志;2015年03期

10 張董曉;劉艷;李桃花;鐘馨;李巍;趙立娜;李以良;黃巧;;中醫(yī)古籍“乳巖”證治淺析[J];湖南中醫(yī)雜志;2014年06期

本文編號：2591090