【摘要】：目的闡明疏風(fēng)活血方在體外對(duì)黑素代謝的影響;探索自噬在黑素代謝中的作用;探尋自噬在疏風(fēng)活血方調(diào)節(jié)黑素代謝的作用。方法使用L-Dopa法染色鑒定黑素細(xì)胞,每日觀察細(xì)胞形態(tài);使用CCK-8法測(cè)定細(xì)胞增殖;使用NaOH法測(cè)定黑素合成;使用細(xì)胞裂解法檢測(cè)TYR活性;使用Westernblot法細(xì)胞檢測(cè)自噬相關(guān)蛋白Beclin1和LC-3Ⅱ表達(dá)。結(jié)果1.與C組相比,疏風(fēng)活血方對(duì)體外培養(yǎng)的B16細(xì)胞增殖有抑制作用(P0.05),同濃度RS組與R組相比,B16的細(xì)胞增殖率更低,但兩者沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);疏風(fēng)活血方對(duì)酪氨酸酶活性及黑素合成起促進(jìn)作用(P0.05),同濃度RS組與R組相比,B16的酪氨酸酶活性及黑素黑素含量更高,但兩者沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);雷帕霉素對(duì)體外培養(yǎng)的B16細(xì)胞增殖有抑制作用(P0.05);對(duì)酪氨酸酶活性及黑素合成起促進(jìn)作用(P0.05);疏風(fēng)活血方及雷帕霉素組均能上調(diào)自噬相關(guān)蛋白LC3B及Beclin1的含量,上調(diào)兩蛋白的作用依次為0.98mg/ml S組、0.98mg/ml RS組及Rap 50組。2.與C組相比,疏風(fēng)活血方對(duì)體外培養(yǎng)的正常人表皮黑素細(xì)胞的增殖有抑制作用(P0.05),同濃度RS組與R組相比,黑素細(xì)胞的細(xì)胞增殖率更高,但兩者沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);S組各濃度藥物對(duì)酪氨酸酶活性在低濃度時(shí)呈促進(jìn)作用(P0.05);在中高濃度時(shí)呈抑制作用,但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);中低濃度S組對(duì)黑素細(xì)胞黑素合成有促進(jìn)作用(P0.05),中濃度(0.49mg/ml)S組對(duì)黑素合成無(wú)明顯影響(P0.05),高濃度(0.98mg/ml)S組對(duì)黑素合成呈抑制作用(P0.05)。同濃度RS組與R組相比,黑素含量較S組增加,但兩者沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);各濃度雷帕霉素對(duì)體外培養(yǎng)的正常人表皮黑素細(xì)胞的細(xì)胞增殖有促進(jìn)作用(P0.05);對(duì)酪氨酸酶活性及黑素合成均起促進(jìn)作用(P0.05);疏風(fēng)活血方及雷帕霉素均能上調(diào)自噬相關(guān)蛋白LC3B及Beclin1,上調(diào)兩蛋白的作用依次為0.25mg/mlS組、0.25mg/ml RS組Rap 50組。結(jié)論1.疏風(fēng)活血方可能通過(guò)自噬途徑對(duì)體外培養(yǎng)的鼠B16黑素瘤細(xì)胞黑素代謝起調(diào)節(jié)作用,對(duì)其細(xì)胞增殖有抑制作用;對(duì)酪氨酸酶活性及黑素合成起促進(jìn)作用;能上調(diào)自噬相關(guān)蛋白LC3B、Beclin1。2.疏風(fēng)活血方能通過(guò)自噬途徑對(duì)體外培養(yǎng)的正常人表皮黑素細(xì)胞黑素代謝起調(diào)節(jié)作用,對(duì)其細(xì)胞增殖有抑制作用;對(duì)酪氨酸酶活性及黑素合成主要起促進(jìn)作用;能上調(diào)自噬相關(guān)蛋白LC3B及Beclin1。3.自噬誘導(dǎo)劑雷帕霉素能對(duì)兩細(xì)胞模型黑素代謝起調(diào)節(jié)作用,對(duì)B16細(xì)胞增殖起抑制作用,對(duì)正常人表皮黑素細(xì)胞增殖起促進(jìn)作用;對(duì)兩細(xì)胞模型的酪氨酸酶活性和黑素合成均起促進(jìn)作用,并能上調(diào)自噬相關(guān)蛋白LC3B和Beclin1。
【圖文】：

邐第二章疏風(fēng)活血方及自嗤誘導(dǎo)劑雷帕霉素對(duì)黑素代謝的作用邐逡逑０．２５邐０．３４±０．０５＊邐６８．５２±６．８４＊逡逑０．４９邐０．２８±０．０１＊Ａ邐５６．８３土邋５．３８＊逡逑０．９８邐０．２７士邋０．０３＊Ａ邐５６．３５土邋７．３２＊逡逑１．９６邐０．２５±０．０３＊Ａ邐５１．１７邋士邋３．６０＊逡逑Ｒ邐５０ｎＭ邐０．３６邋士０．０２＊邐７２．４０土邋４．９０＊逡逑１００ｎＭ邐０．２９邋土邋０．０５＊邐５８．５８士邋７．４１邋＊逡逑２００ｎＭ邐０．３１邋土０．０５＊邐６２．６０土邋６．９０＊逡逑Ｂｌａｎｋ邋ｃｏｎｔｒｏｌ邐０邐０．４９土０．０３邐１００．００士０．００逡逑＊Ｐ＜０．０５邋ｃｏｍｐａｒｅｄ邋ｗｉｔｈ邋ｔｈｅ邋ｂｌａｎｋ邋ｃｏｎｔｒｏｌ邋ｇｒｏｕｐ；ＡＰ＜０．０５，，ＲＳ邋ｇｒｏｕｐ邋ｃｏｍｐａｒｅｄ邋ｗｉｔｈ邋ｔｈｅ邋ｓａｍｅ逡逑ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ邋ｏｆ邋Ｒ邋ｇｒｏｕｐ．逡逑８０－ｉ逡逑

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【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R285

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2590988