【摘要】：他克莫司是器官抑制患者需長期服用的一線免疫抑制劑,其治療窗窄,濃度過高時容易產(chǎn)生肝毒性。在我國,五酯片常與他克莫司配伍使用,以防治器官抑制患者可能出現(xiàn)的藥源性肝損傷。服用他克莫司后,患者免疫力下降,感染曲霉菌的風(fēng)險增加,因此對曲霉菌有很好抗菌活性的伏立康唑就成為與他克莫司聯(lián)合使用的首選藥物。伏立康唑與他克莫司合用不僅能治療器官移植患者高發(fā)的真菌感染,還能增加他克莫司的AUC;已有研究表明五酯片與他克莫司配伍使用,可以防治器官移植患者可能出現(xiàn)的藥源性肝損傷,此外,五酯片明顯增加他克莫司的AUC。然而目前幾乎沒有研究關(guān)注五酯片與伏立康唑合用時的藥物相互作用,這可能會給臨床上兩藥合用造成一定的困難。本研究考察了五酯片對大鼠體內(nèi)伏立康唑藥代動力學(xué)的影響,并對影響機制進行了進一步的探討,可為臨床上伏立康唑的合理用藥提供科學(xué)依據(jù)與參考。目的:建立準(zhǔn)確測定血漿中伏立康唑濃度LC-MS/MS的方法,用該方法在整體動物水平研究五酯片及主要成分對伏立康唑藥代動力學(xué)的影響,并探索五酯片影響伏立康唑藥代動力學(xué)的相關(guān)機制。方法:1.采用三重四級桿液相質(zhì)譜聯(lián)用儀建立了測定伏立康唑濃度的LC-MS/MS方法,按照SFDA的對檢測方法的要求,對該方法的專屬性、標(biāo)準(zhǔn)曲線、基質(zhì)效應(yīng)、回收率、精密度和穩(wěn)定性進行了考察。2.以SD雄性大鼠為動物模型,對照組和實驗組大鼠分別灌胃蒸餾水或五酯片或五酯片主要成分后注射或灌胃伏立康唑,在不同時間點采血,血漿經(jīng)處理后進樣,測伏立康唑濃度,用DAS藥動學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。3.在Caco-2單層細(xì)胞膜雙向轉(zhuǎn)運實驗中,在Transwell板的A板底部鋪一層Caco-2細(xì)胞,向?qū)嶒灲M的Transwell板的A板或B2中加入伏立康唑和不同濃度的五酯片提取物及其主要成分,向?qū)φ战M的Transwell板的A板或B2中加入伏立康唑,開始孵育,孵育結(jié)束后計算伏立康唑雙向轉(zhuǎn)運的滲透系數(shù),通過滲透系數(shù)計算外排率,比較不同濃度的五酯片提取物及其主要成分對伏立康唑外排率的影響,并與空白組伏立康唑外排率相比較。4.采用9種CYP450酶的特異性抑制劑為陽性對照劑,以9種CYP450酶的特異性底物為底物,在人肝微粒體中加入NADPH輔酶、特異性底物、特異性抑制劑或五酯片提取物或五酯片主要成分后反應(yīng)開始,反應(yīng)結(jié)束后,用HPLC-MS檢測不同代謝產(chǎn)物的量,通過比較加入抑制劑和不加抑制劑時代謝產(chǎn)物的量,計算抑制率。結(jié)果:1.所建立的LC-MS/MS方法靈敏度高,專屬性性好,標(biāo)準(zhǔn)曲線合理,基質(zhì)效應(yīng)15%,回收率范圍為87.2%~103.2%,批內(nèi)精密度8.03%,批間精密度4.14%,待測物在室溫放置,反復(fù)凍融,-20℃冰箱中長期保存過程中無明顯降解。2.與對照組相比,單次灌胃五酯片使大鼠體內(nèi)伏立康唑的AUC增加了80.2%(p0.05);連續(xù)14天灌胃五酯片使大鼠體內(nèi)伏立康唑的AUC增加了66.4%(p0.05)。與空白對照組相比,單次合用五味子醇乙、五味子甲素使灌胃給藥伏立康唑的AUC分別升高47.3%(p0.05)和44.3%(p0.05);使靜脈注射伏立康唑的AUC分別升高37.4%(p0.05)和47.5%(p0.05);連續(xù)14天灌胃五味子醇乙,五味子甲素使灌胃給藥伏立康唑AUC分別增加30.1%(p0.05)和22.5%(p0.05);而使注射給藥伏立康唑AUC分別升高29.3%(p0.05)和36.5%(p0.05)。3.與空白對照相比,五酯片及其主要成分可降低伏立康唑在Caco-2單層細(xì)胞膜雙向轉(zhuǎn)運實驗中的外排率。合用一系列濃度的五酯片提取物使伏立康唑的外排率從3.7下降到0.7(p0.05)。合用一系列濃度的五味子甲素、五味子醇乙分別使伏立康唑的外排率從3.7下降到0.6(p0.05)、1.0(p0.05)4.與空白對照相比,五酯片及其主要成分對常見CYP450酶活性均有一定程度的抑制作用,其中,對CYP2C19、CYP3A4的活性抑制作用較強,對CYP2C19半數(shù)抑制濃度(IC50)值小于625μg/m L;對CYP3A4半數(shù)抑制濃度(IC50)值小于39.1μg/m L。五味子甲素對CYP2C19的IC50值約為50μM;五味子醇乙對CYP3A4的IC50值6.25μM。結(jié)論:1.該方法靈敏度高,專屬性好,標(biāo)準(zhǔn)曲線合理,回收率高,穩(wěn)定性良好,可用于后續(xù)試驗中伏立康唑的濃度檢測。2.說明單次及長期合用五酯片或五酯片主要成分均可明顯升高大鼠體內(nèi)伏立康唑的AUC。3.另外五酯片對伏立康唑在小腸的吸收可能會產(chǎn)生一定的影響。4.說明五酯片影響伏立康唑藥動學(xué)的機制可能是抑制CYP2C19和CYP3A4的活性。
【圖文】：

伏立康唑結(jié)構(gòu)

伏立康唑和D3-伏立康唑的氫加合物全掃描質(zhì)譜圖
【學(xué)位授予單位】：廣東藥科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 Nazli Samadi;Hassan Mozaffari-Khosravi;Masoud Rahmanian;Mohsen Askarishahi;;Effects of bee propolis supplementation on glycemic control,lipid profile and insulin resistance indices in patients with type 2 diabetes:a randomized,double-blind clinical trial[J];Journal of Integrative Medicine;2017年02期

2 Li Bo;Zhao Baosheng;Liu Yang;Tang Mingmin;Lǚe Beiran;Luo Zhiqiang;Zhai Huaqiang;;Herb-drug enzyme-mediated interactions and the associated experimental methods: a review[J];Journal of Traditional Chinese Medicine;2016年03期

3 Romeo-Gabriel Mihil;;Voriconazole and the liver[J];World Journal of Hepatology;2015年14期

4 韓伯楊;姚玉紅;;中西藥物合用的藥動學(xué)相互作用及機制[J];醫(yī)學(xué)綜述;2014年16期

5 周延坤;;中西藥結(jié)合用藥造成不良反應(yīng)因素及防治對策分析[J];亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥;2014年13期

6 李亞萍;張明昊;;中西藥合用的現(xiàn)狀及展望[J];中醫(yī)藥管理雜志;2013年06期

7 閆秀峰;倪青;王利芬;劉保延;;中藥西用和中西藥合用的現(xiàn)狀和趨勢[J];中醫(yī)雜志;2012年21期

8 桑曉梅;;淺談中西藥物臨床用藥及配伍[J];新疆中醫(yī)藥;2009年04期

9 劉冉;李方潔;梁日欣;王嵐;王怡薇;;銀杏葉提取物對辛伐他汀藥物代謝影響的研究[J];中國中藥雜志;2009年12期

10 趙航;;中西藥合用的注意事項[J];中國社區(qū)醫(yī)師(醫(yī)學(xué)專業(yè)半月刊);2008年12期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前2條

1 位華;五酯膠囊的藥代動力學(xué)及與他克莫司相互作用研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2010年

2 雷和平;銀杏葉提取物及貫葉連翹對伏立康唑和安非他酮藥代動力學(xué)的影響及其在中草藥—藥物相互作用中的意義[D];中南大學(xué);2009年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 熊友健;當(dāng)歸提取物及佛手柑內(nèi)酯對伏立康唑和伊曲康唑體外細(xì)胞轉(zhuǎn)運的影響[D];中南大學(xué);2011年

，

本文編號：2588936