【摘要】：通過(guò)全國(guó)第四次中藥資源普查對(duì)洮南市中藥資源進(jìn)行了系統(tǒng)性整理,并在普查過(guò)程中發(fā)現(xiàn)了蘊(yùn)藏量較大的硬毛粗蓋孔菌,本文對(duì)其進(jìn)行了生藥學(xué)研究。第一篇綜述部分,通過(guò)查閱資料對(duì)全國(guó)性中藥資源普查以及洮南市中藥資源現(xiàn)狀進(jìn)行了闡述,同時(shí)對(duì)硬毛粗蓋孔菌所在屬及其近緣屬進(jìn)行了化學(xué)成分、藥理作用和馴化栽培技術(shù)的綜述。第二篇研究?jī)?nèi)容分為六部分,即洮南市中藥資源調(diào)查報(bào)告;硬毛粗蓋孔菌子實(shí)體的菌種鑒定;硬毛粗蓋孔菌的無(wú)機(jī)元素含量和粗多糖含量的測(cè)定;硬毛粗蓋孔菌的化學(xué)成份分離及鑒定;硬毛粗蓋孔菌子實(shí)體提取物抑制H22荷瘤小鼠腫瘤活性研究;硬毛粗蓋孔菌馴化栽培的研究。第一章,通過(guò)第四次中藥資源普查對(duì)洮南市的藥用植物(菌物)資源進(jìn)行了為期三年的實(shí)地調(diào)查研究,采用全球定位系統(tǒng)(GPS)和樣地調(diào)查相結(jié)合的方式獲取相關(guān)資料,掌握當(dāng)?shù)匾吧幬镔Y源情況,對(duì)其藥用植物(菌物)多樣性進(jìn)行了研究,并對(duì)如何開(kāi)發(fā)利用中藥資源提出了建議。本次野外調(diào)查研究共采集鑒定出洮南市野生藥用植物235種,隸屬于49科,其中,國(guó)家重點(diǎn)調(diào)查品種41種,隸屬20科;國(guó)家普遍調(diào)查品種139種,隸屬于34科;省重點(diǎn)調(diào)查品種41種,隸屬于29科;省次重點(diǎn)調(diào)查品種14種,隸屬于8科。首次對(duì)洮南市的藥用真菌種類進(jìn)行了記錄,共17種。同時(shí)采集到蘊(yùn)藏量較大的一種野生菌物資源,對(duì)其進(jìn)行下一步研究。第二章,結(jié)合普查過(guò)程中采集的野生菌子實(shí)體的形態(tài)特征,通過(guò)ITS測(cè)序后,利用GenBank BLAST(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)進(jìn)行比對(duì),得出結(jié)論該菌種為擔(dān)子菌亞門、非褶菌目、多孔菌科、粗蓋孔菌屬、硬毛粗蓋孔菌。第三章,對(duì)野外采集的硬毛粗蓋孔菌子實(shí)體進(jìn)行了無(wú)機(jī)元素含量和粗多糖含量的測(cè)定,為硬毛粗蓋孔菌的營(yíng)養(yǎng)評(píng)價(jià)和安全性評(píng)價(jià)提供科學(xué)依據(jù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:野生硬毛粗蓋孔菌子實(shí)體的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較高,多糖含量為7.82±1.28%;通過(guò)對(duì)無(wú)機(jī)元素含量測(cè)定結(jié)果的分析,該菌具有一定的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。第四章,對(duì)硬毛粗蓋孔菌的子實(shí)體進(jìn)行了化學(xué)成份分離及鑒定,分離出5種化合物,其中1-甲基-18-乙基-9-烯-1,18-二酯、24R-5α,8α-過(guò)氧化麥角甾-6,22-二烯-3β-醇、9,12-十八烷二烯酸甲酯、木蠟酸、22E,24R-麥角甾-7,22-二烯-3β-醇均為首次在硬毛粗蓋孔菌中分離得到,并對(duì)硬毛粗蓋孔菌石油醚提取物進(jìn)行了GC-MS分析,結(jié)果顯示石油醚提取物中含有麥角甾-5,24(28)-烯-3-酮、豆甾醇、6-去氫黃體酮等28種化合物。第五章,對(duì)硬毛粗蓋孔菌子實(shí)體不同提取物的抗腫瘤活性進(jìn)行篩選。通過(guò)建立H22荷瘤小鼠腫瘤移植模型,研究硬毛粗蓋孔菌子實(shí)體的石油醚提取物、二氯甲烷提取物、乙酸乙酯提取物、甲醇提取物以及水提取物等五種提取物的高、中、低劑量組對(duì)H22荷瘤小鼠的抑瘤作用,并對(duì)H22荷瘤小鼠進(jìn)行抑瘤率、體質(zhì)量、胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)、肝臟指數(shù)、腎臟指數(shù)進(jìn)行了考察。對(duì)小鼠腫瘤、脾臟、腎臟進(jìn)行了組織病理學(xué)檢查,對(duì)血清中的細(xì)胞因子IL-2、IL-4、IFN-γ及TNF-α的含量進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明:各組分均有抑瘤效果,其中乙酸乙酯提取物中劑量組(1000mg/kg)抑瘤效果最佳與陰性對(duì)照組比較有極顯著差異(P0.01),并且這組的H22荷瘤小鼠血清中IL-2的含量顯著增加,同時(shí)腫瘤細(xì)胞通過(guò)HE染色后,可觀察到出現(xiàn)壞死面積增大,與抑制腫瘤活性具有相關(guān)性。第六章,本研究利用單因素試驗(yàn)對(duì)溫度、秸稈與楊樹(shù)比例、料水比進(jìn)行了篩選。最后通過(guò)正交試驗(yàn)選出秸稈利用率最大、發(fā)酵速度最快的條件。并首次通過(guò)固體發(fā)酵培育出硬毛粗蓋孔菌的子實(shí)體。通過(guò)試驗(yàn)得到硬毛粗蓋孔菌子實(shí)體最優(yōu)培養(yǎng)條件為:溫度35℃、秸稈:楊樹(shù)=5:5、料水比2:5。
【圖文】：

■闊葉林■草甸■草原■樣方套■樣地■沼澤■縣邊界圖 1.1 代表區(qū)域調(diào)查位置情況Fig.1.1 Investigation on the representative area location1.3 中藥材種類鑒定整理為期 4 年的調(diào)查我們共采集藥用植物 235 種（附錄 A），隸屬于 49 科，其中，國(guó)重點(diǎn)調(diào)查品種 41 種，隸屬 20 科；國(guó)家普遍調(diào)查品種 139 種，隸屬于 34 科；省重點(diǎn)調(diào)品種 41 種，隸屬于 29 科；省次重點(diǎn)調(diào)查品種 14 種，隸屬于 8 科。詳見(jiàn)表 1-1。采集藥菌物 17 種（附錄 A），蘊(yùn)藏量較大的野生菌種 2 種，詳見(jiàn)表 1-2。藥用植物拉丁名參照《北植物檢索表》[63]和《中國(guó)長(zhǎng)白山植物志》[64]。菌物拉丁名參考《多彩的蘑菇世界》[6和《中國(guó)真菌總匯》[66]。鑒定后的植物標(biāo)本存入吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)中藥材學(xué)院，為科研教提供基礎(chǔ)性研究資料。其中與《洮南市志》[59]（1988-2000）相比，首次對(duì)真菌種類進(jìn)記錄。

針對(duì)大型真菌的鑒定方法從最初的形態(tài)學(xué)鑒定到近幾年分子生物學(xué)鑒定方法的過(guò)程，使真菌的鑒定結(jié)果更加科學(xué)和客觀。真菌核糖體基因的 ITS 區(qū)域有很多種擴(kuò)增引物，其中ITS1、ITS2、ITS4、ITS5可用于大多數(shù)子囊菌和擔(dān)子菌[67]；ITS1-F和 ITS4-B是能顯著提高真菌和擔(dān)子菌特異性的的特異引物[68]。2015 年 7 月，在進(jìn)行洮南中藥資源普查過(guò)程中，在楊樹(shù)林中的楊樹(shù)樁上發(fā)現(xiàn)了大量的野生菌，經(jīng)初步鑒定為多孔菌科粗毛蓋菌屬藥用菌，疑似硬毛粗蓋孔菌，為了進(jìn)一步對(duì)其化學(xué)成份分析、藥理活性及其子實(shí)體馴化栽培等進(jìn)行研究，，我們對(duì)該菌進(jìn)行了分類學(xué)及分子生物學(xué)的鑒定。2.1 試驗(yàn)材料、儀器與試劑2.1.1 試驗(yàn)材料2015 年 7 月采集于吉林省洮南市楊樹(shù)樹(shù)樁上（E122°27′35.72″,N45°03′54.31″,海拔165.4）（圖 2.1），經(jīng)子實(shí)體組織分離后得到菌絲體，保存于吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)食藥用菌工程中心。
【學(xué)位授予單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R281.4

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 孫飛;陶正中;周忠海;呂小婷;陳娜云;陳玲;姚仁南;;云芝多糖增強(qiáng)人NK細(xì)胞殺傷功能的體外研究[J];生物醫(yī)學(xué)工程與臨床;2017年02期

2 曹晉良;康曼;韓建榮;;一株野生毛頭鬼傘的分離鑒定及其生物學(xué)特性研究[J];山西農(nóng)業(yè)科學(xué);2017年01期

3 邱蓉麗;吳玉蘭;邵霞;樂(lè)巍;;喜熱靈芝子實(shí)體化學(xué)成分研究[J];中藥材;2016年11期

4 王旭;張波;葉建強(qiáng);程國(guó)輝;李玉;;基于異地保育對(duì)吉林省東部山區(qū)木生真菌調(diào)查[J];菌物研究;2016年03期

5 王翠紅;湯華;張悅;莊春林;孫鵬;李鐵軍;張文;;珊瑚共附生毛殼屬真菌中的麥角甾醇成分及腫瘤干細(xì)胞增殖抑制活性[J];中國(guó)海洋藥物;2016年03期

6 王婷;包海鷹;圖力古爾;李玉;;粗毛纖孔菌固體發(fā)酵菌粉對(duì)H_(22)荷瘤小鼠抗腫瘤作用研究[J];中藥材;2016年02期

7 趙祥宇;;我國(guó)秸稈焚燒的現(xiàn)狀危害與禁燒管理對(duì)策[J];改革與開(kāi)放;2016年04期

8 田國(guó)成;王鈺;孫路;施明新;吳發(fā)啟;;秸稈焚燒對(duì)土壤有機(jī)質(zhì)和氮磷鉀含量的影響[J];生態(tài)學(xué)報(bào);2016年02期

9 孫琦;黃威;包海鷹;圖力古爾;李玉;;紅緣擬層孔菌固體發(fā)酵產(chǎn)物體內(nèi)抗腫瘤和抗氧化作用研究[J];菌物學(xué)報(bào);2016年08期

10 張桐;張雷;張春蘭;徐濟(jì)責(zé);;寬鱗大孔菌菌絲體的生物學(xué)特性及胞外粗提物對(duì)DPPH自由基的清除和抑菌作用[J];上海農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào);2015年06期

相關(guān)會(huì)議論文 前1條

1 陳月紅;曹慶華;陶向;張義正;;粗毛栓菌轉(zhuǎn)錄組全序列測(cè)定和分析[A];2012年第五屆全國(guó)微生物遺傳學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2012年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前2條

1 李雨茵;;中藥資源普查迫在眉睫[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2009年

2 何志謙;;缺鐵對(duì)人體健康的影響[N];消費(fèi)日?qǐng)?bào);2001年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 李海蛟;中國(guó)栓孔菌屬及近緣屬的分類與系統(tǒng)發(fā)育研究[D];北京林業(yè)大學(xué);2013年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前6條

1 蘇玉龍;高效降解煙稈菌株篩選及其特性研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2016年

2 杜婧;天然蜂蠟理化特性及其有效成分的提純研究[D];長(zhǎng)春工業(yè)大學(xué);2015年

3 李玲艷;云芝的化學(xué)成分及其藥理活性的研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

4 高磊;新疆南疆野生雙孢蘑菇的鑒定、生物學(xué)特性及其馴化栽培的研究[D];塔里木大學(xué);2012年

5 梁偉;山野木層孔菌化學(xué)成分及抗腫瘤活性研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

6 劉超;紫芝和松杉靈芝化學(xué)成分研究及靈芝三萜酸的含量測(cè)定[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

本文編號(hào)：2588008