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尾懸吊模擬失重對(duì)大鼠胰腺分泌功能及其組織中Hsp70表達(dá)的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-09-08 19:02

  本文關(guān)鍵詞:尾懸吊模擬失重對(duì)大鼠胰腺分泌功能及其組織中Hsp70表達(dá)的影響


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【摘要】:背景和目的:近年研究發(fā)現(xiàn),失重或模擬失重對(duì)人體呼吸、循環(huán)、內(nèi)分泌、生殖等系統(tǒng)產(chǎn)生較大影響,甚至導(dǎo)致病理性改變。胰腺作為較大的分泌器官之一,亦會(huì)受到影響。本實(shí)驗(yàn)研究尾懸吊模擬失重應(yīng)激對(duì)大鼠胰腺分泌功能及胰腺組織中Hsp70表達(dá)的影響。 研究方法:(1)成年Wistar大鼠64只,按模擬失重時(shí)相分8組(n=8),分別為6h、12h、1d、2d、3d、5d、1wk及0h(對(duì)照組),采用尾懸吊法建立模擬失重大鼠模型。(2)各組實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,腹腔注射水合氯醛(300mg/kg)將實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照動(dòng)物麻醉,碘伏局部消毒,外周靜脈取血備用,剖腹取胰體尾部組織保存于-80°冰箱中,胰頭組織浸于10%甲醛中固定。(3)應(yīng)用放射免疫分析法和生化法測(cè)定大鼠靜脈血糖、胰島素、胰高血糖素、C肽、血清淀粉酶及脂肪酶值。(4)應(yīng)用免疫組化、Western-blot及RT-PCR技術(shù)檢測(cè)胰腺組織中Hsp70蛋白及Hsp70mRNA表達(dá)。 結(jié)果:(1)失重Wistar大鼠血糖值波動(dòng)明顯,表現(xiàn)為先升后降再升再回落的特點(diǎn),血清胰島素水平短期內(nèi)升高,6h形成峰值,隨后與C肽同期降低,3d時(shí)降至低谷,同期血清胰高血糖素水平高于正常值;在尾懸吊早期,血清淀粉酶和脂肪酶呈一過(guò)性升高;各項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)均不同程度的表現(xiàn)為早期變化明顯、后期趨向恢復(fù)的特點(diǎn)。(2)免疫組化結(jié)果顯示,Hsp70蛋白陽(yáng)性表達(dá)為棕褐色,實(shí)驗(yàn)各組大鼠胰腺組織中均有Hsp陽(yáng)性表達(dá);懸吊6h 2d各組大鼠胰腺組織染色變深,尤其胰島細(xì)胞的胞核在模擬失重早期即深染,期間腺泡細(xì)胞的胞漿及胰島細(xì)胞的泡漿染色亦增強(qiáng)。懸吊3d 5d組大鼠的胰腺組織中Hsp蛋白染色又逐漸變淺。陰性對(duì)照?qǐng)D組的胰島細(xì)胞和腺泡細(xì)胞均未見(jiàn)著色。(3)Western-blot分析結(jié)果顯示,Hsp70蛋白在各實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組大鼠胰腺組織中均有不同程度的表達(dá),懸吊6h組Hsp70蛋白表達(dá)水平顯著升高,12h、1d、2d組的Hsp70蛋白持續(xù)高表達(dá),與對(duì)照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),,3d后Hsp70表達(dá)水平下降,3d、5d、1wk三組動(dòng)物的Hsp70表達(dá)水平與對(duì)照組相比基本持平。(4)RT-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示,模擬失重各組及對(duì)照組大鼠胰腺組織中均有Hsp70mRNA表達(dá),表現(xiàn)為早期上升后期回落的特點(diǎn)。尾懸吊6h大鼠胰腺組織中Hsp70mRNA表達(dá)水平即升高,與對(duì)照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。12h、1d、2d各組的Hsp70mRNA表達(dá)逐漸回落至正常水平,3d組降至最低點(diǎn),其后又出現(xiàn)上升趨勢(shì)。 結(jié)論:(1)尾懸吊模擬失重能引起大鼠胰腺分泌功能的變化,其中以血糖波動(dòng)最明顯,提示包括胰島β細(xì)胞和胰腺腺泡細(xì)胞在內(nèi)的胰腺組織結(jié)構(gòu)和功能在失重應(yīng)激過(guò)程中受到一定損傷。(2)模擬失重導(dǎo)致大鼠胰腺組織中Hsp70蛋白和Hsp70mRNA表達(dá)發(fā)生明顯變化,在失重應(yīng)激損傷與失重應(yīng)激耐受或適應(yīng)過(guò)程中Hsp70可能發(fā)揮重要作用。
【關(guān)鍵詞】:模擬失重 胰腺 分泌功能 Hsp70 Hsp70mRNA
【學(xué)位授予單位】:安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類(lèi)號(hào)】:R85
【目錄】:
  • 中英文縮略詞對(duì)照表5-7
  • 摘要7-9
  • Abstract9-11
  • 前言11-13
  • 第一部分 尾懸吊模擬失重對(duì)大鼠胰腺分泌功能的影響13-21
  • 引言13
  • 材料與方法13-15
  • 結(jié)果15-19
  • 討論19-21
  • 第二部分 尾懸吊模擬失重大鼠胰腺組織中Hsp70表達(dá)變化21-33
  • 引言21
  • 材料與方法21-26
  • 結(jié)果26-30
  • 討論30-33
  • 全文結(jié)論33-34
  • 參考文獻(xiàn)34-37
  • 附錄37-41
  • 致謝41-42
  • 綜述42-51
  • 參考文獻(xiàn)49-51

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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本文編號(hào):815748

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