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模擬失重對大鼠背根神經節(jié)形態(tài)和GDNF的影響

發(fā)布時間:2017-09-03 03:29

  本文關鍵詞:模擬失重對大鼠背根神經節(jié)形態(tài)和GDNF的影響


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【摘要】:目的觀察模擬失重環(huán)境下大鼠背根神經節(jié)(dorsal root ganglia, DRG)髓鞘形態(tài)學改變;探討尾部懸吊模擬失重對大鼠DRG內膠質細胞源性神經營養(yǎng)因子(Glial cell line-derived neurotrophic factor, GDNF)的影響;比較模擬失重下雌雄性大鼠DRG髓鞘形態(tài)學及GDNF變化的性別差異。方法模擬失重對大鼠DRG髓鞘的影響及性別因素的差異:選取健康成年Sprague-Dawley大鼠160只,其中雄性80只,雌性80只,隨機分為正常對照(NC)組(n=80,雄性40只,雌性40只)和尾部懸吊(HU)組(n=80,雄性40只,雌性40只)。HU組通過懸吊大鼠尾部,后肢不負重來模擬失重狀態(tài),NC組不做任何處理。4周后,通過手術摘取各組Sprague-Dawley雌雄大鼠右側腰5背根神經節(jié)。HE染色觀察各組大鼠DRG細胞的大體形態(tài),免疫組化下觀測各組大鼠DRG髓鞘的情況,電鏡下觀察各組大鼠DRG髓鞘的超微結構。對雌雄大鼠之間的變化進行對比。模擬失重對大鼠DRG內GDNF的影響及性別因素的差異:選取健康成年Sprague-Dawley大鼠200只,其中雄性100只,雌性100只,隨機分為尾部懸吊(HU)組(n=100,雄性50只,雌性50只)和正常對照(NC)組(n=100,雄性50只,雌性50只)。按上述方法對各組大鼠進行模型建立,4周后摘取各組Sprague-Dawley大鼠右側腰5背根神經節(jié)。甲苯氨蘭染色觀察各組DRG內尼氏小體變化,電鏡下觀察各組大鼠DRG細胞內線粒體的微觀結構,免疫組化觀察GDNF含量的變化,Western-blot方法檢測GDNF的蛋白表達,RT-PCR檢測G DNF mRNA表達情況。對比雌雄大鼠之間的變化差異。結果1.HE染色結果顯示,與NC組相比,HU組背根經節(jié)細胞間隙輕度增寬,部分節(jié)細胞與衛(wèi)星細胞分離。髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein, MBP)免疫組化結果顯示,NC組DRG髓鞘MBP免疫組化染色及IOD值較HU組增加(雄性組P0.01,雌性組P0.001),退變的髓鞘堿性蛋白(degenerated myelin basic protein, Degen MBP)免疫組化顯示,NC組DRG髓鞘Degen MBP免疫組化染色及IOD值較HU組降低(雄性組P0.001,雌性組P0.001)。電鏡下可見HU組髓鞘板層結構變得紊亂、松散。2.甲苯氨蘭染色結果顯示,與NC組相比,HU組DRG內尼氏體染色淺,尼氏體變小,彌散分布。電鏡下可見HU組DRG內線粒體腫大、變形。免疫組化結果顯示,與NC組比較,HU組GDNF量及I OD值減少(雄性組P0.001,雌性組P0.001)。Western-blot結果顯示,HU組較NC組GDNF蛋白表達減少(雄性組P0.001,雌性組P0.001)。RT-PCR結果顯示,與NC組相比,HU組GDNFmRNA表達降低(雄性組P0.001,雌性組P0.01)。3.性別之間具有差異(P0.05)。結論1.模擬失重可引起大鼠DRG損傷,髓鞘發(fā)生退變性變化。2.模擬失重狀態(tài)下可引起大鼠DRG內尼氏小體形態(tài)發(fā)生變化,GDNF含量減少,GDNF蛋白表達及mRNA表達降低,DRG內線粒體發(fā)生損傷。3.性別不同,模擬失重引起的DRG損傷程度不同。
【關鍵詞】:模擬失重 背根神經節(jié) 動物模型 髓鞘 GDNF
【學位授予單位】:中國人民解放軍醫(yī)學院
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R856
【目錄】:
  • 中文摘要5-7
  • 英文摘要7-9
  • 前言9-13
  • 參考文獻11-13
  • 第一部分:模擬失重對大鼠背根神經節(jié)髓鞘形態(tài)的影響及性別因素的差異13-27
  • 引言13
  • 材料與方法13-16
  • 結果16-21
  • 討論21-23
  • 結論23-24
  • 參考文獻24-27
  • 第二部分:模擬失重對大鼠背根神經節(jié)內GDNF的影響及性別因素的差異27-37
  • 引言27
  • 材料與方法27-29
  • 結果29-34
  • 討論34
  • 結論34-36
  • 參考文獻36-37
  • 文獻綜述37-49
  • 參考文獻43-49
  • 攻讀學位期間發(fā)表文章情況49-51
  • 致謝51

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 王春雨;吳繼華;宋淑軍;張軍;景青萍;張建中;周金蓮;;尾懸吊模擬失重大鼠卵巢組織中缺氧誘導因子-1α表達變化[J];解放軍醫(yī)學雜志;2012年09期

2 印宗毅;陳東英;;模擬微重力對生物體機能影響的研究新進展[J];航空航天醫(yī)學雜志;2013年01期

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 王春雨;尾懸吊模擬失重對大鼠卵巢功能及其組織中HIF-1α表達的影響[D];安徽醫(yī)科大學;2012年

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本文編號:782614

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