模擬失重對大鼠背根神經(jīng)節(jié)形態(tài)和GDNF的影響
發(fā)布時間:2017-09-03 03:29
本文關(guān)鍵詞:模擬失重對大鼠背根神經(jīng)節(jié)形態(tài)和GDNF的影響
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【摘要】:目的觀察模擬失重環(huán)境下大鼠背根神經(jīng)節(jié)(dorsal root ganglia, DRG)髓鞘形態(tài)學(xué)改變;探討尾部懸吊模擬失重對大鼠DRG內(nèi)膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(Glial cell line-derived neurotrophic factor, GDNF)的影響;比較模擬失重下雌雄性大鼠DRG髓鞘形態(tài)學(xué)及GDNF變化的性別差異。方法模擬失重對大鼠DRG髓鞘的影響及性別因素的差異:選取健康成年Sprague-Dawley大鼠160只,其中雄性80只,雌性80只,隨機分為正常對照(NC)組(n=80,雄性40只,雌性40只)和尾部懸吊(HU)組(n=80,雄性40只,雌性40只)。HU組通過懸吊大鼠尾部,后肢不負(fù)重來模擬失重狀態(tài),NC組不做任何處理。4周后,通過手術(shù)摘取各組Sprague-Dawley雌雄大鼠右側(cè)腰5背根神經(jīng)節(jié)。HE染色觀察各組大鼠DRG細(xì)胞的大體形態(tài),免疫組化下觀測各組大鼠DRG髓鞘的情況,電鏡下觀察各組大鼠DRG髓鞘的超微結(jié)構(gòu)。對雌雄大鼠之間的變化進行對比。模擬失重對大鼠DRG內(nèi)GDNF的影響及性別因素的差異:選取健康成年Sprague-Dawley大鼠200只,其中雄性100只,雌性100只,隨機分為尾部懸吊(HU)組(n=100,雄性50只,雌性50只)和正常對照(NC)組(n=100,雄性50只,雌性50只)。按上述方法對各組大鼠進行模型建立,4周后摘取各組Sprague-Dawley大鼠右側(cè)腰5背根神經(jīng)節(jié)。甲苯氨蘭染色觀察各組DRG內(nèi)尼氏小體變化,電鏡下觀察各組大鼠DRG細(xì)胞內(nèi)線粒體的微觀結(jié)構(gòu),免疫組化觀察GDNF含量的變化,Western-blot方法檢測GDNF的蛋白表達(dá),RT-PCR檢測G DNF mRNA表達(dá)情況。對比雌雄大鼠之間的變化差異。結(jié)果1.HE染色結(jié)果顯示,與NC組相比,HU組背根經(jīng)節(jié)細(xì)胞間隙輕度增寬,部分節(jié)細(xì)胞與衛(wèi)星細(xì)胞分離。髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein, MBP)免疫組化結(jié)果顯示,NC組DRG髓鞘MBP免疫組化染色及IOD值較HU組增加(雄性組P0.01,雌性組P0.001),退變的髓鞘堿性蛋白(degenerated myelin basic protein, Degen MBP)免疫組化顯示,NC組DRG髓鞘Degen MBP免疫組化染色及IOD值較HU組降低(雄性組P0.001,雌性組P0.001)。電鏡下可見HU組髓鞘板層結(jié)構(gòu)變得紊亂、松散。2.甲苯氨蘭染色結(jié)果顯示,與NC組相比,HU組DRG內(nèi)尼氏體染色淺,尼氏體變小,彌散分布。電鏡下可見HU組DRG內(nèi)線粒體腫大、變形。免疫組化結(jié)果顯示,與NC組比較,HU組GDNF量及I OD值減少(雄性組P0.001,雌性組P0.001)。Western-blot結(jié)果顯示,HU組較NC組GDNF蛋白表達(dá)減少(雄性組P0.001,雌性組P0.001)。RT-PCR結(jié)果顯示,與NC組相比,HU組GDNFmRNA表達(dá)降低(雄性組P0.001,雌性組P0.01)。3.性別之間具有差異(P0.05)。結(jié)論1.模擬失重可引起大鼠DRG損傷,髓鞘發(fā)生退變性變化。2.模擬失重狀態(tài)下可引起大鼠DRG內(nèi)尼氏小體形態(tài)發(fā)生變化,GDNF含量減少,GDNF蛋白表達(dá)及mRNA表達(dá)降低,DRG內(nèi)線粒體發(fā)生損傷。3.性別不同,模擬失重引起的DRG損傷程度不同。
【關(guān)鍵詞】:模擬失重 背根神經(jīng)節(jié) 動物模型 髓鞘 GDNF
【學(xué)位授予單位】:中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R856
【目錄】:
- 中文摘要5-7
- 英文摘要7-9
- 前言9-13
- 參考文獻(xiàn)11-13
- 第一部分:模擬失重對大鼠背根神經(jīng)節(jié)髓鞘形態(tài)的影響及性別因素的差異13-27
- 引言13
- 材料與方法13-16
- 結(jié)果16-21
- 討論21-23
- 結(jié)論23-24
- 參考文獻(xiàn)24-27
- 第二部分:模擬失重對大鼠背根神經(jīng)節(jié)內(nèi)GDNF的影響及性別因素的差異27-37
- 引言27
- 材料與方法27-29
- 結(jié)果29-34
- 討論34
- 結(jié)論34-36
- 參考文獻(xiàn)36-37
- 文獻(xiàn)綜述37-49
- 參考文獻(xiàn)43-49
- 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況49-51
- 致謝51
【共引文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條
1 王春雨;吳繼華;宋淑軍;張軍;景青萍;張建中;周金蓮;;尾懸吊模擬失重大鼠卵巢組織中缺氧誘導(dǎo)因子-1α表達(dá)變化[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2012年09期
2 印宗毅;陳東英;;模擬微重力對生物體機能影響的研究新進展[J];航空航天醫(yī)學(xué)雜志;2013年01期
中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條
1 王春雨;尾懸吊模擬失重對大鼠卵巢功能及其組織中HIF-1α表達(dá)的影響[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2012年
,本文編號:782614
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