發(fā)布時間：2017-08-27 10:03

  本文關(guān)鍵詞：快速加減壓對大鼠肝臟糖皮質(zhì)激素受體作用的研究

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【摘要】：潛艇在平時和戰(zhàn)時均有可能因意外事故而沉沒,為了保存艇內(nèi)有生力量,必須組織潛艇艇員水下脫險。快速上浮脫險是一種新型先進的單人脫險技術(shù),它應(yīng)用不減壓潛水的原理,艇員經(jīng)過脫險艙快速加壓,待脫險艙內(nèi)壓力與艇外壓力平衡后,艇員離艇,迅速上浮出水,在水面等待援救。這種技術(shù)具有操作簡單,脫險深度大、潛水疾病發(fā)生率小等優(yōu)點。目前人體試驗最大脫險深度為183m。以往的研究結(jié)果顯示,模擬快速上浮后潛水員均存在不同程度的應(yīng)激反應(yīng)和表現(xiàn),心電圖顯示ST段壓低,血漿強啡肽、β-內(nèi)啡肽、CRH和ACTH水平升高,但其有關(guān)的深入改變研究甚少。糖皮質(zhì)激素受體(GR)是決定靶細胞對激素反應(yīng)性變化的關(guān)鍵大分子,其表達數(shù)量及親和力的異常是多種疾病和病理生理反應(yīng)的基礎(chǔ),而目前GR在脫險應(yīng)激中的變化規(guī)律尚未見報道。本研究的主要目的是:1. 建立快速加減壓大鼠模型;2. 觀察快速加減壓暴露后肝臟糖皮質(zhì)激素受體(GR)mRNA表達的變化規(guī)律;3. 結(jié)合組織病理和血清生化,探討機體對快速加減壓的應(yīng)激性生理或病理反應(yīng)。通過上述研究,從整體和細胞水平探討快速加減壓后機體應(yīng)激性反應(yīng)的機制,并為大深度快速上浮脫險醫(yī)學(xué)保障提供理論依據(jù)。 結(jié)果顯示: 1. 采用健康成年SD大鼠,當(dāng)以11.8m/s的速度勻速加壓至2.0MPa表壓并停留2s,隨即以2.5m/s的速度勻速減至常壓時,動物出艙后一般行為學(xué)無明顯改變,心前區(qū)Doppler氣泡音均為0級,說明建立了模擬艇員快速上浮脫險的快速加減壓大鼠模型。 WP=7 2. 快速加減壓后1h大鼠肝臟乳酸脫氫酶(LDH)水平增高(P0.05),病理切片提示肝臟中央靜脈瘀血,其周圍肝細胞呈脂肪變性,輕重不等,說明快速加減壓暴露后肝臟有炎性損傷,提示出現(xiàn)了應(yīng)激反應(yīng)。 3. RT-PCR檢測肝組織GRmRNA,發(fā)現(xiàn)大鼠快速加減壓暴露后1h肝組織GRmRNA水平顯著降低,與正常對照組相比,差別有顯著性(p0.01);暴露后2h、4h GRmRNA水平上升,但仍低于正常對照組水平(p0.01);至暴露后24h,GRmRNA水平基本恢復(fù)到正常水平(p0.05)。 4. 采用β-actin作為內(nèi)參照,對電泳條帶進行密度定量,結(jié)果顯示:快速加減壓后1h GR條帶灰度值僅為β-actin條帶灰度值的2.8%;2h增高至9.3%;4h為15.8%;與對照組相比,均有顯著性差異(p0.05)。24h組GR條帶灰度值最高,約為β-actin的63.5%,與對照組(60.3%)相比無顯著性差異。 以上結(jié)果表明,快速加減壓暴露可引起大鼠顯著的應(yīng)激反應(yīng),導(dǎo)致血清LDH水平升高,肝臟GRmRNA表達水平快速下降;應(yīng)激過程中大量產(chǎn)生的糖皮質(zhì)激素可下調(diào)其相應(yīng)受體GR的轉(zhuǎn)錄合成,以此抑制多種炎性因子過度表達,防止細胞損傷。這種分子水平的調(diào)控平衡是應(yīng)激中細胞維持正常功能的基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：快速加減壓 糖皮質(zhì)激素受體 肝功能 反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類號】：R84
【目錄】：

• 本文常用英文縮略詞表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-14
• 材料與方法14-25
• 一、 實驗材料14-18
• (一) 主要試劑和藥品14-16
• (二) 主要實驗器材16-18
• (三) 實驗動物18
• 二、 實驗方法18-25
• (一) 動物模型的建立18-19
• (二) 快速加減壓后大鼠組織病理學(xué)檢查19-20
• (三) 快速加減壓后大鼠血清酶學(xué)檢查20-21
• (四) 快速加減壓后大鼠肝臟GRmRNA表達水平的檢測21-25
• 結(jié)果25-42
• 一、 大鼠快速加減壓模型的建立25-26
• 二、 快速加減壓暴露后大鼠重要臟器的形態(tài)學(xué)改變26-33
• 三、 快速加減壓暴露后血清學(xué)改變33-35
• 四、 快速加減壓暴露后肝臟GRmRNA表達水平的變化35-42
• (一) RNA抽提產(chǎn)物的鑒定35-37
• (二) PCR反應(yīng)條件的優(yōu)化37-39
• (三) 快速加減壓暴露后不同時段大鼠肝臟GRmRNA的表達39-42
• 討論42-50
• 結(jié)語50-51
• 參考文獻51-54
• 致謝54-55
• 綜述55-75

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本文編號：745239