發(fā)布時間：2017-07-31 20:10

  本文關(guān)鍵詞：模擬微重力效應(yīng)對MG-63細胞紡錘體結(jié)構(gòu)及MAD2的影響

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【摘要】： 空間環(huán)境復(fù)雜多樣,而對航天員影響最為嚴重的是持續(xù)的微重力環(huán)境以及空間輻射,已有的研究表明空間環(huán)境可以導(dǎo)致航天員出現(xiàn)生理性和病理性的多種變化。為了在細胞分子水平了解在空間環(huán)境對哺乳動物細胞的影響,本研究以人骨肉瘤MG-63細胞為研究材料,通過回轉(zhuǎn)器模擬微重力效應(yīng)24,48,72和96小時,從細胞以及分子水平對微重力生物學(xué)效應(yīng)進行研究。 研究結(jié)果表明在模擬微重力效應(yīng)下,細胞的增殖以及細胞周期都發(fā)生了相應(yīng)的改變,細胞的有絲分裂指數(shù)增高,細胞周期在G2/M期阻滯。細胞骨架顯示無序狀態(tài),細胞紡錘體和中心體結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,紡錘體多極率在模擬微重力24、48、72和96小時后從2.47%增加到3.48、4.51%、5.84%和8.11% ,同時t-檢驗分析表明在模擬微重力24小時后差異顯著(p0.05),在模擬微重力48、72和96小時后增加差異極顯著(p0.01),而剪切力對照組與地面對照組差異不顯著。伴隨著紡錘體多極率的增加,微重力72小時后,細胞的染色體眾數(shù)由61變?yōu)?2。為了揭示紡錘體檢驗點蛋白MAD2與紡錘體結(jié)構(gòu)和染色體眾數(shù)變化之間的關(guān)系,本研究采用了實時定量PCR以及Western blot的實驗技術(shù),研究了紡錘體檢驗點蛋白MAD2的變化。結(jié)果顯示在蛋白水平MAD2的表達有明顯增高,同時在RNA水平模擬微重力條件下紡錘體檢驗點蛋白基因mad2的表達也較之地面對照組有增加。
【關(guān)鍵詞】：細胞周期阻滯 模擬微重力效應(yīng) 紡錘體檢驗點 染色體眾數(shù) 有絲分裂指數(shù)
【學(xué)位授予單位】：哈爾濱工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號】：R85
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-8
• 第1章 緒論8-17
• 1.1 空間微重力環(huán)境對哺乳動物細胞的影響8-12
• 1.1.1 空間微重力對哺乳動物細胞增殖的影響8-9
• 1.1.2 空間微重力對細胞骨架的影響9-11
• 1.1.3 空間微重力對基因的表達和調(diào)控的影響11-12
• 1.2 哺乳動物細胞紡錘體檢驗點及其紡錘體檢驗點蛋白MAD2 的研究進展12-15
• 1.2.1 哺乳動物細胞紡錘體檢驗點的研究進展12-13
• 1.2.2 細胞紡錘體檢驗點蛋白MAD2 的研究進展13-15
• 1.3 課題研究的目的及意義15-16
• 1.3.1 研究的目的15
• 1.3.2 研究的意義15-16
• 1.4 課題研究的內(nèi)容16-17
• 第2章 實驗材料和方法17-24
• 2.1 實驗材料17-19
• 2.1.1 細胞系17
• 2.1.2 主要試劑、常用緩沖液及其他溶液17-18
• 2.1.3 哺乳動物細胞培養(yǎng)18-19
• 2.1.4 主要儀器設(shè)備19
• 2.1.5 主要軟件19
• 2.2 實驗方法19-23
• 2.2.1 實驗材料的處理19-20
• 2.2.2 細胞計數(shù)及細胞生長曲線的繪制20
• 2.2.3 有絲分裂指數(shù)檢測20-21
• 2.2.4 染色體眾數(shù)檢測21-22
• 2.2.5 流式細胞儀分析細胞周期的技術(shù)22
• 2.2.6 免疫熒光檢測細胞紡錘體及其多極情況22
• 2.2.7 QRT-PCR技術(shù)22
• 2.2.8 Western Blot技術(shù)22-23
• 2.3 本章小結(jié)23-24
• 第3章 模擬微重力效應(yīng)對MG-63 細胞增殖的影響24-31
• 3.1 模擬微重力效應(yīng)下MG-63 細胞的生長曲線24-25
• 3.2 模擬微重力效應(yīng)下MG-63 細胞的有絲分裂指數(shù)25-26
• 3.3 模擬微重力效應(yīng)下MG-63 細胞的細胞周期26-28
• 3.4 討論28-29
• 3.5 本章小結(jié)29-31
• 第4章 模擬微重力效應(yīng)對MG-63 細胞染色體眾數(shù)的影響31-38
• 4.1 模擬微重力效應(yīng)對MG-63 細胞染色體數(shù)目的影響31-36
• 4.2 討論36
• 4.3 本章小結(jié)36-38
• 第5章 模擬微重力效應(yīng)對MG-63 細胞紡錘體及其檢驗點蛋白MAD2 的影響38-46
• 5.1 模擬微重力效應(yīng)對MG-63 細胞紡錘體結(jié)構(gòu)的影響38-39
• 5.2 模擬微重力效應(yīng)使MG-63 細胞紡錘體多極化的量化分析39-40
• 5.3 模擬微重力效應(yīng)對MAD2 在m RNA水平表達的影響40-41
• 5.4 模擬微重力效應(yīng)對MAD2 在蛋白水平表達的影響41-42
• 5.5 討論42-45
• 5.6 本章小結(jié)45-46
• 結(jié)論46-47
• 參考文獻47-51
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文51-53
• 致謝53

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